本发明涉及抹香鲸Mb及突变体H64D/V68IMb在降解磺胺类化合物中的应用，属于生物技术领域，所述H64D/V68IMb的核苷酸序列为：SEQ ID NO.1，野生型抹香鲸Mb的核苷酸序列为：SEQ ID NO.2。野生型抹香鲸Mb和突变体H64D/V68IMb在H2O2为氧化剂的条件下进行生物催化进行磺胺类化合物降解的方法，而且反应过程中用到的材料和反应后的产物基本不会产生对环境造成破坏或二次污染。降解过程十分稳定，且催化速度快，降解率高，30分钟降解率可以达到90％以上，在后续可以被准确地重复。
本发明提供一种具有促进大菱鲆卵巢发育的重组蛋白，所提供的重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2；改造后的重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:8。本发明所提供的重组蛋白可用于促进大菱鲆性腺发育。本发明采用重叠PCR技术将大菱鲆重组促性腺激素α亚基与β亚基进行拼接，采用毕赤酵母表达体系进行重组促性腺激素的表达，真核表达体系能进行复杂的翻译后修饰，有益于重组蛋白的活性。本发明成功表达的大菱鲆重组促性腺激素融合蛋白经过卵母细胞体外培养，可明显促进大菱鲆卵母细胞的成熟。
本发明提出了一种巨藻谷胱甘肽S‑转移酶基因在聚球藻对铜离子胁迫的耐受性中的应用。本发明中巨藻GST基因的核苷酸序列如SEQ ID No 1所示；本发明将巨藻GST基因转化到聚球藻中，使之能够在聚球藻中高效表达，提高了聚球藻对铜离子胁迫的耐受能力。本发明使含有巨藻GST基因的聚球藻转基因植株在铜离子胁迫条件下的生物量(OD750值)较野生聚球藻植株有显著增加，本发明聚球藻转基因植株在铜离子胁迫条件下较无胁迫条件下的叶绿素和类胡萝卜素含量变化不明显；因此，本发明所得的聚球藻转基因植株对铜离子有更强的耐受性。本发明操作简单，容易实现，工作量小，效率高，从根本上解决了铜离子对聚球藻生长胁迫的问题。
本发明提出了一种具有镉离子抗逆性的聚球藻株的构建方法。本发明包括以下步骤：1)取巨藻，提取RNA，合成cDNA，利用引物1F和引物1R，PCR扩增，得核苷酸序列如SEQ ID No 1所示的巨藻GST基因；2)将巨藻GST基因酶切，回收，纯化，与聚球藻蛋白表达载体连接，构建含有巨藻GST基因的聚球藻表达载体；3)将培养至对数期的聚球藻，离心，收集藻细胞，重悬，加入含有巨藻GST基因的聚球藻表达载体，培养，得具有镉离子抗逆性的聚球藻株。本发明利用巨藻GST基因得到了具有镉离子抗逆性的聚球藻株，这种聚球藻株在镉离子胁迫条件下能够正常生长，并能够正常进行光合作用，提高了在镉离子胁迫条件下的生长性能。
本发明提供了一种用于干扰三疣梭子蟹性别决定基因表达的RNAi试剂及其RNAi方法和应用。所述RNAi试剂中包含形成一个双链区的一条有义链和一条反义链；所述有义链的序列如SEQ ID No.2所示，所述反义链的序列如SEQ ID No.3所示。本发明利用所述的RNAi试剂能够高效敲降Dmrt基因在三疣梭子蟹早期发育时期的表达，且对三疣梭子蟹的损害较小，进而能够应用于三疣梭子蟹性别决定机制解析和性别控制技术研究，该方法操作简单，有助于梭子蟹单性养殖技术的突破，因此，具有广阔的应用前景。
