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[发明专利]一种复苏即用型红细胞冷冻保护剂及使用方法-CN201811098960.0有效
发明人：宋振涛;陈恒;曲廷瑜 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2018-09-20 - 公布日： 2021-02-02 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种复苏即用型红细胞冷冻保护剂及使用方法，涉及细胞技术领域，本发明提供的红细胞冷冻保护剂成分包括0.25~0.3mol/L的海藻糖，5~7%（v/v）的二甲基亚砜，1~3%（v/v）的人血清白蛋白。本发明提供的红细胞冷冻保护剂成分简单，在冻存细胞时不需要严格控制红细胞和红细胞冷冻保护剂之间的混合速度，直接混合即可，冻存方法简便且耗时短。利用本发明冻存的红细胞，复苏后不需要洗涤即可使用，省去了甘油冻存法中繁琐耗时的洗涤步骤，满足了紧急用血者的需要。
一种复苏即用型红细胞冷冻保护使用方法

[发明专利]一种培养中鼻甲来源嗅鞘细胞的方法-CN201810235525.1有效
发明人：陈恒;宋振涛;刘小盾;曲廷瑜 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2018-03-21 - 公布日： 2020-09-29 - 主分类号： C12N5/079 文献下载
摘要：本发明提供了一种从中鼻甲分离制备嗅鞘细胞的方法，先将中鼻甲粘膜进行二次消化，去除血细胞及上皮层；然后将消化后的组织块进行原代培养，细胞生长至一定融合度后进行第一次传代；第一代细胞进行加压筛选，随后撤去筛选试剂，待细胞培养至一定融合度后进行鉴定。本发明的嗅鞘细胞培养方法，具有无伦理问题、组织来源易采集、安全性高等优点。最后获得的细胞为107量级，且纯度达到国际同类水平，适宜用于科研试验与临床前研究。本发明使用的试剂均为常见试剂，单位细胞量的成本较低。
一种培养鼻甲来源细胞方法

[发明专利]一种从脐带血分离总有核细胞与单个核细胞的方法-CN201910687357.4有效
发明人：付亚茹;孙阳阳;刘小盾;曲廷瑜 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2019-07-29 - 公布日： 2020-09-22 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明提供了一种从脐带血分离总有核细胞与单个核细胞的方法：首先分离TNCs：脐带血中加入含5%右旋糖酐及2%人血清白蛋白的PBS缓冲液，离心弃上清，获得TNCs沉淀I；沉淀洗涤后获得TNCs沉淀；将TNCs沉淀用Ficoll淋巴细胞分离液密度梯度离心，收集单个核细胞白膜层，离心后获得单个核细胞沉淀。该方法高效、方便、省时、可重复性高，可以利用脐血库丰富的冻存脐血资源，提高冻存脐带血中衍生干细胞和免疫细胞的分离效率。
一种脐带血分离总有核细胞单个方法

[发明专利]一种诱导SH-SY5Y细胞分化为多巴胺能神经元的方法-CN201710591673.2有效
发明人：宋振涛;陈恒;曲廷瑜 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2017-07-19 - 公布日： 2020-07-21 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明提供了一种诱导SH‑SY5Y细胞分化为多巴胺能神经元的方法，采用以下步骤：SH‑SY5Y细胞在基础培养基中培养至一定融合度，进行消化，获得SH‑SY5Y细胞的细胞悬液；将上述细胞悬液铺板于培养皿以诱导培养基培养，获得多巴胺能神经元。本发明诱导SH‑SY5Y细胞分化为多巴胺能神经元的方法，利用含有aFGF、TPA、毛喉素（Forskolin）、dbcAMP和普拉克索的诱导培养基培养SH‑SY5Y细胞后，可将其诱导为多巴胺能神经元，并可以分泌多巴胺；在优化条件下，多巴胺能神经元分化率约为15%，诱导出的DAT阳性细胞占总细胞数量的5%，分化率高、分化水平高。
一种诱导 sh sy5y 细胞化为多巴胺神经元方法

[实用新型]一次性无菌新型吸引式导管-CN201821156931.0有效
发明人：李学凯;曹启龙;曲廷瑜;李江陵;蔡艳;李海英 -专利权人：湖北省银丰鼎诚生物工程有限公司;银丰生物工程集团有限公司
申请日： 2018-07-20 - 公布日： 2019-06-14 - 主分类号： A61M5/14 文献下载
摘要：本实用新型公开了一次性无菌新型吸引式导管，包括吸引式导管本体；所述的吸引式导管本体设有两端设有导流口，导流口之间设有导流管，导流管上设有排气排液装置和导流管控制开关，所述的排气排液装置为椭圆形球体。本实用新型适用各种无菌要求比较高的实验室或高精密设备液体转移。使用转移液体时，操作简单快捷，一人就能轻松完成工作，且液体不会溅出仪，防止交叉污染，大大提高工作质量和效率，节省人力物力。
吸引式导流管排气排液装置本实用新型一次性无菌导管本体导流口导管高精密设备椭圆形球体交叉污染人力物力液体转移溅出无菌

