本发明涉及一种转基因抗虫豇豆的培育方法,其包括如下步骤:获取豇豆无菌子叶节;构建含pUBI、Cry1C*基因的质粒,其中,所述pUBI的序列如SEQ ID NO:1所示,所述Cry1C*基因的序列如SEQ ID NO:2所示;利用携带含pUBI、Cry1C*基因的质粒的农杆菌浸染豇豆无菌子叶节,诱导形成愈伤组织,分化出不定芽,生根,长成豇豆植株,从中筛选含Cry1C*基因的转基因豇豆植株;采用转基因豇豆植株自交,获得纯合的转基因豇豆品种。该培育方法能够培育出抗螟鳞翅目害虫的转基因抗虫豇豆品种。
本发明涉及一种番茄抗青枯病的分子标记。其中所述分子标记为SNP分子标记或dCAPS分子标记,所述SNP分子标记如SEQ ID NO.1所示,所述dCAPS分子标记为基于Bwr6所在QTL区间内的一个只存在于携带Bwr6品种中的特异性SNP分子标记(即SEQ ID NO.1)开发获得的dCAPS连锁分子标记。该dCAPS分子标记具有较好的准确性和特异性,能有效鉴定抗青枯病番茄品种,并在88份商品种进行测试未发现假阳性结果的出现;与最新发表的Bwr6连锁分子标记RsR6‑5相比,本发明开发出的分子标记也显示出了更高的准确性。
本发明提供一种番茄叶型调控基因及应用,将所述SlTCP29基因通过基因编辑产生突变体,所述SlTCP29基因的序列如SEQ ID NO.1所示,所述突变体包括在SlTCP29基因片段中产生碱基对缺失或增加或碱基对序列改变。与现有技术相比,利用基因编辑的方法获得复叶突变体植株较传统的获得突变体的方法更经济、有效,丰富了种质资源的类型;与已有研究相比,本发明的突变体植株在叶型方面更加复杂,此基因在调控叶型方面有重要作用,为番茄叶型调控又提供了一个新的基因。
本发明提供一种检测番茄青枯病抗性位点Bwr12的分子标记及应用,检测番茄青枯病的分子标记的引物对包括一个正向引物及两个反向引物,其中,所述正向引物的序列如SEQ ID NO.2所示;两个所述反向引物分别为第一反向引物及第二反向引物,所述第一反向引物的序列如SEQ ID NO.3所示,所述第二反向引物的序列如SEQ ID NO.4所示。与现有的分子标记相比,本发明分子标记准确率高且检测成本低。
本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及超量表达转录因子SlBBX20提高番茄花青素的含量。本发明克隆到一个控制番茄叶片花青素合成的关键基因SlBBX20,对其进行了生物学功能鉴定。该基因的cDNA序列如序列表SEQ ID NO:1所示,其编码的蛋白质的序列如SEQ ID NO:3所示。通过转基因功能验证表明,在番茄中超量表达该基因,可以显著调节番茄叶片花青素含量的功能。
本发明涉及植物基因工程技术领域,具体涉及一种番茄茸毛调控基因的克隆和应用。该番茄茸毛调控的基因的序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示,SEQ ID NO:1所示序列与其背景材料TS212相比发生了单碱基的突变,由胞嘧啶(C‑1676)变成了腺嘌呤(A);与SEQ ID NO:2相比,突变体LA3127存在两个突变位点,第436位由G突变为A,第1676位由C突变为A;与LA1589相比,LA3127发生了多个位点的突变,其中第1676位同样由C突变为A。Ln基因的编码区由胞嘧啶(C‑1676)变成了腺嘌呤(A),导致了丙氨酸(Ala‑559)到谷氨酸(Glu)的转变,进而诱导腺体毛的显著增加。本发明所克隆的Ln基因能够诱导腺体毛的显著增加,利用克隆的Ln基因的超量表达,可以增强番茄的抗虫性和抗病毒能力,对于番茄育种具有重要的意义。
本发明属于基因工程技术领域,公开了一种调控番茄抗坏血酸积累的基因及应用,调控番茄抗坏血酸积累的SlF‑Box基因的DNA为SEQ ID NO:1;利用调控番茄抗坏血酸积累的SlF‑Box基因编码的蛋白氨基酸序列为SEQ ID NO:2;利用调控番茄抗坏血酸积累的F‑box基因构建的表达载体为pGBKT7,DNA序列为SEQ ID NO:3。本发明对转基因株系做泛素表达水平检测发现,超量表达SlF‑Box之后,泛素表达水平有上调趋势,与之对应的是抗坏血酸含量的下降;本发明实验表明F‑box蛋白SlF‑Box通过泛素‑蛋白酶复合体途径能调控番茄中抗坏血酸的合成。