本发明公开了一种促进N‑乙酰氨基葡萄糖生产的蛋白质起始因子IF3突变体及其应用。本发明的突变体是在氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的亲本上，将158位的天冬酰胺突变为谷氨酸，将161位的丙氨酸突变为精氨酸，将162位的天冬氨酸突变为甘氨酸，以及将163位的苯丙氨酸突变为丝氨酸。本发明提供了一种促进N‑乙酰氨基葡萄糖生产的蛋白质起始因子IF3突变体，以及能提高N‑乙酰氨基葡萄糖产量的基因工程菌株，通过过表达参与碳代谢调控的蛋白质起始因子IF3，提高了N‑乙酰氨基葡萄糖在胞外的积累量，其浓度最高可达28.3g/L，为进一步代谢工程改造谷氨酸棒杆菌生产氨基葡萄糖奠定了基础。本发明提供的重组谷氨酸棒杆菌构建方法简单，便于使用，具有很好地应用前景。
本发明公开了一种促进N‑乙酰氨基葡萄糖生产的RamA转录因子突变体及其应用。本发明的突变体是在氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的亲本上，将90位的赖氨酸突变为天冬酰胺，以及将92位的丝氨酸突变为赖氨酸。本发明提供了一种促进N‑乙酰氨基葡萄糖生产的RamA转录因子突变体，并提供了过表达RamA转录因子突变体，能提高N‑乙酰氨基葡萄糖产量的基因工程菌株，通过过表达参与碳代谢调控的转录因子RamA，提高了N‑乙酰氨基葡萄糖在胞外的积累量，其浓度最高可达31.5g/L，为进一步代谢工程改造谷氨酸棒杆菌生产氨基葡萄糖奠定了基础。本发明提供的重组谷氨酸棒杆菌构建方法简单，便于使用，具有很好地应用前景。
本发明公开了一种提高外源基因mRNA数量的DNA及其应用，属于基因工程技术领域。本发明的重复性回文序列及其间隔区序列序列如SEQ ID NO.1所示，该信号肽能通过改变mRNA的二级结构提高其稳定性，从而够使目的蛋白环糊精葡萄糖基转移酶的胞外酶活提升14％，采用该信号肽改造后重组大肠杆菌胞外产蛋白能力有所增强，可以用于大肠杆菌表达外源蛋白。