[实用新型]一种新型无菌便捷式细胞筛-CN201821157062.3有效
发明人：向茜茜;曹启龙;曲廷瑜;王西俊;李海英;徐峰波 -专利权人：湖北省银丰鼎诚生物工程有限公司;银丰生物工程集团有限公司
申请日： 2018-07-20 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： C12M1/12 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种新型无菌便捷式细胞筛，包括细胞筛本体；所述的细胞筛本体设有细胞筛网，细胞筛网边缘连接滑壁，滑壁的另一侧设有开口，开关边缘设有固定圈，固定圈上设有把握结构，细胞筛网上设有筛孔，筛孔的数量为多个，均匀设置在筛网上。使小量细胞样本过滤更加快速，便捷，减少细胞损失，稳定细胞产品回收率，降低实验和工艺假性误差，降低过滤时间，提高工作效率。
细胞筛细胞筛网便捷式固定圈滑壁筛孔无菌过滤本实用新型产品回收率边缘连接工作效率均匀设置开关边缘稳定细胞细胞损失细胞样本开口

[实用新型]一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶-CN201820101135.0有效
发明人：曹启龙;周芙玲;魏永长;宋现收;曲廷瑜;黄昕华;徐峰波;李海英 -专利权人：湖北省银丰鼎诚生物工程有限公司;银丰生物工程集团有限公司
申请日： 2018-01-22 - 公布日： 2018-09-14 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶，包括瓶身、瓶身设有瓶口、瓶盖，所述的瓶身内设有纳米半透膜，纳米半透膜将瓶身内的空间隔成两个部分，分别用作为贴壁细胞的培养容器、悬浮细胞的培养容器，瓶盖为透气性瓶盖。本技术方案的两种细胞操作时相互不影响，但两种细胞之间分泌的细胞因子的可以通过纳米半透膜相互作用，在一定意义上真实反应两种细胞之间的相互作用和影响。
瓶身瓶盖贴壁细胞悬浮细胞半透膜细胞培养瓶培养容器本实用新型细胞细胞操作细胞因子真实反应空间隔透气性瓶口分泌

[实用新型]一种可调节式显微镜拍照支架-CN201820101789.3有效
发明人：薛海燕;曹启龙;李学凯;宋现收;曲廷瑜;徐峰波 -专利权人：湖北省银丰鼎诚生物工程有限公司;银丰生物工程集团有限公司
申请日： 2018-01-22 - 公布日： 2018-09-14 - 主分类号： F16M13/02 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种可调节式显微镜拍照支架，包括支架本体，相机固定架，支架本体设有合金杆，合金杆成对设置，合金杆的底端通过力臂卡口与显微镜连接；合金杆的顶端设有相机固定架，相机固定架呈矩形，相机固定架卡接相机或手机，相机固定架的边框上设有电控滑杆，电控滑杆调节相机或手机与相机固定架的边框的间距。本装置通过力臂卡口卡接固定在显微镜的目镜臂上，可放置不同型号的拍照相机或手机，并通过卡接位置的变化调节至自己想要的位置进行拍照，拍照稳定，成像清晰，简单易操作；在不用拍照期间可下放支架或拆卸下来，不影响显微镜观察使用；本装置生产成本低、设计工艺简便、通用性强、易推广。
相机固定合金杆拍照显微镜手机支架边框可调节式支架本体电控滑杆卡口力臂相机装置生产成本本实用新型显微镜观察变化调节成对设置成像清晰卡接固定卡接位置通用性强底端卡接目镜拆卸照相机下放

[发明专利]一种可调节式显微镜拍照支架-CN201810058921.1在审
发明人：曹启龙;薛海燕;周芙玲;李学凯;宋现收;曲廷瑜;黄昕华;徐峰波 -专利权人：湖北省银丰鼎诚生物工程有限公司;银丰生物工程集团有限公司
申请日： 2018-01-22 - 公布日： 2018-05-22 - 主分类号： F16M13/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种可调节式显微镜拍照支架，包括支架本体，相机固定架，支架本体设有合金杆，合金杆成对设置，合金杆的底端通过力臂卡口与显微镜连接；合金杆的顶端设有相机固定架，相机固定架呈矩形，相机固定架卡接相机或手机，相机固定架的边框上设有电控滑杆，电控滑杆调节相机或手机与相机固定架的边框的间距。本装置通过力臂卡口卡接固定在显微镜的目镜臂上，可放置不同型号的拍照相机或手机，并通过卡接位置的变化调节至自己想要的位置进行拍照，拍照稳定，成像清晰，简单易操作；在不用拍照期间可下放支架或拆卸下来，不影响显微镜观察使用；本装置生产成本低、设计工艺简便、通用性强、易推广。
一种调节显微镜拍照支架

