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[发明专利]用于检测FGF19和FGF21类似物对FGF受体选择特异性的细胞模型建立方法-CN202211639908.8在审
发明人：严中华;刘畅;周瑜 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2022-12-20 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于检测FGF19和FGF21类似物对FGF受体选择特异性的细胞模型的建立方法，本发明方法通过病毒感染构建稳定表达β‑Klotho和FGFR的细胞系，筛选并分选出表达阳性的细胞，建立了一种能够快速高效检测FGF19/FGF21类似物药物与不同亚型FGFR结合特异性的方法。解决了现有的FGFR特异性鉴定方法存在细胞转染效率、活力低，以及实验重复性差的问题，可以有效解决转染效率低导致的药物响应差的问题，同时建立的稳转细胞系的细胞活力高，蛋白表达稳定，可以解决瞬转方法导致细胞大量死亡以及重复性较差的问题。
用于检测 fgf19 fgf21 类似物 fgf 受体选择特异性细胞模型建立方法

[发明专利]一种胆固醇以及脂肪酸代谢抑制药物的高通量评价方法-CN201811639256.1有效
发明人：朱建梁;刘长伟;严中华 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2018-12-29 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： G01N33/50 文献下载
摘要：本发明涉及一种胆固醇以及脂肪酸代谢抑制药物的高通量评价方法，包括以下步骤：(1)细胞培养及标记；(2)碱性环境下石油醚萃取胆固醇，利用Microbeta液体闪烁计数仪进行计数，获取待评价的抑制药物对胆固醇代谢的抑制作用；(3)酸性环境下石油醚萃取脂肪酸，利用Microbeta液体闪烁计数仪进行计数，获取待评价的抑制药物对脂肪酸代谢的抑制作用。与现有技术相比，本发明建立起一套简便，快捷，高效，高通量的胆固醇与脂肪酸提取工艺，降低了仪器设备的成本，便于操作，同时具有较高的产物提取效率，大大提高了该方法的市场竞争力。
一种胆固醇以及脂肪酸代谢抑制药物通量评价方法

[发明专利]一种人源柠檬酸转运蛋白抑制剂化合物的筛选方法-CN202010063051.4在审
发明人：彭志刚;徐晶晶;陶敏;王晓辉;刘丽;蓝伟铭;周煜;冯晓雨;金天添;荆为乾;涂成军;潘歆蓓;王洋洋;王震 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2020-01-19 - 公布日： 2020-06-05 - 主分类号： G01N33/15 文献下载
摘要：本发明涉及一种人源柠檬酸转运蛋白抑制剂化合物的筛选方法。利用能够稳定表达人源柠檬酸转运蛋白的细胞系，通过碳‑14同位素标记的柠檬酸同位素摄取检测方法，或通过基于高通量串联质谱的检测方法，实现对人源柠檬酸转运蛋白抑制剂化合物的筛选。与现有技术相比，本发明方法可用来对化合物库进行高通量筛选，从而得到人源柠檬酸转运蛋白的阳性抑制剂化合物，为下一步的化合物结构改造及药物发现奠定了基础。本发明可以对大规模的化合物库进行高通量筛选并获得能够抑制柠檬酸转运蛋白作用、具有成为糖尿病等疾病治疗药物的潜力的化合物。
一种柠檬酸转运蛋白抑制剂化合物筛选方法

[发明专利]检测对肝脏线粒体功能存在影响的候选药物的方法-CN201911144201.8在审
发明人：孔燕 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2019-11-20 - 公布日： 2020-04-17 - 主分类号： G01N33/543 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测对肝脏线粒体功能存在影响的候选药物的方法，应用氧气猝灭型荧光探针，针对加入有候选药物的肝脏线粒体有氧呼吸功能中的基础呼吸功能以及ADP驱动型的氧化磷酸化水平上的耗氧速率进行检测，进而判断候选药物是否为对肝脏线粒体功能存在影响的药物。与现有技术相比，本方法具有快速(3.5个小时以内得到结果)，结果稳定，准确度高等优势，并可用于大规模化合物库筛选评价小分子药物对线粒体呼吸功能的影响，这将促进在早期药物研发阶段评价候选药物，从而降低药物开发总的研发时间和投资成本，具有潜在的应用推广前景。
检测肝脏线粒体功能存在影响候选药物方法

