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[发明专利]一种寡聚DNA抑制非特异性扩增的方法-CN202310926223.X在审
发明人：梁兴国;宋子婷;安然;胡坤灵;杜书涵 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2023-07-25 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本申请公开了一种寡聚DNA抑制背景DNA存在条件下非特异性扩增产物的方法，属于核酸扩增领域。针对现有技术中存在的“非特异性扩增严重影响核酸扩增的灵敏度和特异性，且现有抑制方法存在难以高效抑制、序列设计繁琐等”的问题，本申请的技术方案中，在核酸扩增时，加入带有5’‑凸出端和短茎环结构的寡聚DNA，适用于恒温扩增、PCR反应体系扩增(变温扩增)中。本申请的技术方案不需根据模板序列进行特异性的设计，仅需10nM‑500nM寡聚DNA即可实现对非特异性扩增的高效抑制，不需要进行修饰，大大降低了成本，既可以抑制引物与非目标片段结合产生的非特异性扩增，还可以抑制引物二聚体，尤其可抑制高背景DNA条件下产生的非特异性扩增。
一种 dna 抑制非特异性扩增方法

[发明专利]一种制备腺苷酸化核酸产物的方法-CN202211295867.5在审
发明人：梁兴国;胡坤灵;陈辉;罗简;安然 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2022-10-21 - 公布日： 2022-12-20 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明属于核酸技术领域，为解决目前制备腺苷酸化核酸产物中的，对目标底物不引入化学基团修饰无法完全避免连接副产物、引入化学基团会为后续的应用带来困难的问题，本发明提供一种制备腺苷酸化核酸产物的方法。步骤一，设计辅助DNA链；步骤二，对待腺苷酸化核酸链进行磷酸化反应；步骤三，T4DNA连接酶催化的腺苷酸化反应，在连接酶的作用下辅助DNA链3′端与待腺苷酸化的核酸链形成一个缺口状态，并且含有多个错配，得腺苷酸化后无法继续连接，而动态变化回初始的颈环结构；连接酶对底物核酸腺苷酸化之后脱落并迅速形成酶‑AMP复合物，从而避免了进一步的连接，实现了腺苷酸化核酸产物的积累。
一种制备腺苷酸化核酸产物方法

[发明专利]一种短链DNA的纳米孔测序方法-CN202210517930.9在审
发明人：梁兴国;胡坤灵;宋子婷;安然 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2022-05-12 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明涉及DNA测序技术领域。针对短链DNA难以进行纳米孔测序的问题，本发明提供一种短链DNA的纳米孔测序方法：待测的短链DNA，待测区T的两侧分别为B区和C区，B区和C区为互不包含的DNA片段；以短链DNA为模板设计引物对；以短链DNA为模板，以设计的引物对进行PCR扩增，得到重复含待测区T的DNA长双链；将扩增的DNA长双链进行纳米孔测序、分析结果，确定具体序列。本发明仅需选取少量的测序结果进行比对即可实现对待测序列的准确测定，只需分析一个足够长的Read即可完成对短链DNA的测序，在一次纳米孔测序操作中，可用于同时测多个序列组成的基因组。
一种 dna 纳米孔测序方法

[发明专利]一种检测多基因甲基化的试剂盒及其应用-CN202010999774.5在审
发明人：李彬;郑春婷;叶明芝;徐磊;叶李莉;曾柳红;胡坤灵;章申燕;赵立哲 -专利权人：北京华大吉比爱生物技术有限公司
申请日： 2020-09-22 - 公布日： 2021-01-08 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测多基因甲基化的试剂盒及其应用。所述检测多基因甲基化的试剂盒包括：针对SEPT9基因启动子区域甲基化位点的引物对和探针；针对ALX4基因启动子区域甲基化位点的引物对和探针；针对SDC2基因启动子区域甲基化位点的引物对和探针。本发明采用多基因甲基化联合检测方法，同时检测血浆游离DNA中三个基因的甲基化水平。经筛选优化，本发明首创的多重探针法降落PCR对结直肠癌进行早期筛查表现出良好的灵敏度和特异性，结直肠进展期腺瘤检出率显著提高，且检测结果稳定，重复性好。
一种检测多基因甲基化试剂盒及其应用

