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[发明专利]一种敲除人ezrin基因增强子的食管癌细胞株的构建方法-CN201710957308.9在审
发明人： 高书颖;张青峰;李文娜;莫镇涛 -专利权人：遵义医学院
申请日： 2017-10-16 - 公布日： 2017-12-29 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学领域，具体涉及CRISPR/Cas9靶向敲除人ezrin基因增强子的方法、用于靶向人ezrin基因增强子的特异性gRNA以及一种敲除人ezrin基因增强子的食管癌细胞株。本发明提供了用于敲除人ezrin基因增强子的特异性gRNA，所述gRNA的靶DNA序列为SEQ ID NO.1‑4所示序列中的任意一条序列。本发明提供了一种敲除人食管癌细胞ezrin基因增强子的方法，为利用CRISPR/Cas系统在人食管癌细胞中对ezrin基因进行改造。本发明还提供了一种敲除人ezrin基因增强子的食管癌细胞株，为研究ezrin基因表达与肿瘤侵袭移动的相关性提供了有效的平台。
一种 ezrin 基因增强食管癌细胞株构建方法

[发明专利]CRISPR/Cas9靶向敲除人ezrin基因增强子关键区的方法及其特异性gRNA-CN201610889009.1在审
发明人： 高书颖;张青峰;郭晓龙 -专利权人：遵义医学院
申请日： 2016-10-12 - 公布日： 2017-02-22 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学领域，具体涉及CRISPR/Cas9靶向敲除人ezrin基因增强子关键区的方法及其特异性gRNA，本发明根据CRISPR/Cas9的设计原则，在人ezrin基因增强子关键区的上下游设计两个靶位点，合成相应的寡核苷酸序列，并连接至载体pX459上构建重组质粒，将其转染人食管癌细胞株，能够特异性敲除人ezrin基因增强子关键区。本发明对研究以人ezrin基因增强子为靶点的肿瘤临床治疗具有重要意义。
crispr cas9 靶向 ezrin 基因增强关键方法及其特异性 grna

[发明专利]重组慢病毒及其制备方法和应用-CN201019164026.9无效
发明人： 高书颖;于洁;尹美珺 -专利权人：北京大学深圳医院
申请日： 2010-02-01 - 公布日： 2011-08-03 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组慢病毒及其制备方法和应用，该重组慢病毒含有人端粒酶逆转录酶hTERT基因、cPPT元件和WPRE元件，由四质粒系统包装形成，这四种质粒包括：包装质粒pLP1、包装质粒pLP2、包膜质粒pLP/VSVG和载体质粒。该重组慢病毒的制备方法，包括：构建人端粒酶逆转录酶hTERT基因重组慢病毒表达载体；采用四质粒系统包装携带hTERT基因的重组慢病毒。该重组慢病毒可应用于人细胞永生化。本发明提供了一种携带人端粒酶逆转录酶hTERT基因的重组慢病毒及其制备方法和应用，所提供的重组慢病毒更有利于目的基因整合至宿主细胞染色体，宿主范围更广，拥有多个关键的内置安全特性，对于实现多种类型细胞永生化具有重要作用。
重组病毒及其制备方法应用

[发明专利]人食管癌细胞Fascin基因启动子区调控元件-CN200710026290.7无效
发明人：许丽艳;郭张燕;高书颖;杨章民;谢剑君;李恩民 -专利权人：汕头大学医学院
申请日： 2007-01-12 - 公布日： 2007-08-15 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明涉及基因表达调控，公开了一种人食管癌细胞Fascin1基因启动子区调控元件。本发明首次鉴定了人食管癌细胞Fascin1基因启动子，并将5′端序列逐渐缺失的启动子序列插入报告基因上游构建了一系列真核表达质粒，转染哺乳动物细胞瞬时表达，确定了人Fascin1基因启动子在食管癌细胞中转录活性的关键调控元件－74～－41。本发明对研究Fascin1在肿瘤细胞中的表达调控机制以及以Fascin1为靶点的临床治疗具有重要意义。将有助于从分子水平上探索食管癌的发病机制，为食管癌的防治提供新的理论依据。
食管癌细胞 fascin 基因启动子区调控元件

[发明专利]人食管癌细胞ezrin基因上游转录调控元件-CN200610123684.X无效
发明人：许丽艳;高书颖;李恩民 -专利权人：汕头大学医学院
申请日： 2006-11-21 - 公布日： 2007-05-23 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明涉及基因表达调控，公开了一种人食管癌细胞ezrin基因的上游转录调控区。本发明首次将ezrin基因上游序列插入含报告基因的载体构建了一系列真核表达质粒，转染哺乳动物细胞瞬时表达，确定了人ezrin基因上游序列在食管癌细胞中的重要转录调控元件，包括负调控元件和增强子序列。本发明对研究Ezrin在肿瘤细胞中的表达调控机制以及以Ezrin为靶点的临床治疗具有重要意义。将有助于从分子水平上探索食管癌的发病机制，为食管癌的防治提供新的理论依据。
食管癌细胞 ezrin 基因上游转录调控元件