[发明专利]吲哚胺2，3-二氧化酶抑制剂的筛选方法-CN201911326435.4在审
发明人：陈宁 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2019-12-20 - 公布日： 2020-04-14 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种吲哚胺2，3‑二氧化酶抑制剂的筛选方法，包括以下步骤：标准品配制：配制色氨酸标准溶液和犬尿氨酸标准溶液；分别取标准品加入到细胞培养基中得到做标准曲线的标准溶液；RapidFire液质联用检测标准溶液样品的峰面积，采用标准溶液的浓度和相应的峰面积信号做标准曲线；将色氨酸与细胞加入细胞培养基中，并加入待筛选药物，孵育一段时间，加入乙腈或甲醇处理待测样品，待测样品经高速离心机离心，取上清液进行上机检测，根据所得标准曲线，计算样品中色氨酸和犬尿氨酸的浓度，进而判断待筛选药物是否为吲哚胺2，3‑二氧化酶抑制剂。与现有技术相比，本发明方法可提供在细胞水平内筛选IDO抑制剂药物的可靠和有效的方法。
吲哚氧化酶抑制剂筛选方法

[发明专利]一种半乳糖神经酰胺转移酶抑制剂药物的快速筛选方法-CN201811635607.1在审
发明人：白艳秋;吴治昊;王朝弘;刘豫屏 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2018-12-29 - 公布日： 2019-05-03 - 主分类号： G01N27/62 文献下载
摘要：本发明涉及一种半乳糖神经酰胺转移酶抑制剂药物的快速筛选方法，包括以下步骤：(1)人工合成人类的半乳糖神经酰胺转移酶的核醣核酸，然后将半乳糖神经酰胺转移酶的核醣核酸转建构在哺乳细胞表达载体pDNA3.1(+)上，得到人类半乳糖神经酰胺转移酶过表达载体；(2)将人类半乳糖神经酰胺转移酶过表达载体在非人源细胞上进行细胞转染，然后进行裂解细胞并提取细胞裂解蛋白；(3)将提取获得的细胞裂解蛋白以及反应底物置于反应缓冲液中，加入待筛选的半乳糖神经酰胺转移酶抑制剂药物，进行反应后，检测底物及反应产物的含量，然后确定待筛选的半乳糖神经酰胺转移酶抑制剂药物的抑制效果。与现有技术相比，本发明建立了快速且稳定的筛选方式。
神经酰胺半乳糖转移酶抑制剂转移酶表达载体核醣核酸快速筛选细胞裂解筛选蛋白反应缓冲液哺乳细胞反应底物裂解细胞细胞转染源细胞底物建构检测

[发明专利]人乳腺癌耐药蛋白介导的药物代谢水平评价方法-CN201310467763.2有效
发明人：夏远峰;刘港帜;戴有金;陈景才 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2013-10-09 - 公布日： 2014-01-22 - 主分类号： G01N23/00 文献下载
摘要：一种人乳腺癌耐药蛋白介导的药物代谢水平评价方法，主要包括稳定表达人乳腺癌耐药蛋白的狗肾近端小管上皮细胞系的建立以及人乳腺癌耐药蛋白药物代谢水平评价平台的建立两大步骤。本发明建立了人乳腺癌耐药蛋白(BCRP)稳定表达细胞株，以细胞水平的药物转运为主要检测方法，建立了一套针对人乳腺癌耐药蛋白(BCRP)介导的药物代谢水平进行评价的方法。首次实现了在狗肾近端小管上皮细胞(MDCK II)中稳定高效表达人乳腺癌耐药蛋白(BCRP)，首次建立并优化了人乳腺癌耐药蛋白(BCRP)介导的药物代谢水平评价高通量筛选平台。
乳腺癌耐药蛋白药物代谢水平评价方法

