本发明公开了一种用于检测黄曲霉毒素B1的磁分离检测试剂盒和方法,属于生物技术领域。所述磁分离检测试剂盒包括碱性磷酸酶纳米抗体融合蛋白和抗原修饰的磁珠,所述碱性磷酸酶纳米抗体融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述抗原修饰的磁珠为采用完整抗原ABF1修饰在环氧树脂磁珠表面。本发明基于碱性磷酸酶纳米抗体融合蛋白和抗原修饰的环氧树脂磁珠,开发了一种操作更简单、更快速的黄曲霉毒素B1检测的磁分离竞争性化学发光免疫分析法。该方法可以实现高特异性和高灵敏性检测黄曲霉毒素B1,同时为食品污染物的高灵敏度分析提供快速、简便、可靠的策略,具有重要意义。
本发明公开了一种检测黄曲霉毒素B1的纳米抗体及其应用,属于食品检测领域。所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过构建双峰驼免疫抗体文库,用噬菌体展示技术,将检测抗原固相包被于酶标板上,投入双峰驼免疫抗体文库进行亲和淘筛,获得一种抗黄曲霉毒素B1特异性结合的纳米抗体。并将该纳米抗体应用于黄曲霉毒素B1的免疫学检测分析,通过此免疫检验分析建立了一种快速、灵敏并且稳定的黄曲霉毒素B1的检测方法。本发明为食品领域黄曲霉毒素B1的特异性快速检测提供了新的方法。
本发明公开了一种α-半乳糖苷酶及其表达、纯化方法。该α-半乳糖苷酶由序列表中的SEQ ID NO:1表示,由脆弱类杆菌(Bacteriodes fragilis)ATCC25285的重组基因组DNA序列SEQ ID NO:3编码得到,为具有将人红细胞血型由B型转变为O型、由AB型转变为A型作用的蛋白质。本发明的α-半乳糖苷酶用途广泛,表达及纯化方法简便、成本低廉,具有重要的临床及科学研究意义,市场前景广阔。