[发明专利]一种钢琴共鸣盘及其制作方法-CN201210270296.X有效
发明人： 胡坤灵 -专利权人： 胡坤灵
申请日： 2012-07-31 - 公布日： 2012-10-24 - 主分类号： G10C3/00 文献下载
摘要：本发明属于钢琴技术领域，公开了一种钢琴共鸣盘及其制作方法。制作方法如下：安装把手（22），背架（21）成框，安装上背板（12），安装下背板（13），安装铁板支撑螺栓（16），安装弦轴板（9），安装音板框（4），制作音板（23），制作低音弦马组合，制作共鸣板，安装共鸣盘，安装铁板（11），配弦马高度，安装马钉（3），安装弦轴衬圈（8）、弦轴（7）、挂弦钉（1）和弦枕钉（14），挂琴弦（5），安装压弦条（15），制备得到钢琴共鸣盘。本发明取消了传统钢琴生产中使用的音板垫圈，节约了生产材料和生产成本。本发明取消音板垫圈、音板垫圈螺丝的使用；减少了生产工序，缩短了钢琴共鸣盘的生产周期，提高了生产效率，节约了生产材料。
一种钢琴共鸣及其制作方法

[发明专利]一种钢琴共鸣盘及其制作方法-CN201210270377.X有效
发明人： 胡坤灵 -专利权人： 胡坤灵
申请日： 2012-07-31 - 公布日： 2012-10-24 - 主分类号： G10C3/00 文献下载
摘要：本发明属于钢琴技术领域，公开了一种钢琴共鸣盘及其制作方法。本发明钢琴共鸣盘的制作方法包括以下步骤：安装把手（22），背架（21）成框，安装上背板（12），安装下背板（13），安装弦轴板（9），安装音板框（4），制作音板（23），制作低音弦马组合，制作共鸣板，安装共鸣盘，安装铁板（11），配弦马高度，安装马钉（3），安装弦轴衬圈（8）、弦轴（7）、挂弦钉（1）和弦枕钉（14），挂琴弦（5），安装压弦条（15），制备得到钢琴共鸣盘。本发明取消了铁板支撑螺栓的使用，节约了生产材料和生产成本；钢琴用音板上面减少了2个铁板支撑螺栓安装工艺孔，保持了音板的整体性，保证了钢琴音板的震动发音，提高了钢琴共鸣盘的质量。
一种钢琴共鸣及其制作方法

[发明专利]一种钢琴共鸣盘及其制作方法-CN201210269616.X无效
发明人： 胡坤灵 -专利权人： 胡坤灵
申请日： 2012-07-31 - 公布日： 2012-10-24 - 主分类号： G10C3/00 文献下载
摘要：本发明属于钢琴技术领域，公开了一种钢琴共鸣盘及其制作方法，制作方法如下：安装把手（22），背架（21）成框，安装上背板（12），安装下背板（13），安装铁板支撑螺栓（16），安装弦轴板（9），安装音板框（4），制作音板（23），制作中高音弦马（2），制作低音弦马组合，安装马钉（3），制作配马附件（26），制作共鸣板，安装共鸣盘，安装配马附件（26），安装铁板（11），进行配马工序，安装弦轴衬圈（8）、弦轴（7）、挂弦钉（1）和弦枕钉（14），挂琴弦（5），安装压弦条（15），制备得到钢琴共鸣盘。本发明操作简单、方便，安全，易于施工，可以缩短钢琴共鸣盘的生产周期，提高了生产效率。
一种钢琴共鸣及其制作方法

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