本申请涉及一种用于同时检测HSV‑1、HSV‑2和VZV的组合物、试剂盒和方法。该组合物包括:组分A:用于检测人单纯疱疹病毒1型的上游引物1、下游引物1和探针1,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑3所示;组分B:用于检测人单纯疱疹病毒2型的上游引物2、下游引物2和探针2,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.4‑6所示;和组分C:用于检测水痘‑带状疱疹病毒的上游引物3、下游引物3和探针3,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.7‑9所示。利用该组合物或包括该组合物的试剂盒可同时鉴别人单纯疱疹病毒1、2型和水痘‑带状疱疹病毒,具有较高的特异性和灵敏性,可重复性好,检测简便快速、节约成本。