本发明公开了一种检测耐甲氧西林金葡菌的CPA引物及其检测试剂盒和检测方法，该CPA引物是针对两个靶点femA及mecA设计的，包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s，以及特异引物2a、3a，引物序列如前文SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.10所示；其检测方法是建立检测femA和mecA的交叉引物恒温扩增反应体系，进行交叉引物恒温扩增反应，观察两个反应体系颜色变化，若两个反应体系颜色都变为绿色，说明待检测样品中含有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；否则说明检测样品中不含有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。本发明的引物和方法检测时间快，可以在60分钟左右获得检测结果；此外，检测灵敏度高，达到fg/μL的级别。
本发明公开了产肠毒素B(SEB)金黄色葡萄球菌的CPA检测引物及其检测试剂盒和方法。该CPA引物包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s，以及特异引物2a、3a；其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.5所示。本发明中所提供的针对金黄色葡萄球菌肠毒素B基因序列所设计的交叉引物恒温扩增反应检测鉴定体系，解决现有技术方法所需周期长，灵敏度低，成本高，现场应用困难等缺陷。通过选择目标菌株的肠毒素B基因序列的保守区域，设计一对剥离引物、交叉引物和特异引物构建交叉引物恒温扩增反应体系，并在60分钟左右获得检测结果以缩短传统检测产肠毒素B金黄色葡萄球菌的周期。
本发明公开了单增李斯特菌的CPA引物、检测试剂盒和检测方法，该引物包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s，以及特异引物2a、3a；其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑NO.5所示。本发明针对单增李斯特菌特异性靶序列hlyA所设计的交叉引物恒温扩增反应检测鉴定体系，解决了现有的检测技术方法耗时长，灵敏度低，成本高，现场应用困难等缺陷。通过选择目标菌株的特异性序列hlyA的保守区域，设计一对剥离引物、交叉引物和特异引物构建交叉引物恒温扩增反应体系，并在60分钟左右获得检测结果以缩短传统单增李斯特菌检测的周期。
本发明公开了一种检测肠毒素SEA的PSR引物、检测试剂盒和检测方法，所述引物包括检测引物Ft和检测引物Bt，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明针对肠毒素SEA设计的PSR检测引物和方法解决了现有技术方法所需周期长，灵敏度低，成本高，现场应用困难等问题。通过选择目标菌株的SEA肠毒素特异性序列的保守区域，设计一对检测引物Ft和Bt构建PSR反应体系，并在60分钟左右获得检测结果，较传统MRSA肠毒素的检测方法大大缩短了检测周期。
本发明公开了一种杀白细胞毒素阳性金黄色葡萄球菌的CPA引物及其检测试剂盒和检测方法，针对靶点pvl设计的CPA引物包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s，以及特异引物2a、3a；其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.5所示。本发明针对金葡杀白细胞毒素特异性靶序列pvl设计了一对剥离引物、交叉引物和特异引物，构建了交叉引物恒温扩增反应体系，60分钟左右就能实现对携带杀白细胞毒素基因pvl金葡菌的检测，并且检测限达到pg/μL的级别，克服了现有检测技术周期长、灵敏度低、成本高、现场应用困难等缺陷。
本发明公开了一种沙门氏菌的CPA检测引物及检测试剂盒和检测方法，该针对靶点invA设计的CPA引物包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s，以及特异引物2a、3a；其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.5所示。本发明中所提供的针对沙门氏菌特异性靶序列invA所设计的交叉引物恒温扩增反应检测鉴定体系，解决了现有技术方法所需周期长，灵敏度低，成本高，现场应用困难等缺陷。通过选择目标菌株的特异性序列invA的保守区域，设计一对剥离引物、交叉引物和特异引物构建交叉引物恒温扩增反应体系，可在60分钟左右获得检测结果以缩短传统沙门氏菌检测的周期。
本发明公开了一种交叉引物恒温技术检测MRSA肠毒素的引物、试剂盒及方法。本发明针对MRSA肠毒素SEA设计的CPA引物包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s以及特异引物2a、3a；其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑SEQ IDNO.5所示。构建的交叉引物恒温扩增体系可以通过反应体系的荧光染料显色实现1小时左右判断fg/μL级肠毒素SEA的存在，解决了现有技术方法所需周期长、灵敏度低、成本高、现场应用困难等缺陷。
本发明公开了一种大肠杆菌O157:H7的CPA引物及其检测试剂盒和检测方法，该针对靶点rfbE设计的CPA引物包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s，以及特异引物2a、3a；其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.5所示。本发明中所提供的针对E.coliO157:H7特异性靶序列rfbE及stx1所设计的交叉引物恒温扩增反应检测鉴定体系，解决现有技术方法所需周期长，灵敏度低，成本高，现场应用困难等缺陷。通过选择目标菌株的特异性序列rfbE及stx1的保守区域，设计一对剥离引物、交叉引物和特异引物构建交叉引物恒温扩增反应体系，并在60分钟左右获得检测结果以缩短传统大肠杆菌检测的周期。
本发明公开了一种大肠杆菌志贺毒素II型的CPA检测引物、试剂盒及方法。本发明针对大肠杆菌志贺毒素II型特异性靶序列stx2设计了CPA检测引物，其引物序列如SEQ ID NO.1～5所示，该引物保证了检测结果的可靠性。本发明还提供了一种大肠杆菌志贺毒素II型的CPA检测试剂盒，其具有灵敏度高、适用性好，特异性好，操作简便快速，结果准确可靠，检测成本低等优点。利用上述CPA检测引物或CPA检测试剂盒对待测样品进行交叉引物恒温扩增反应，可通过荧光染料对结果直接进行肉眼判读，快速、准确的检测出待测样品中是否含有大肠杆菌志贺毒素II型，特别适用中小型单位及现场检测。
本发明公开了一种铜绿假单胞菌的CPA检测引物、试剂盒及方法。该CPA检测引物是针对靶点oprL设计的，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～5所示。本发明还提供一种铜绿假单胞菌的CPA检测试剂盒，其具有灵敏度高、特异性好，适用性好，操作简便快速，结果准确可靠，检测成本低等优点。利用上述CPA检测引物或CPA检测试剂盒对待测样品进行交叉引物恒温扩增反应，可通过荧光染料显色对结果直接进行肉眼判读，快速、准确的检测出待测样品中是否含有铜绿假单胞菌，这对于提高重大群体疾病诊断率，早期的疾病诊断具有非常重要的意义。