[发明专利]丙型肝炎病毒嵌合复制子及其构建方法-CN201310093557.X无效
发明人：陈景才;江海清;李忠;张晓霁;张宏达;谈璐瑶 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2013-03-21 - 公布日： 2013-07-24 - 主分类号： C12N15/51 文献下载
摘要：本发明提供了一种丙型肝炎病毒嵌合复制子及其构建方法，丙型肝炎病毒嵌合复制子是丙型肝炎病毒基因型2a和基因型3a与非结构蛋白5b的嵌合复制子，命名为HCV GT2a/GT3a-NS5b。其构建方法是以pRep-JFH-1为基础，并替换其NS5B的基因为GT3a NS5B的基因从而得到NS5B嵌合复制子。本发明丙型肝炎病毒嵌合复制子与现有以GT1b为骨架的嵌合复制子相比，本发明的嵌合复制子瞬时转染的效率高，不需通过构建稳定细胞株来提高复制子的复制效率，为将来构建更多的HCV临床样品嵌合复制子提供了快速的技术路线。
肝炎病毒嵌合复制子及其构建方法

[发明专利]分离豚鼠心室肌细胞记录L型钙通道电流的方法-CN201110362093.9无效
发明人：谈学海;林佩元;陈景才;范柳 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2011-11-15 - 公布日： 2013-05-15 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：L型钙通道主要分布于心脏，血管，内分泌以及神经系统，在心脏和平滑肌兴奋-收缩偶联，窦房结和房室结的动作电位传导中发挥着极其重要的作用。通过膜片钳记录方法观察化合物对L型钙通道的影响以评价该化合物的心脏安全系数以及治疗高血压的效果已成为重要的研究方式。本发明的分离豚鼠心室肌细胞记录L型钙通道电流的方法，通过改良灌流液，保存方式以提高分离豚鼠心室肌细胞的收获率和成活率，延长细胞的稳定时间从而提高了实验的成功率和稳定性。
分离豚鼠心室细胞记录通道电流方法

[发明专利]荧光标记多肽及其制备方法和应用-CN201210378701.X有效
发明人：王柏秋;孙凌冰;王睿;余佳凌 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2012-10-08 - 公布日： 2013-02-13 - 主分类号： C07K7/06 文献下载
摘要：一种荧光标记多肽，其氨基酸序列为TSRHK(Ac)-CONH2，以Fmoc-Lys(Ac)-Rink酰胺4-甲基二苯甲胺树脂等为原料制备而成。本发明制备的荧光标记多肽可以作为组蛋白去乙酰化酶的底物，反应后通过迁移率变动实验来直接检测底物的转化率，从而计算出检测化合物对酶活性的抑制程度，来筛选和鉴定组蛋白去乙酰化酶抑制剂。使用本发明的荧光标记多肽作为底物来筛选去乙酰化酶抑制剂，由于不再需要第二步酶偶联反应，与现有技术相比，具有快速(1个半小时以内得到结果)、经济(成本为试剂盒方法的一半甚至四分之一)、直接准确(假阳/阴性率低)的特点，并可用于大规模筛选化合物库来鉴定组蛋白去乙酰化酶抑制剂。
荧光标记多肽及其制备方法应用

[发明专利]GHSR1a激动剂药物的筛选方法-CN201210201591.X有效
发明人：张宝弘;高炜炜 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2012-06-18 - 公布日： 2012-12-12 - 主分类号： G01N33/00 文献下载
摘要：一种GHSR1a激动剂药物的筛选方法，主要包括以下步骤：1)给药前多次预刺激以稳定基础生长激素水平；2)给药后5，15，30，60，180及300分钟取血30μL；3)分离10μL血浆，使用Rat/Mouse GH ELISA试剂盒测定血浆中生长激素含量；4)挑选出使血浆生长激素浓度-时间曲线下面积升高率大于50％的药物。本发明GHSR1a激动剂药物的筛选方法采取给药前多次假采血的手段，建立了稳定敏感可重复的GHSR1a激动剂药物的筛选模型，可提供在动物体内筛选GHSR1a激动剂药物的可靠和有效的方法。
ghsr1a 激动剂药物筛选方法

