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[发明专利]一种糜蛋白酶的提取纯化方法-CN202211547629.9在审
发明人： 魏超娟;杨华英;徐富勇;夏鑫水;尚宏华;周颖颍 -专利权人：江西浩然生物制药有限公司
申请日： 2022-12-05 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N9/76 文献下载
摘要：本发明涉及蛋白质提取纯化技术领域，公开了一种糜蛋白酶的提取纯化方法，包括以下步骤：(1)将动物胰脏绞碎成浆后，加入硫酸溶液进行提取，过滤后得到滤液；(2)在滤液中加入硫酸铵，经静置沉淀、过滤、超滤浓缩，得到浓缩液；(3)在浓缩液中加入胰蛋白酶进行活化处理，得到活化液；(4)将活化液上样至阴离子交换层析柱中，经洗涤、洗脱处理后收集洗脱液；(5)将洗脱液上样至凝胶过滤层析柱，经冲洗后收集流出液；(6)流出液经超滤换盐、冻干，得到糜蛋白酶成品。本发明具有工艺时间短，操作简便的优点；并且本发明的纯化过程可以使糜蛋白酶理化性质和生物活性保持稳定，最终使糜蛋白酶的各项指标均符合中国药典标准。
一种蛋白酶提取纯化方法

[发明专利]一种抑肽酶的提取纯化方法-CN202211587331.0在审
发明人：胡著阳;万偲;耿卫锋;李菊根;魏超娟;夏克坚 -专利权人：江西浩然生物制药有限公司
申请日： 2022-12-05 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C07K14/81 文献下载
摘要：本发明涉及蛋白质提取纯化技术领域，公开了一种抑肽酶的提取纯化方法，包括以下步骤：(1)将牛肺绞碎成浆后加入硫酸溶液进行提取，过滤后得到滤液；(2)在所述滤液中加入三氯乙酸，经静置沉淀、过滤、超滤浓缩，得到浓缩液；(3)将所述浓缩液上样至疏水层析柱中，经洗涤、洗脱处理后收集洗脱液；(4)将所述洗脱液上样至凝胶过滤层析柱，经冲洗后收集流出液；(5)所述流出液经超滤换盐、冻干，得到抑肽酶成品。本发明具有工艺时间短，操作简便的优点，纯化过程可以使抑肽酶理化性质和生物活性保持稳定，最终使抑肽酶的各项指标均符合中国药典标准，本发明得到的抑肽酶效价达到6000KIU/mg以上，产品收率达85％以上。
一种抑肽酶提取纯化方法

[发明专利]一种人绒毛膜促性腺激素的制备方法-CN202210308456.9在审
发明人：胡著阳;魏超娟;熊磊;徐富勇;耿卫锋;夏鑫水 -专利权人：江西浩然生物制药有限公司
申请日： 2022-03-24 - 公布日： 2022-06-07 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种人绒毛膜促性腺激素的制备方法，包括以下步骤：(1)将人绒毛膜促性腺激素粗制品经过染料亲和层析纯化，得到中间体I；(2)将所述中间体I经过阴离子交换层析纯化，得到中间体II；(3)将所述中间体II经过凝胶过滤层析纯化，得到中间体III；(4)将所述中间体Ⅲ经过冷冻干燥，得到人绒毛膜促性腺激素成品。本发明以HCG粗制品为起始原料，依次采用染料亲和层析、阴离子交换层析以及凝胶过滤层析工艺，制备方法操作简便、生产成本低，获得的人绒毛膜促性腺激素效价及纯度更高，无外源蛋白的污染，HCG成品的效价不低于9000IU/mg，总收率不低于90％。
一种绒毛促性腺激素制备方法

[发明专利]用于产生新冠病毒中和抗体的新冠S抗原及其制备方法-CN202110658189.3在审
发明人：胡著阳;耿卫锋;林学良;郑晓伟;魏超娟;徐富勇 -专利权人：江西浩然生物制药有限公司
申请日： 2021-06-15 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： C07K14/165 文献下载
摘要：本发明公开了用于产生新冠病毒中和抗体的新冠S抗原及其制备方法，所述新冠S抗原具备基于Flag标签与细胞膜结合在一起的新冠S抗原三聚体，该新冠S抗原能够产生高效价的中和抗体，进而更加有效的对动物进行免疫。
用于产生病毒中和抗体抗原及其制备方法

