本发明属于病毒基因组学和药物基因组学领域,具体涉及一种检测巨细胞病毒UL54和UL97基因耐药突变的巢式PCR引物和方法。首先公开了一种用于巢式PCR方法检测巨细胞病毒的引物组,包括长引物组、短引物组和通用测序引物组;所述长引物组的核苷酸序列选自以下任意一组:SEQ ID NO:1‑2或SEQ ID NO:3‑4;所述短引物组的核苷酸序列选自以下任意一组:SEQ ID NO:5‑6、SEQ ID NO:7‑8、SEQ ID NO:9‑10、SEQ ID NO:11‑12、SEQ ID NO:13‑14、SEQ ID NO:15‑16、SEQ ID NO:17‑18、SEQ ID NO:19‑20、SEQ ID NO:21‑22、SEQ ID NO:23‑24、SEQ ID NO:25‑26、SEQ ID NO:27‑28、SEQ ID NO:29‑30、SEQ ID NO:31‑32或SEQ ID NO:33‑34;所述通用测序引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:36所示。本发明公开了一种快速、准确的测定UL54、UL97全部编码序列的方法,该方法可用于分析耐药突变的类型,为临床治疗提供指导。
本发明提供了一种FLT3‑ITD突变高灵敏度检测方法及试剂盒,该试剂盒包括上游引物和下游引物,所述上游引物核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,所述下游引物核苷酸序列如SEQ ID No.2所示,该引物所扩增的核苷酸序列覆盖整个14和15号外显子,从而提高了FLT3‑ITD突变检出率。利用该试剂盒得到的PCR产物,采用毛细管电泳检测突变检测灵敏度达0.01%,使用一步法扩增体系毛细管电泳技术检测FLT3‑ITD突变达到国外检测灵敏度水平,因此,本发明所述FLT3‑ITD突变检测方法是一种以DNA为样本来源的快速、方便、准确、低成本的检测方法,其在FLT3‑ITD突变检测中具有广泛的应用前景。
本发明涉及生物技术领域,公开了用于检测BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变位点的扩增引物,其上游引物核苷酸序列如SEQ ID No.1或如SEQ ID No.2所示,下游引物核苷酸如SEQID No.3所示。本发明还公开一种检测BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变位点的方法及试剂盒。本发明经一步法PCR扩增CML患者的BCR/ABL融合基因,再用特异性测序引物进行测序,在一个反应体系中可以检测二十多种常见的BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变,降低了实验的成本,极大的提高了基因测序结果的准确性和灵敏度,有着大规模推广应用的前景。