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[发明专利]一种使用封闭式系统培养临床级脐带血间充质干细胞的方法-CN202110373232.1有效
发明人： 连祺周;连文轩 -专利权人：德泉生物医学技术（深圳）有限公司
申请日： 2021-04-07 - 公布日： 2023-03-17 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及细胞治疗技术领域，尤其涉及一种使用封闭式系统培养临床级脐带血间充质干细胞的方法，包括如下步骤：步骤(一)、采集脐带血；步骤(二)、使用一次性封闭系统从脐带血中分离hUCB‑MSCs；步骤(三)、对hUCB‑MSCs进行培养及扩增；步骤(四)、对hUCB‑MSCs进行质量控制。本发明采用一次性封闭系统规模化生产临床级hUCB‑MSCs，并经过严格的间充质干细胞质量控制与安全性评价体系的检测，不仅克服了供体细胞的来源少的问题，并且无伦理学的争议；此外封闭式培养系统降低了MSCs生产过程中外源性污染风险，减轻了环境要求负担，并且保证了产品质量。
一种使用封闭式系统培养临床脐带血间充质干细胞方法

[发明专利]用于治疗或预防结晶样视网膜色素变性的基因载体及其用途-CN201810907363.1有效
发明人： 连祺周;张昭 -专利权人：深圳泓熙生物科技发展有限公司
申请日： 2018-08-10 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： C12N15/864 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于治疗或预防结晶样视网膜色素变性(BCD)的基因载体以及其用途。本发明所述的用于治疗或预防结晶样视网膜色素变性的基因载体，包括：包装质粒，是插入了抗CD59短肽C9的基因序列的AAV2包装质粒；以及载体质粒，是插入了人类细胞色素P450超家族蛋白CYP4V2的基因序列、抗VEGF短肽HRH的基因序列、启动子序列的AAV载体质粒。该AAV载体能够融合表达C9抗CD59短肽至病毒壳蛋白；能够实现CYP4V2及HRH共表达，补偿RPE细胞中CYP4V2基因突变所致蛋白功能缺失，可有效修复RPE细胞的正常功能，并可特异性拮抗血管内皮生长因子VEGF，延缓脉络膜增生所致的视网膜萎缩。本发明还提供了将所述的基因载体用于制备治疗或预防结晶样视网膜色素变性(BCD)的药物的用途。
用于治疗预防结晶视网膜色素变性基因载体及其用途

[发明专利]包含芳基硫酸酯酶A的重组载体及其在用于治疗异染性脑白质营养不良的干细胞治疗中的用途-CN202080018533.6在审
发明人： 连祺周 -专利权人：港大科桥有限公司
申请日： 2020-02-28 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：提供了包含表达盒的重组慢病毒载体，所述表达盒包含表达ARSA基因的核酸构建体。所述载体可用于治疗异染性脑白质营养不良的基因治疗。提供了制备所述载体的方法。提供了包含载体的多能干细胞。还提供了培养干细胞以保持其多能性的方法。
包含硫酸酯酶重组载体及其用于治疗异染性脑白质营养不良干细胞中的用途

[发明专利]MSC-TNF α-AB干细胞及其制备方法和应用-CN201610283119.3有效
发明人： 连祺周 -专利权人： 连祺周
申请日： 2016-05-03 - 公布日： 2021-02-09 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞治疗技术领域，尤其涉及一种MSC‑TNFα‑AB干细胞及其制备方法和应用。MSC‑TNFα‑AB干细胞为重组间充质干细胞，其整合有TNFα抗体基因。本发明还提供一种可以使MSC‑TNFα‑AB干细胞在炎症因子TNFα存在的情况下正向激活表达TNFα‑AB的启动子。本发明通过体外慢病毒方法在间充质干细胞中过表达TNFαAB基因，构建的MSC TNFα‑AB干细胞在炎症环境中会被TNFα炎症因子激活，更稳定地结合到炎症位点，从而加强MSC的抗炎与免疫调节能力，有效缓解骨关节炎的炎症反应。
msc tnf ab 干细胞及其制备方法应用

[发明专利]启动子、重组间质干细胞及其制备方法和应用-CN201611200969.9在审
发明人：闫立;连祺周 -专利权人：中基恒润国际控股有限公司
申请日： 2016-12-22 - 公布日： 2017-08-11 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种启动子、重组间质干细胞及其制备方法和应用。一种启动子，其序列如SEQ ID NO2所示，该启动子可以在炎症因子TNFα存在的情况下正向激活表达TNFα抗体基因。一种重组间质干细胞的制备方法，利用上述启动子制备得到重组间质干细胞。本发明还提供利用所述重组间质干细胞的制备方法制备得到的重组间质干细胞，该重组间质干细胞在炎症环境下会被炎症因子TNFα激活，能稳定地结合到炎症位点，从而增强间充质干细胞的抗炎与免疫调节能力，因而能用于治疗骨关节炎且治疗效果好。本发明还提供一种重组间质干细胞的应用，将上述重组间质干细胞用于制备治疗骨关节炎的药物，所得到的药物治疗骨关节炎的效果好。
启动子重组间质干细胞及其制备方法应用