[发明专利]一种达肝素钠分子量的控制方法-CN202110554876.0有效
发明人：胡著阳;徐富勇;林学良;魏超娟;耿卫锋 -专利权人：江西浩然生物制药有限公司
申请日： 2021-05-21 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： C08B37/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种达肝素钠分子量的控制方法。本发明通过一次降解、层析纯化、二次降解、还原、脱色及干燥制得达肝素钠成品。本发明通过一次降解的将分子量控制在6900‑7500之间，层析纯化之后将再将本应去除的大分子部分进行第二次降解，充分利用了肝素钠原料，使达肝素钠收率明显提高，收率达85%以上。与现有技术相比，本发明方法操作简单易行，对分子量及分子量分布控制准确，所有工序均在常温常压下进行，离子交换工艺易于生产放大，重现性好，具有重要的应用前景。
一种肝素钠分子量控制方法

[发明专利]一种依诺肝素钠微球的制备方法-CN201811200817.8有效
发明人：万偲;胡著阳;魏超娟;李国龙;纪明妹 -专利权人：江西浩然生物医药有限公司
申请日： 2018-10-16 - 公布日： 2021-04-20 - 主分类号： A61K9/50 文献下载
摘要：本发明涉及一种依诺肝素钠微球的制备方法，该方法以PLGA(乳酸和羟基乙酸缩合得到的聚酯)(50:50)为载体材料，对依诺肝素钠进行微球化，其主要步骤为：将依诺肝素钠水溶液加入PLGA二氯甲烷溶液中形成初乳；将初乳加入PVA(聚乙烯醇)水溶液中，形成复乳；在常温下进行真空干燥，即得依诺肝素钠微球。本方法安全无毒，稳定性好，操作简便。本发明所制依诺肝素钠微球粒径均一，载药量及包封率高，生物相容性好，为国内首创可口服给药且具有缓释功效的依诺肝素钠纳米微球。
一种肝素钠制备方法

[发明专利]一种高纯度尿促性素的提取制备方法-CN201711087199.6有效
发明人：胡著阳;魏超娟;徐富勇;万偲;夏鑫水 -专利权人：江西浩然生物医药有限公司
申请日： 2017-11-07 - 公布日： 2020-07-14 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明提供一种高纯度尿促性素的制备方法，该制备方法包括以下步骤：(1)人绝经期促性腺激素粗制品经过阴离子交换层析纯化，得到高中间体I；(2)中间体I经过阳离子交换层析纯化，得到中间体II；(3)中间体II经过染料亲和层析纯化，得到高纯度尿促性素。本发明依次采用阴离子交换层析、阳离子交换层析、染料亲和层析工艺，提取纯化制得高纯度HMG。经过阴离子交换层析与阳离子交换层析，HMG纯化倍数可达60倍以上。利用FSH及LH能与染料亲和吸附的性质，进一步去除杂质蛋白。经过3步层析工艺，使HMG纯化倍数达到500倍以上，从而获得高纯度尿促性素，其中FSH与LH比例约为1:1。
一种纯度尿促性素提取制备方法

[发明专利]一种糜蛋白酶的提取纯化方法-CN201911418800.4在审
发明人： 魏超娟;徐富勇;夏鑫水;纪明妹;饶志凯 -专利权人：江西浩然生物制药有限公司
申请日： 2019-12-31 - 公布日： 2020-04-07 - 主分类号： C12N9/76 文献下载
摘要：本发明涉及一种糜蛋白酶的提取纯化方法。本发明采用硫酸溶液从动物胰脏中提取糜蛋白酶，经硫酸铵一次沉淀杂蛋白后进行疏水层析和亲和层析，具有工艺时间短，操作简便的优点。纯化过程可以使糜蛋白酶理化性质和生物活性保持稳定，最终使糜蛋白酶的各项指标均符合中国药典标准。通过工艺优化，糜蛋白酶效价提高到2700U/mg以上。
一种蛋白酶提取纯化方法

