本发明公开了一套用于检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、I型和II型犬腺病毒的多重PCR检测引物,所述引物包括三对引物,其中,用于犬瘟热病毒检测的引物序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示;用于犬细小病毒检测的引物序列分别为SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示;用于I型和II型犬腺病毒检测的引物序列为SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。采用本发明引物通过多重PCR的方法可以同时检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、I型和II型犬腺病毒,具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点。
本发明公开了一套用于区分犬瘟热病毒野毒株与疫苗株的RT-LAMP引物及其应用,所述RT-LAMP引物包括一对外引物和一对内引物,其中,外引物的序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示;内引物的序列分别为SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。以本发明所设计的引物采用RT-LAMP检测方法对各种基因型CDV野毒株进行检测,检测结果均为阳性,而对犬瘟热疫苗株、犬细小病毒以及其他常见犬源病毒检测结果均为阴性。应用本发明引物序列采用RT-LAMP检测方法,可以非常准确地区分CDV野毒株和CDV疫苗株,具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点。
本发明公开了一种与兔出血症病毒VP60蛋白相结合的蛋白及其应用,其特征在于至少包含如SEQ ID NO:1所示的序列。在发明中,通过酵母双杂交技术,从兔肝脏组织cDNA文库中钓取得到与兔出血症病毒结构蛋白VP60相互作用的膜突蛋白MSN。通过免疫共沉淀试验,体外验证了该蛋白具有和病毒粒子相互结合的功能,纯化的MSN蛋白可以抑制8个血凝单位的病毒抗原对人“O”型血红细胞的凝集作用。以该蛋白质与兔出血症病毒室温内孵育,经口服、滴鼻接种RHDV抗体阴性兔,8天后兔仍然存活,外表健康,病理解剖及切片检查各脏器也无异常。病毒感染兔,于3日内死亡。可见该蛋白可以用于制备治疗兔出血症的药物中。