[发明专利]DSS诱导肠炎的小鼠模型的建立方法-CN201210326255.8有效
发明人：王立新 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2012-09-05 - 公布日： 2012-12-12 - 主分类号： A61K31/727 文献下载
摘要：本发明提供了一种DSS诱导肠炎的小鼠模型的建立方法，它包括以下步骤：A、选择19-21克体重的雌性C57BL/6小鼠作为建立小鼠模型的对象；B、将葡聚糖硫酸钠溶于消毒过的饮用水，配制成重量百分浓度为2％的葡聚糖硫酸钠溶液，置于水瓶避光保护，现配现用；C、将选择的C57BL/6小鼠饲养在SPF级动物房，让它先饮用步骤B所制备的葡聚糖硫酸钠溶液六天，再饮用正常饮用水四天，则所选择的C57BL/6小鼠成为DSS诱导肠炎的小鼠模型。本发明DSS诱导肠炎的小鼠模型的建立方法使动物的死亡率降低为零，但病理表现相同，从而使模型变得稳定而可靠，并具有可重复性。
dss 诱导肠炎小鼠模型建立方法

[发明专利]分离培养新生鼠皮层神经细胞记录T型钙通道电流的方法-CN201210299399.9有效
发明人：谈学海;林佩元;陈景才;范柳 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2012-08-21 - 公布日： 2012-12-05 - 主分类号： G01N27/26 文献下载
摘要：本发明提供了一种分离培养新生鼠皮层神经细胞记录T型钙通道电流的方法，稳定培养的新生鼠皮层神经细胞具有正常的T型钙离子通道的功能，适用于膜片钳技术对其生理特性及药理特性的研究，本实验操作易于掌握，是一种简单有效的稳定培养分离新生鼠皮层神经细胞的方法。本发明中通过稳定培养分离的新生鼠皮层神经细胞，从而显著提高了实验的成功率，稳定性和可重复性。
分离培养新生皮层神经细胞记录通道电流方法

[发明专利]分离豚鼠心室肌细胞记录Nav1.5钠通道电流的方法-CN201210299397.X无效
发明人：谈学海;林佩元;陈景才;范柳 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2012-08-21 - 公布日： 2012-12-05 - 主分类号： G01N27/26 文献下载
摘要：本发明提供了一种分离豚鼠心室肌细胞记录Nav1.5钠通道电流的方法，包括单个心室肌细胞的分离和Nav1.5钠通道电流的记录两步骤。本发明的方法通过改良灌流液和保存方式以提高分离豚鼠心室肌细胞的收获率和成活率，延长细胞的稳定时间从而提高了实验的成功率和稳定性。本发明分离所得豚鼠心室肌细胞具有正常的离子通道功能，适用于膜片钳技术对心肌电生理特性的研究，本实验操作易于掌握，是一种简单有效的急性分离心室肌细胞的方法。
分离豚鼠心室细胞记录 nav1 通道电流方法

[发明专利]食蟹猴抗利尿激素受体V1A拮抗剂筛选平台的建立-CN201210260320.1无效
发明人：夏远峰;张玉珂;秦旭钊;陈景才 -专利权人： 辉源生物科技（上海）有限公司
申请日： 2012-07-25 - 公布日： 2012-11-07 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：一种食蟹猴抗利尿激素受体V1A拮抗剂筛选平台的建立，方法是，首先培养中国仓鼠卵巢细胞的阳性克隆细胞，弃去培养基后加入钙离子检测染料继续培养，弃去钙离子检测染料后加入待测药物孵育，然后再加入激动剂d[Cha4]-AVP，用酶标仪检测，能够抑制激动剂引起的钙离子释放的药物为食蟹猴抗利尿激素受体V1A拮抗剂。本发明以细胞水平的钙流水平为主要检测方法，建立了一套对筛选食蟹猴抗利尿激素受体V1A拮抗剂药物的方法。首次实现了在中国仓鼠卵巢细胞中稳定表达食蟹猴抗利尿激素受体，首次建立并优化了对食蟹猴抗利尿激素受体药物高通量筛选的平台。
食蟹猴抗利尿激素受体 v1a 拮抗剂筛选平台建立

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