本发明涉及检验检疫领域，旨在提供一种能检测多种猪呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒。该试剂盒包括：预扩增引物混合液，所含预扩增引物的序列如SEQ ID NO：1～14所示；探针混合液，包括左侧探针和右侧探针，序列如SEQ ID NO：15～28所示；MLPA缓冲液；连接缓冲液A；连接缓冲液B；连接酶Ligase‑65；PCR反应混合液，其包括如序列SEQ ID NO：29和30所示的通用引物；SALSA聚合酶；阴性对照；阳性对照。本发明具备高通量、特异性好、灵敏度高的特点；操作更简便，检测时间更短。
本发明涉及检验检疫领域，旨在提供一种能检测多种禽呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒。该试剂盒中包括：预扩增引物混合液，含有序列如SEQ ID NO：1～14所示预扩增引物；探针混合液，含有序列如SEQ ID NO：15～28所示的左侧探针和右侧探针；MLPA缓冲液；连接缓冲液A；连接缓冲液B；连接酶Ligase‑65；PCR反应混合液，含有序列SEQ ID NO：29和30所示的通用引物；SALSA聚合酶；阴性对照；阳性对照。本发明所述试剂盒具有高通量特点，能同时检测7种病原，利用全自动核酸分析仪，每次可同时检测96个样品，为病原体的鉴别诊断和应急诊断提供高通量检测技术。另外，还具备特异性好和灵敏度高的优点，通过增加RT‑PCR步骤对目标基因进行富集，最低可检出1拷贝的目标基因。
本发明涉及检验检疫领域，旨在提供一种检测猪病毒性腹泻症候群病原核酸的MLPA检测试剂盒。该试剂盒中包括：(1)反转录和预扩增混合液：反转录和预扩增引物的序列如SEQ ID NO：1～12所示；其中，反转录引物为12碱基随机引物；(2)多重连接探针混合液：其中，探针的序列如SEQ ID NO：13～24所示，通用引物的序列如SEQ ID NO：25～26所示；(3)MLPA缓冲液；(4)连接缓冲液A和B；(5)连接酶Ligase‑65；(6)PCR反应混合液，其包括序列表SEQ ID NO:25～26所示的通用引物；(7)SALSA聚合酶；(8)阴性对照；(9)阳性对照，包含6种猪病毒性腹泻症候群的病原的阳性对照质粒。与现有方法比较，本发明具有高通量、节省费用、特异性好、灵敏度高的优点。
本发明涉及检验检疫领域，旨在提供一种检测猪病毒性繁殖障碍症候群病原核酸的MLPA检测试剂盒。该试剂盒中包括：反转录和预扩增混合液：反转录和预扩增引物的序列如SEQ ID NO：1～12所示；其中，反转录引物为12碱基随机引物；多重连接探针混合液：其中探针的序列如SEQ ID NO：13～24所示，通用引物的序列如SEQ ID NO：25～26所示；MLPA缓冲液；连接缓冲液A和B；连接酶Ligase‑65；PCR反应混合液，其包括序列SEQ ID NO：25～26所示的通用引物；SALSA聚合酶；阴性对照；阳性对照，包含六种猪病毒性繁殖障碍症候群的病毒CSFV、PRV、JEV、PRRSV、PCV2、PPV的阳性对照质粒。与现有方法比较，本发明具有高通量、节省费用、特异性好、灵敏度高的优点。
