本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种pH耐受性提高的谷氨酸脱羧酶突变体及其在γ‑氨基丁酸合成中的应用,该突变体通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的谷氨酸脱羧酶突变得到。该突变体在pH 6.5时的酶活提高至原始(SEQ ID NO.3所示)的178%,在5L罐中12h分批补料1000g底物最终产量高达688.13g/L,比原始谷氨酸脱羧酶生产性能提高约52%,最终摩尔转化率可达98.2%。本发明不仅拓宽了GAD在最适pH下的酶活,还拓宽其在偏中性pH下的酶活,增强了该酶合成γ‑氨基丁酸的能力,使其更适应于工业生产。
本发明涉及一种谷氨酸脱羧酶突变体及其在γ‑氨基丁酸生产中的应用,属于生物工程技术领域。本发明所述谷氨酸脱羧酶突变体酶活提高19.8%,同时在60℃孵育24h仍能保持90%的催化活性。以重组谷氨酸棒杆菌的谷氨酸脱羧酶突变体进行转化时,在5L罐中12h分批补料800g底物最终产量高达547.51g/L,比序列如SEQ ID NO.3所述的谷氨酸脱羧酶提高约67.13%,最终底物摩尔转化率达到97.67%。本发明有效提高谷氨酸脱羧酶的酶活以及热稳定性,为工业上高产γ‑氨基丁酸奠定了基础。