本发明涉及属于生物材料领域。具体涉及一种促牙髓‑牙本质复合体再生支架及其制备方法与应用。本发明提供一种促牙髓‑牙本质复合体再生的脱落乳牙干细胞细胞外基质支架(extracellular matrix scaffold of stem cells from exfoliated deciduous teeth,SHED‑ECMS)及其制备方法。首次应用脱落乳牙干细胞细胞外基质成功制备牙髓仿生型SHED‑ECMS,其具有牙髓组织形态和结构,可以实现个性化制备。SHED‑ECMS能够为参与牙髓再生的干细胞定植、增殖、分化提供适宜的微环境,能够定向诱导骨髓间充质干细胞成牙本质向分化,形成管状修复性牙本质,网状牙髓样组织,以促进牙髓‑牙本质复合体再生,减少再生性牙髓治疗术后根管内不规则骨样钙化物形成。SHED‑ECMS具有优秀的生物相容性,无细胞毒性,适宜的降解性能,低免疫源性,适于临床应用。