本发明提供一种核苷酸序列构建的CRISPR重组质粒靶向编辑ISS序列的方法,步骤为:靶向设计sgRNAqingqin oligo序列,两端加BsmBI质粒酶切位点,构建重组质粒,转化,铺板,挑单克隆,提质粒,测序,序列比对,经鉴定,构建成功。本发明采用CRISPR case 9 sgRNAqingqin重组质粒,可以精准靶向编辑(包括删除、插入及突变)ISS序列,也可以达到使剪接沉默子ISS序列失去作用或作用减弱的效果,从而显著促进SMN2外显子7列入,而且该重组质粒可以在细胞内持续性表达发挥作用,一次性转染即可,是治疗相关遗传性疾病最有潜力的方法。