[发明专利]人血管内皮生长因子与表皮生长因子样结构域7的融合蛋白-CN201510279676.3在审
发明人： 连祺周 -专利权人： 连祺周
申请日： 2015-05-27 - 公布日： 2015-12-23 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种人工合成的融合蛋白，特别是涉及一种人血管内皮生长因子(VEGF)与表皮生长因子样结构域7(EGFL7)的融合蛋白。人血管内皮生长因子(VEGF)与表皮生长因子样结构域7(EGFL7)融合蛋白，所述融合蛋白包括：来自VEGF蛋白的氨基酸序列；来自EGFL7蛋白的氨基酸序列；连接肽；以及在末端添加的血清蛋白结合域的片段。本发明所述的融合蛋白对于内皮细胞的血管新生促进作用有显著的提高，相较于VEGF或EGFL7更具有在血管内皮血管新生方面的临床应用优势，可作为新型的血管生长因子而被应用于促血管新生领域。
血管内皮生长因子表皮结构融合蛋白

[发明专利]NRG1-ERBB4复合体在制备治疗心肌缺血的药物中的应用-CN201510155563.2在审
发明人： 连祺周;梁小婷 -专利权人： 连祺周
申请日： 2015-04-02 - 公布日： 2015-09-23 - 主分类号： A61K35/28 文献下载
摘要：本发明提供神经调节蛋白1(NRG1)与其酪氨酸蛋白激酶受体ERBB4的复合体(NRG1-ERBB4复合体)在制备治疗心肌缺血的药物中的应用。本发明提供了以NRG1-ERBB4复合体为靶标的治疗心肌缺血的药物。优选地，所述的药物是ERBB4基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSC)。通过慢病毒在MSC中过表达ERBB4，从而反馈性上调其配体NRG1的表达，形成NRG1-ERBB4-NRG1的自反馈通路的药物，不仅提高了MSC对缺氧环境的耐受能力，且通过NRG1-ERBB4-NRG1的自反馈通路保持高水平NRG1的浓度，改善并增强MSC对于心肌细胞的保护作用，提高了心肌缺血药物的疗效。
nrg1 erbb4 复合体制备治疗心肌缺血药物中的应用

[发明专利]人诱导性多能干细胞向角膜上皮样细胞定向分化的方法-CN201110448358.7无效
发明人： 连祺周 -专利权人： 连祺周
申请日： 2011-12-28 - 公布日： 2013-07-03 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供一种人诱导性多能干细胞向角膜上皮样细胞定向分化的方法，其包括步骤：A、基于患者的眼表组织，分离人结膜基质成纤维细胞和人结膜上皮细胞；B、在所述成纤维细胞和人结膜上皮细胞导入基因Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4，诱导产生iPSCs；C、在所述iPSCs中加入IV型胶原、采用KSFM细胞培养基和SHEM细胞培养基轮流诱导的方法，对所述iPSCs向角膜上皮样细胞定向分化。本发明提供的分化方法快速、简便、高效，可大量获得角膜上皮干细胞。
诱导性多能干细胞角膜上皮细胞定向分化方法

[发明专利]一种从人或动物多能干细胞提取间质性干细胞的方法-CN201110222962.8无效
发明人： 连祺周 -专利权人： 连祺周
申请日： 2011-08-04 - 公布日： 2012-01-18 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明提供一种从人或动物多能干细胞提取间质性干细胞的方法及药物，该方法包括步骤：A.基于人或动物多能干细胞取样，利用酶类消化液对样品进行消化，其中所述酶类消化液包括中性蛋白酶和Ⅳ型胶原酶；B.在分离的单细胞中加入间质性干细胞条件培养液，进行细胞接种并培养；C.对培养后的细胞进行贴壁纯化处理，并通过磁珠分选得到间质性干细胞。以解决现有技术中存在的间质性干细胞产出率较低、产量小、纯度低、衰老快和细胞批间质量不稳定的问题。
一种动物多能干细胞提取间质方法

[发明专利]从人或动物胚胎提取间质性干细胞及提取其分泌物的方法-CN200980000501.7无效
发明人： 连祺周;夏建川 -专利权人：深圳市嘉天源生物科技有限公司
申请日： 2009-09-18 - 公布日： 2010-08-11 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种从人或动物胚胎提取间质性干细胞的方法，包括：A.基于人或动物胚胎取样，对样品进行离心处理；B.利用酶类消化液对样品进行消化，并制成单细胞悬液，其中所述酶类消化液包括胰酶-EDTA和IV型胶原酶；C.在分离的单细胞中加入间质性干细胞A型培养液，进行细胞接种并培养；D.对细胞进行贴壁纯化处理，并通过磁珠分选得到间质性干细胞。本发明还涉及从间质性干细胞提取分泌物的方法，该分泌物在美容、保健方面的应用，以及采用该分泌物制成的表皮细胞修复液。在本发明从人或动物胚胎提取间质性干细胞的过程中，采用胰酶-EDTA和IV型胶原酶混合液作为酶类消化液，能够获得最多的单细胞，同时将细胞受损程度降至最低。
动物胚胎提取间质干细胞分泌物方法

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