[发明专利]一种高纯度尿促卵泡素的制备方法-CN201610528438.6有效
发明人：万偲;魏超娟;徐富勇;黄优生;胡著阳;李菊根 -专利权人：江西浩然生物医药有限公司
申请日： 2016-07-07 - 公布日： 2020-01-03 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明提供一种高纯度尿促卵泡素（urine Follicle Stimulating Hormone，u‑FSH）的制备方法，该制备方法包括以下步骤：(1)人绝经期促性腺激素（Human Menopausal Gonadotropin，HMG）粗制品经过阴离子交换层析纯化，得到尿促卵泡素中间体I；(2)尿促卵泡素中间体I经过阳离子交换层析纯化，得到尿促卵泡素中间体II；(3)尿促卵泡素中间体II经过染料亲和层析纯化，得到尿促卵泡素中间体III；(4)尿促卵泡素中间体Ⅲ经过疏水层析纯化，得到高纯度尿促卵泡素。本方法具有操作简便、生产成本低，获得的尿促卵泡素中卵泡刺激素（Follicle Stimulating Hormone，FSH）纯度更高，黄体生成素（Luteotropic Hormone，LH）含量更低，无外源蛋白污染的优点。
一种纯度卵泡制备方法

[发明专利]一种层析和超滤分离技术制备依诺肝素钠的方法-CN201811286659.2在审
发明人：胡著阳;魏超娟;黄优生;耿卫锋;李国龙 -专利权人：江西浩然生物医药有限公司
申请日： 2018-10-31 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C08B37/10 文献下载
摘要：本发明公开一种层析和超滤分离技术制备依诺肝素钠的方法。肝素钠依次经过季铵盐盐化、苄基酯化、碱性降解、过滤除杂、氧化脱色等处理得到依诺肝素钠粗品；依诺肝素钠粗品经过离子交换层析、超滤分离、冻干得到符合要求的依诺肝素钠精品。本发明利用离子交换层析技术对依诺肝素钠的分子量及分布进行有效控制；通过超滤分离技术与层析技术有效的结合，达到浓缩和脱盐的目的，减少了有机溶剂的使用，同时缩小了冻干的体积，提高了产能，节约了成本。
依诺肝素钠超滤分离技术粗品冻干种层制备离子交换层析技术离子交换层析有效的结合层析技术超滤分离过滤除杂碱性降解氧化脱色有机溶剂有效控制肝素钠季铵盐苄基酯产能脱盐盐化浓缩节约精品

[发明专利]一种基于超滤浓缩从大体积孕妇尿液中提取绒促性素粗品的方法-CN201510514368.4在审
发明人：万偲;魏超娟;黄朝晖;张素芳;徐富勇 -专利权人：江西浩然生物医药有限公司
申请日： 2015-08-21 - 公布日： 2015-11-25 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：一种基于超滤浓缩从大体积孕妇尿液中提取绒促性素粗品的方法，方法步骤为：a.收集新鲜孕妇尿液，超滤浓缩；b.向尿浓缩液加入苯甲酸钠搅拌溶解；c.盐酸酸化，析出大量白色不溶物，过滤收集不溶物甩干；d.向不溶物中搅拌加入预冷的酒精析出大量絮状沉淀，静置；e.虹吸e中的溶液上清液，抽滤收集沉淀，脱水，干燥。采用上述方法生产人尿绒促性素粗品，较传统粗品制备方法，超滤浓缩后进行苯甲酸钠吸附，一方面减少了苯甲酸钠、盐酸和乙醇用量，降低了生产成本；另一方面浓缩后的尿液HCG浓度增加更利于苯甲酸钠对HCG的吸附，提升吸附效率，活性收率提高至80%。
一种基于超滤浓缩体积孕妇尿液提取绒促性素粗品方法

[发明专利]一种亲和沉淀介质的合成方法及其制备依诺肝素钠的应用-CN201310477846.X有效
发明人：杨华英;万偲;张素芳;杨丽琴;高铁旦;魏超娟 -专利权人：南昌市浩然生物医药有限公司
申请日： 2013-10-14 - 公布日： 2014-02-05 - 主分类号： C08B37/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种亲和沉淀介质的合成方法及其制备依诺肝素钠的应用，在经亲和沉淀介质纯化的肝素钠溶液中用苄索氯铵盐盐化肝素，肝素苄索氯铵盐酯化生成肝素苄基酯，在碱性条件下对肝素苄基酯进行解聚，经乙醇沉淀后得到依诺肝素钠粗品，双氧水简单的氧化脱色后即得依诺肝素钠精品。本发明以肝素钠粗品为原料并采用亲和沉淀介质纯化，有效的去除与肝素结合或非结合的杂质，并保证了肝素天然结构的完整性，增加了肝素的活性收率，为后续依诺肝素钠的制备工艺的稳定性和可控性提供依据。本发明降低了生产成本，提高了生产效率，更适于工业化生产。
一种亲和沉淀介质合成方法及其制备肝素钠应用

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