本发明公开了一种金边土鳖多肽及其制备方法和应用,所述金边土鳖多肽其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,是通过以下方法制备而得:采用0.8wt%~1.0wt%的NaCl溶液对金边土鳖粗粉进行高速匀浆提取,得到提取液,再进行膜分离,得到分子量<5KDal的多肽,真空冷冻干燥,即得。本发明的金边土鳖多肽可缓解RTX诱导的PHN模型大鼠痛觉过敏、脊髓神经元损伤,同时可调控炎性因子、疼痛因子的表达及通过降低线粒体自噬程度来降低中枢神经敏感性,达到镇痛治疗作用;再进一步对该多肽类成分进行组分分析,明确了其包含一种有效成分速激肽相关肽,可为开发治疗神经病理性疼痛的药物提供潜在的靶点。