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[发明专利]一种枯草芽孢杆菌自诱导基因表达系统-CN202111458760.3有效
发明人：周哲敏;崔文璟;郝文亮;叶乘锋;韩来闯;刘中美;周丽;郭军玲 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-12-02 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于Lux群体感应元件的枯草芽孢杆菌自诱导基因表达系统，属于基因工程技术领域。本发明将来源于V.fischeri的lux群体感应系统重新设计，并在野生型PluxI启动子的基础之上对其‑10区上游4bp进行随机建库获得了活性提升的突变体启动子P22，P47，P56和P58，并以sfGFP作为报告基因来检测所述系统表达外源蛋白的水平，将sfGFP置于PluxI，P22，P47，P56和P58启动子下游，结果显示突变后的启动子较野生型PluxI有了明显的提升。本发明提供的这种系统可高效表达外源蛋白，从而在外源蛋白高效表达和合成生物学研究中具有广阔的应用前景。
一种枯草芽孢杆菌诱导基因表达系统

[发明专利]一种无需诱导剂提高大肠杆菌中乙醇酸产量的方法-CN202010646581.1有效
发明人：邓禹;赵梅;毛银;叶乘锋;张佳南;娜荷芽;汪敏;周宇辰 -专利权人：江南大学
申请日： 2020-07-07 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种无需诱导剂提高大肠杆菌中乙醇酸产量的方法，属于生物工程领域。与前期已报道的生物合成法合成乙醇酸相比，本发明中所提到的乙醇酸发酵技术方案在没有添加诱导剂的情况下提高乙醇酸的产量。以葡萄糖为唯一碳源，pG‑1，pG‑2，pG‑3，pG‑4，pG‑5，pG‑6，pG‑7，pG‑8，pG‑9，pG‑10，pG‑11，pG‑12摇瓶发酵产量分别为2.42g/L，0.31g/L，0.208g/L，2.24g/L，3.02g/L，2.85g/L，1.53g/L，1.42g/L，1.18g/L，1.02g/L，0.85g/L，0.42g/L，pG‑5在发酵过程中获得最大的乙醇酸的产量，同时也获得最大产产率，为97％。通过发酵条件优化，pG‑5上罐发酵时产量达到15.53g/L。
一种无需诱导剂提高大肠杆菌乙醇产量方法

[发明专利]一种基于CRISPR-Cpf1的高效基因编辑系统的构建-CN202111466182.8在审
发明人：周哲敏;崔文璟;郝文亮;韩来闯;程中一;刘中美;周丽;郭军玲;叶乘锋 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-12-03 - 公布日： 2022-03-29 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于CRISPR‑Cpf1的高效基因编辑系统的构建，属于基因工程技术领域。本发明首先表征了来自于F.novicida的Cas蛋白Cpf1，将FnCpf1整合到枯草芽孢杆菌基因组的lacA位点。靶向不同基因的crRNA，将该crRNA置于枯草芽孢杆菌来源的强组成型启动子Pveg的下游，用于高强度表达对应的crRNA。通过选用不同靶向基因的crRNA，该基因组编辑方法被验证。菌落PCR结果显示，sacA基因，ligDV基因以及pps基因簇均能够实现高效的敲除。同时，为了验证该系统的敲入效率，外源基因sfGFP被高效敲除到sacA位点。为了进一步验证该系统的多基因敲除效率，本发明选择了sacA和aprE作为靶标，菌落PCR结果显示出了高效的敲除效率。
一种基于 crispr cpf1 高效基因编辑系统构建

[发明专利]Trc启动子突变文库及其应用-CN202010601496.3在审
发明人：邓禹;赵梅;张佳南;娜荷芽;周宇辰;汪敏;叶乘锋 -专利权人：江南大学
申请日： 2020-06-28 - 公布日： 2020-09-04 - 主分类号： C40B40/06 文献下载
摘要：本发明涉及Trc启动子突变文库及其应用，属于生物技术领域。本发明通过大量筛选获得了SEQ ID NO.1～41所示的启动子，他们调控目的基因表强度的范围较广，以此建立了Trc启动子突变文库。本发明通过构建启动子文库，将“开量”式微调基因表达成为可能，在代谢分析和改造中，突破了原来只能通过基因敲除和过量表达两种非“开”即“关”的手段来实现对细胞基因型的扰动，即可通过对目标基因表达进行梯度式的精确微调来分析和控制其对表型和代谢流分布的影响。
trc 启动子突变文库及其应用