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[发明专利]基于甲基化免疫沉淀高通量测序技术的肺癌检测方法-CN202110815235.6在审
发明人：胡新蕾;钟晟;严晓芹;闫子玥 -专利权人：深圳泰莱生物科技有限公司
申请日： 2021-07-19 - 公布日： 2021-11-02 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明涉及肺癌检测技术领域，尤其涉及基于甲基化免疫沉淀高通量测序技术的肺癌检测方法。本发明使用靶向捕获技术进行ctDNA 5mC高通量测序的检测方法，通过机器学习相关算法，实现通过对ctDNA多表观遗传组学进行免疫检查位点抑制剂响应的预测。这种无创、实时的检测方法将为免疫检查位点抑制剂的应答提供重要分子靶标，便于后续的研究、诊断。
基于甲基化免疫沉淀通量技术肺癌检测方法

[发明专利]一种捕获cfDNA5mC片段的检测方法-CN202110844659.5在审
发明人：钟晟;胡新蕾;严晓芹;闫子玥 -专利权人：深圳泰莱生物科技有限公司
申请日： 2021-07-26 - 公布日： 2021-10-29 - 主分类号： C12Q1/6804 文献下载
摘要：本发明公开了一种捕获cfDNA5mC片段的检测方法，包括以下步骤：步骤一：准备试剂；步骤二：制备Incubation Mix，在4℃下操作；步骤三：抗体Antibody稀释1：15，抗体放置在‑80℃，0.5ul抗体+7.5ulH2O(过量)，抗体用完后及时放回‑80℃；步骤四：Antibody Mix制备，过量，2个样品一般制备3个的量；步骤五：Incubation Mix+Antibody Mix混合，4℃转速40旋转孵育过夜，17h；步骤六：Ipure Kit v2试剂准备。该种捕获cfDNA5mC片段的检测方法，胞嘧啶第五碳的甲基化(5‑甲基胞嘧啶：5mC)是最早在真核生物中被挖掘出的甲基化类型，在基因表达中，转录起始位点区域通常是非甲基化的，而在基因较低水平表达时，调控区域的胞嘧啶甲基化水平较高，不同起始量和不同方法所产生的文库相关性，是评估一致性和高性能的有效参数。
一种捕获 cfdna5mc 片段检测方法

[发明专利]一种多重巢式PCR方法-CN202110830790.6在审
发明人：钟晟;胡新蕾;严晓芹;闫子玥 -专利权人：成都泰莱医学检验实验室有限公司
申请日： 2021-07-22 - 公布日： 2021-10-26 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：一种多重巢式PCR方法，涉及基因标志物检测技术领域，本发明利用多重PCR和巢式PCR相结合，利用3种目的基因的基因标志物，设计全新的PCR引物，针对cfDNA5hmC富集捕获文库，使用touchdownPCR及热启动PCR方法进行多重巢式PCR扩增，避免PCR过程中引物二聚体、发夹结构的形成，保证了PCR扩增的特异性，进而完成靶序列的富集，得到二代测序靶向测序文库；通过对3个目的基因区域和1个基因间区域的羟甲基化状态的高效检测，实现在较低测序深度下完成对基因标志物中5hmC含量的检测，从而大幅降低测序成本，成为一种高效率、低成本的肝癌早期诊断检测手段。
一种多重 pcr 方法

[发明专利]一种捕获cfDNA5hmC片段的检测方法-CN202110846330.2在审
发明人：钟晟;胡新蕾;严晓芹;闫子玥 -专利权人：深圳泰莱生物科技有限公司
申请日： 2021-07-26 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种捕获cfDNA5hmC片段的检测方法，包括以下步骤：步骤一：预先准备需要使用的试剂，置于冰上，建立体系，温度时间为37℃、2h；步骤二：加入2.5μlDBCO‑PEG4‑biotin,37℃，孵育2h；步骤三：再使用MicroBio‑spin30column(Bio‑Rad)纯化；步骤四：取5μlCI磁珠，吹打均匀后置于磁力架上，待澄清后吸走上清液，加50μl的2*buffer1在旋转架上孵育3min后。该种捕获cfDNA5hmC片段的检测方法，利用链霉亲和素涂层磁珠扩增生物素化的DNA片段。该磁珠可以进行“下拉”分析，将具有5hmC的DNA分子与没有生物标记的DNA分子分离，通过对目标片段进行测序和生物信息学分析，最终获得表观遗传标记，很大程度上提高了5hmC捕捉的效率。
一种捕获 cfdna5hmc 片段检测方法

[发明专利]基于5hmC点击化学高通量测序技术的肺癌检测方法-CN202110821850.8在审
发明人：钟晟;胡新蕾;严晓芹;闫子玥 -专利权人：深圳泰莱生物科技有限公司
申请日： 2021-07-19 - 公布日： 2021-09-24 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明涉及肺癌检测技术领域，尤其涉及基于5hmC点击化学高通量测序技术的肺癌检测方法。本发明使用靶向捕获技术进行5hmC高通量测序的检测方法，通过机器学习相关算法，实现通过对ctDNA多表观遗传组学进行免疫检查位点抑制剂响应的预测。这种无创、实时的检测方法将为免疫检查位点抑制剂的应答提供重要分子靶标，便于后续的研究、诊断。
基于 hmc 点击化学通量技术肺癌检测方法

[发明专利]一种多重巢式PCR方法-CN202110504701.9在审
发明人：钟晟;胡新蕾;严晓芹;闫子玥 -专利权人：成都泰莱医学检验实验室有限公司
申请日： 2021-05-10 - 公布日： 2021-07-30 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：一种多重巢式PCR方法，涉及基因标志物检测技术领域，本发明利用多重PCR和巢式PCR相结合，利用4种目的基因的基因标志物，设计全新的PCR引物，针对cfDNA5hmC富集捕获文库，使用touchdownPCR及热启动PCR方法进行多重巢式PCR扩增，避免PCR过程中引物二聚体、发夹结构的形成，保证了PCR扩增的特异性，进而完成靶序列的富集，得到二代测序靶向测序文库；通过对4个目的基因的羟甲基化状态的高效检测，实现在较低测序深度下完成对基因标志物中5hmC含量的检测，从而大幅降低测序成本，成为一种高效率、低成本的肝癌早期诊断检测手段。
一种多重 pcr 方法