[发明专利]一种脐血调节性T细胞体外扩增方法-CN201711305564.6在审
发明人：付亚茹;孙阳阳;王洪星;曲廷瑜 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2017-12-11 - 公布日： 2018-05-08 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种脐血调节性T细胞体外扩增方法，它包括步骤：新鲜脐血，经Ficoll密度梯度离心法分离获得单个核细胞，将单个核细胞接种至预先包被anti‑CD3抗体的培养皿中，添加诱导培养液诱导Tregs细胞的体外扩增。本发明提供的方法能够自新鲜脐血中体外高效扩增获得高纯度的Tregs细胞。
一种调节细胞体外扩增方法

[发明专利]一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶-CN201810058348.4在审
发明人：曹启龙;周芙玲;魏永长;宋现收;曲廷瑜;黄昕华;徐峰波;李海英 -专利权人：湖北省银丰鼎诚生物工程有限公司;银丰生物工程集团有限公司
申请日： 2018-01-22 - 公布日： 2018-04-20 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶，包括瓶身、瓶身设有瓶口、瓶盖，所述的瓶身内设有纳米半透膜，纳米半透膜将瓶身内的空间隔成两个部分，分别用作为贴壁细胞的培养容器、悬浮细胞的培养容器，瓶盖为透气性瓶盖。本技术方案的两种细胞操作时相互不影响，但两种细胞之间分泌的细胞因子的可以通过纳米半透膜相互作用，在一定意义上真实反应两种细胞之间的相互作用和影响。
一种细胞悬浮培养细胞培养

[发明专利]一种从冻存脐血中分离内皮祖细胞的方法-CN201710974356.9在审
发明人：付亚茹;孙阳阳;曲廷瑜 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2017-10-19 - 公布日： 2018-01-12 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开一种从冻存脐血中分离内皮祖细胞的方法，发现直接通过获得冻存脐血的总有核细胞数，并将其铺于人纤维黏连蛋白包被的培养皿中培养，即可获得内皮祖细胞；获得内皮祖细胞的方法高效、简便，无外源性培养物质便于细胞调整并可用于临床；可得到大量纯化的内皮祖细胞；使用本发明方法85%以上冻存脐血可以分离获得内皮祖细胞。
一种冻存脐血中分离内皮细胞方法

[发明专利]一种分离培养脐静脉血管内皮细胞的方法-CN201610336519.6在审
发明人：刘东;曲廷瑜;张秀涛 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2016-05-20 - 公布日： 2016-08-31 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域的成体细胞的分离培养领域,尤其涉及一种分离培养脐静脉血管内皮细胞的方法：将脐静脉从华通胶中完全剥离出来；将脐静脉沿一侧纵向剪开，使其由管状变为长方形血管壁面，漂洗；加入Ⅱ型胶原酶进行消化；消化完成后将血管取出漂洗，漂洗液与酶解液混合，离心弃上清，使用培养基进行培养。本发明的细胞分离方法操作简单，单人可独立进行，且红细胞污染较少，可细胞接种后72h再进行换液，细胞贴壁效率更高；原代所得到的血管内皮细胞数量多，P3细胞CD31阳性表达可达95%以上，且在分离制备血管内皮细胞同时不影响脐带间充质干细胞的制备，可充分利用实验材料。
一种分离培养静脉血管内皮细胞方法

[发明专利]一种诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元的方法-CN201510899725.3在审
发明人：杨洪娜;陈恒;刘小盾;曲廷瑜 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2015-12-09 - 公布日： 2016-02-03 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞治疗技术领域的干细胞分化技术，特别涉及一种诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元的方法：取1-2代前脑来源的神经干细胞用神经干细胞基础培养基培养至神经球直径0.5-1mm大小时，更换培养基为诱导培养基使细胞贴壁生长，培养3-10天后获得多巴胺能神经元；诱导培养基中含有诱导剂aFGF，TPA，毛喉素，普拉克索,BMP-7。利用诱导培养基培养前脑神经干细胞后，神经干细胞分化为多巴胺能神经元的比例达到了30%，大大提高了其分化率，神经元分泌多巴胺的分泌量提高了20倍以上，前脑神经干细胞被有效的诱导为多巴胺能神经元。
一种诱导神经干细胞化为多巴胺神经元方法

[发明专利]一种诱导神经母细胞瘤细胞向神经元分化的方法-CN201510728698.3在审
发明人：刘小盾;杨洪娜;曲廷瑜 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2015-10-30 - 公布日： 2015-12-23 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明涉及细胞研究领域的细胞转分化技术，特别涉及一种诱导神经母细胞瘤细胞向神经元分化的方法。将神经母细胞瘤细胞用诱导培养基培养3-7天后，获得神经元细胞；诱导培养基为向神经干细胞条件培养液中加入维甲酸至10μM得到的；用含有DMEM/F12基础培养基、B27、bFGF，EGF、肝素钠、左旋谷氨酰胺、青链霉素的完全培养基培养神经干细胞，培养3天半量更换完全培养基，更换出来的培养液即为神经干细胞条件培养液。本发明方法使分化效率提高，细胞的成熟度和神经元细胞的神经突触生长也有所改善；可以抑制RA处理的SH-SY5Y细胞中的细胞凋亡。
一种诱导神经细胞神经元分化方法

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