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[发明专利]一种压砂西瓜连作抛荒地的修复方法-CN201810849133.4有效
发明人：黄启为;沈其荣;路宇;李静;梅慧玲 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2018-07-28 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： A01B79/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种一种压砂西瓜连作抛荒地的修复方法。包括压砂瓜田弃耕后，连续两年掀砂暴晒，在掀砂暴晒连续两年后，重新压砂之前，施入有机类肥料，每种肥料用量为1吨/亩，将土壤旋耕30cm的深度，整平，在地表覆盖20厘米的新的砾石层，重新压砂。于第三年的4月上旬，掀去表面的砾石层，挖定植穴，在定植穴内拌土施用木霉生物有机肥后再在3～5cm深处点播西瓜种子后覆土或移栽西瓜苗后覆土轻轻压实，覆砂、浇水、覆膜，常规田间管理。本发明强化土壤中有益微生物数量，提高其活性，显著促进西瓜植株生长，提高西瓜植株的生物量，增强植株长势，还可以显著降低土壤中病原菌的数量。
一种西瓜连作抛荒修复方法

[发明专利]一株用于防控连作百合土传枯萎病的枯草芽孢杆菌及其应用-CN201911227973.8有效
发明人：黄启为;沈其荣;任胜林;梅慧玲;李静 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2019-12-04 - 公布日： 2020-09-08 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株用于防控连作百合土传枯萎病的枯草芽孢杆菌及其应用。本发明分离得到了一株拮抗菌HQWBH1，接种到有机肥和酸解氨基酸的混合物中进行固体发酵制成微生物肥料产品，产品中含有1×108cfu/g以上的拮抗菌、全氮含量为4～5％(90％以上为有机氮)，总氮磷钾养分为6～10％、有机质含量≥45％。盆栽试验结果表明，百合土传枯萎病的防控率达到75％以上，如果在开始种植百合的土壤中连年施用本肥料产品，可以有效控制百合土传枯萎病的发生。
用于连作百合枯萎病枯草芽孢杆菌及其应用

[发明专利]一种开放式生产木霉固体菌种的方法-CN202010003546.8有效
发明人：黄启为;沈其荣;阳芳;梅慧玲;李静 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2020-01-03 - 公布日： 2020-08-07 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种开放式生产木霉固体菌种的方法。该方法包括向粉状植物源材料中加入全价氨基酸稀释液，充分混匀，调节混合物pH值至1.0～1.8，静置10～12小时，待pH稳定后向其中接种贵州木霉NJAU4742发酵液，充分混匀后将其置于底部布满小孔的浅盘或透气性膜上，布料厚度2～4cm，再将已布料的浅盘或膜置于盘架内，保持发酵空间温度28～30℃，湿度75～90％RH，让其发酵3～5天，即可获得木霉固体菌种。在发酵物料和工厂化的生产空间均无需灭菌条件下开放式生产木霉固体菌种，产品菌种数量高，杂菌率不到10％，远远低于农用微生物菌剂标准中杂菌率，生产成本为传统木霉固体发酵技术的1/5。
一种开放式生产固体菌种方法

[发明专利]一种无痕迹木霉真菌基因过表达方法-CN201910045672.7有效
发明人：沈其荣;缪有志;黄启为;梅慧玲;夏燕维 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2018-02-08 - 公布日： 2020-05-26 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明涉及一种无痕迹木霉真菌基因过表达方法。首先，通过两次同源重组事件并结合潮霉素B抗性筛选策略和5‑FOA致死策略获得贵州木霉ura3基因无痕敲除突变体。基于该突变体，通过同源重组方式将包含ura3基因表达框的敲除片段插入目的基因位置，并利用ura3无痕突变体的营养缺陷特征筛选出发生第一次同源重组的突变体。第二次同源重组发生后，ura3基因和目的基因均被重组去除，此时利用5‑FOA的致死特性进行反向筛选，得到目的基因被完全删除的无痕突变体。该系统得到足够优化，同源重组比例在15％以上，单基因无痕操作周期缩短在15天以内，同时还能够实现目的基因的无痕过表达，过程中不引入任何外源片段。
一种痕迹真菌基因表达方法

