本发明涉及一种非编码RNA lnc‑ALVE‑env1表达检测引物及试剂盒和应用,属于分子生物学技术领域。所述引物包括链特异性RT引物和荧光定量PCR检测引物;其中链特异性RT引物的序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示;荧光定量PCR检测引物的序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。本研究发明还提供了lnc‑ALVE‑env1表达检测试剂盒,为lnc‑ALVE‑env1表达规律分析提供了方法和基础,在生产实践可用于检测鸡群的禽白血病天然免疫状态。本发明的非编码RNA lnc‑ALVE‑env1表达检测引物及试剂盒特异性好、方便便宜,可以快速检测出lnc‑ALVE‑env1的表达丰度;适用性广,可以有效筛选禽白血病病毒抗性品系鸡。