[发明专利]一种草炭生物有机肥及其制备方法和应用-CN201910629837.5在审
发明人：黄启为;沈其荣;梁嘉丽;李静;梅慧玲 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2019-07-12 - 公布日： 2019-10-18 - 主分类号： C05F17/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种草炭生物有机肥及其制备方法和应用。草炭生物有机肥的制备方法包括：向草炭中加入水和碱性物质调剂草炭pH至6.5～7.5，加入碳源，加入氨基酸稀释液调节含水量至40％～50％，加入SQR9发酵浓缩液充分混匀后堆放成条垛进行好氧堆肥，发酵7～20天获得草炭生物有机肥。本发明以草炭为原料，加入解淀粉芽孢杆菌SQR9进行堆肥发酵制备生物有机肥，利用SQR9充分活化了草炭中的碳，活性腐殖酸含量由3.6％提升到13.5％，使其由生物无法利用的“死碳”转变为生物能够利用的“活碳”；制备的草炭生物有机肥能显著促进黄瓜根系生长，有利于黄瓜吸收养分含量，增加其植株养分含量，从而促进黄瓜的生长。
草炭生物有机肥制备方法和应用制备种草黄瓜解淀粉芽孢杆菌发酵浓缩液堆肥发酵好氧堆肥黄瓜根系碱性物质制备生物植株腐殖酸稀释液生长氨基酸有机肥成条混匀活化发酵调剂堆放吸收

[发明专利]一种含木霉的草炭生物有机肥及其制备方法和应用-CN201910629819.7在审
发明人：黄启为;沈其荣;杜彭涛;梅慧玲;李静 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2019-07-12 - 公布日： 2019-10-15 - 主分类号： C05G1/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种含木霉的草炭生物有机肥及其制备方法和应用。所述的制备方法包括：向草炭中加入适量水和碱性物质调剂草炭pH至4.5～6.5，待pH稳定后向其中加入碳源，加入氨基酸稀释液调节含水量至40％～50％，混匀，静置20～24小时，将加入贵州木霉NJAU4742发酵液，充分混匀后堆放成条垛进行好氧堆肥，发酵7～20天获得含木霉的草炭生物有机肥。本发明充分活化了草炭中的碳，活性腐殖酸含量由3.6％提升到14.7％，使其由生物无法利用的“死碳”转变为生物能够利用的“活碳”；制备的草炭生物有机肥能，显著促进番茄生长，提高和改善番茄果实品质。
草炭生物有机肥木霉制备方法和应用混匀制备番茄果实番茄生长好氧堆肥碱性物质发酵液腐殖酸适量水稀释液氨基酸成条后向活化发酵调剂堆放

[发明专利]一种同时含木霉和解淀粉芽孢杆菌的草炭生物有机肥及其制备方法和应用-CN201910661199.5在审
发明人：黄启为;沈其荣;梅慧玲;李静 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2019-07-22 - 公布日： 2019-10-15 - 主分类号： C05G1/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种同时含木霉和解淀粉芽孢杆菌的草炭生物有机肥及其制备方法和应用。本发明以草炭为原料，加入解淀粉芽孢杆菌SQR9或贵州木霉NJAU4742进行堆肥发酵制备生物有机肥，利用菌株SQR9或NJAU4742充分活化了草炭中的碳，活性腐殖酸含量由3.6％提升到13.5％以上，使其由生物无法利用的“死碳”转变为生物能够利用的“活碳”；制备的草炭生物有机肥能显著增加作物株高、茎粗，促进作物生长，可以显著提高和改善作物果实品质。
草炭生物有机肥木霉制备方法和应用淀粉芽孢杆菌解淀粉芽孢杆菌作物果实品质堆肥发酵制备生物作物生长腐殖酸有机肥活化菌株制备

[发明专利]一种无痕迹木霉真菌基因编辑方法-CN201810130104.2有效
发明人：沈其荣;缪有志;黄启为;梅慧玲;夏燕维 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2018-02-08 - 公布日： 2019-02-26 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明涉及一种无痕迹木霉真菌基因编辑方法。首先，通过两次同源重组事件并结合潮霉素B抗性筛选策略和5‑FOA致死策略获得贵州木霉ura3基因无痕敲除突变体。基于该突变体，通过同源重组方式将包含ura3基因表达框的敲除片段插入目的基因位置，并利用ura3无痕突变体的营养缺陷特征筛选出发生第一次同源重组的突变体。第二次同源重组发生后，ura3基因和目的基因均被重组去除，此时利用5‑FOA的致死特性进行反向筛选，得到目的基因被完全删除的无痕突变体。该系统得到足够优化，同源重组比例在15％以上，单基因无痕操作周期缩短在15天以内，同时还能够实现目的基因的无痕过表达，过程中不引入任何外源片段。
同源重组突变体无痕目的基因木霉真菌基因敲除致死操作周期策略获得抗性筛选片段插入特征筛选营养缺陷表达框潮霉素单基因外源去除删除筛选引入优化

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