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[发明专利]一种利用微通道反应器酶解制备游离虾青素的方法-CN201911178459.X在审
发明人：应国清;赵小云;梅建凤;易喻;陈建澍;张彦璐;王旭东 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2019-11-27 - 公布日： 2020-04-21 - 主分类号： C12P23/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用微通道反应器酶解制备游离虾青素的方法，所述方法为：以内径为0.7–1.0mm、长度为5–10m的不锈钢管为微通道反应器，以虾青素油为油相，以脂肪酶水溶液为水相，在油相和水相均以20–150μL/min速度通入、温度30–40℃、油相在微通道中的滞留时间为60–200min的条件下进行酶解反应，获得含游离虾青素的虾青素油。本发明在微通道反应器中利用脂肪酶催化虾青素酯水解，大大地缩短了反应时间，且具有较高的转化率，虾青素油的游离虾青素含量由2.13mg/g提高到19.7mg/g，提高了8.25倍；降低了反应成本，具有经济高效的优势。
一种利用通道反应器制备游离虾青素方法

[发明专利]一种AMH单克隆抗体及其制备与应用-CN201910235649.4在审
发明人：应国清;倪梦梦;梅建凤;易喻;陈建澍;张彦璐 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2019-03-27 - 公布日： 2019-08-16 - 主分类号： C07K16/26 文献下载
摘要：本发明公开了一种AMH单克隆抗体及其制备与应用，所述单克隆抗体是用抗原免疫Balb/c小鼠，通过辛酸‑硫酸铵法及Protein G两步纯化获得；所述抗原氨基酸序列为SEQ ID No：3所示，核苷酸序列为SEQ ID No：2所示。本发明的试剂盒灵敏度可达1ng/ml，效价可达1.0×10⁶以上，在国内市场具有一定优势。同时，不需要价格昂贵的仪器设备，降低仪器维修及检测成本，存在试剂交叉污染与样品干扰可能性小，背景信号低，同时环境因素及非特异性反应对检测结果影响不大，具有快速、廉价、简便、灵敏的特点。
单克隆抗体制备非特异性反应试剂盒灵敏度抗原氨基酸背景信号核苷酸序环境因素检测结果交叉污染抗原免疫两步纯化硫酸铵法仪器设备仪器维修效价辛酸应用灵敏国内市场检测

[发明专利]一种生物转化灯盏乙素制备野黄芩素的方法-CN201610298667.3有效
发明人：郑晨;沈琪华;梅建凤;董志红;王晔;易喻;应国清 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2016-05-06 - 公布日： 2019-06-14 - 主分类号： C12P17/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种生物转化灯盏乙素制备野黄芩素的方法，所述的方法以黑曲霉JH‑2产酶培养后的发酵液经抽滤获得的滤液为生物催化剂，以灯盏乙素为底物，以甲醇为助溶剂构成转化体系，在30～35℃恒温振荡条件下进行转化反应，转化反应结束后，将转化液分离纯化，获得野黄芩素；在底物投料浓度为2g/L时，野黄芩素的转化总收率85.6％，纯度为82.3％；黑曲霉JH‑2营养要求低、培养时间短、抗污染能力强；生长快，转化效率高；转化过程中不产生有害物质，副产物少；本发明把活性低的灯盏乙素转化活性更好的野黄芩素，可大规模工业化应用，生产工艺具有周期短，转化率高，环境污染小等优点。
一种生物转化灯盏制备黄芩方法

[发明专利]粘质沙雷氏菌LL-413菌株及其制备舍雷肽酶的应用-CN201610407429.1有效
发明人：梅建凤;李靓;应国清;易喻;陈建澍;张彦璐 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2016-06-08 - 公布日： 2019-06-14 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种粘质沙雷氏菌LL‑413菌株及其制备舍雷肽酶的应用，将粘质沙雷氏菌LL‑413菌株接种入产酶培养基，于28～32℃、200～250r/min发酵20～42h，获得含有舍雷肽酶的发酵液，发酵液经过离心后去除菌体，上清液再经过盐析、透析和冷冻干燥后，即可得到舍雷肽酶；本发明LL‑413菌株生长快、容易培养，发酵周期短；产舍雷肽酶活性高，在优选的条件下，摇瓶发酵的酶活可达1126U/mL，10L发酵罐发酵酶活可达1505U/mL；分离纯化工艺简单，经盐析和透析脱盐后，舍雷肽酶的冻干粉酶活达2843U/mg，舍雷肽酶分子量为50kDa，纤溶活性达112357U/g。
粘质沙雷氏菌 ll 413 菌株及其制备肽酶应用

[发明专利]桔青霉LB及在生物转化连翘苷制备连翘脂素中的应用-CN201610659139.6有效
发明人：梅建凤;董志红;应国清;易喻;陈建澍;张彦璐 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2016-08-11 - 公布日： 2019-05-28 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种桔青霉LB及在生物转化连翘苷制备连翘脂素中的应用，所述的应用是将桔青霉LB经发酵培养后获得的湿菌体为生物催化剂，以连翘苷为底物，以甲醇为助溶剂，以含湿菌体的发酵液或将湿菌体悬浮于缓冲液中构成转化体系，于30～35℃、200～250r/min恒温振荡条件下进行转化反应，转化反应结束后，将转化液分离纯化，获得连翘脂素。在底物投料浓度为2g/L时，连翘脂素的转化得率为90.5％。桔青霉LB营养要求低、发酵时间短、抗污染能力强；生长快；转化反应专一性好，转化效率高，副产物少。
桔青霉连翘转化反应连翘苷湿菌体生物转化底物制备应用抗污染能力生物催化剂发酵培养分离纯化恒温振荡营养要求转化体系转化效率发酵液副产物缓冲液助溶剂专一性转化液得率甲醇投料发酵悬浮生长转化

[发明专利]紫变青霉QL-9204及在转化根皮苷制备根皮素中的应用-CN201610051127.5有效
发明人：梅建凤;李靓;金航;应国清;王鸿;易喻 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2016-01-25 - 公布日： 2019-03-05 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种紫变青霉QL‑9204及在转化根皮苷制备根皮素中的应用；本发明紫变青霉QL‑9204无毒无害，使用安全的菌种；紫变青霉QL‑9204生长快、抗杂菌能力强、容易培养，批次稳定；发酵培养基成分简单，市场价格低，从而生产成本较低；本发明将底物根皮苷直接投入到粗酶液中转化，免去了酶的分离纯化步骤，工艺简单，易于工业化应用；根皮素的转化得率高，最高可达92.5％，且具有副产物少，产物容易提取等优点。
青霉 ql 9204 转化根皮苷制备根皮素中的应用

[发明专利]一种核酸适体生物传感器及其制备与应用-CN201810500489.7在审
发明人：应国清;易喻;王敏君;梅建凤;陈建澍;张彦璐 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2018-05-23 - 公布日： 2018-12-11 - 主分类号： G01N27/327 文献下载
摘要：本发明公开了一种核酸适体生物传感器及在检测内毒素中的应用，所述传感器以金电极为基底，在基底表面自组装3～巯基丙酸，然后再在3～巯基丙酸上偶联氨基修饰的核酸适体。本发明有益效果主要体现在：本发明构建的核酸适体生物传感器用于细菌内毒素检测，构建简易，特异性高，检测限低，灵敏度达0.001EU/mL。所述细菌内毒素核酸适体生物传感器具有制备方便简单，易于操作，灵敏度高，检测限低等特点，可以进一步提高生物传感器的稳定性，进而使其具有广泛的应用前景。
生物传感器核酸适体巯基丙酸灵敏度构建制备检测细菌内毒素检测内毒素应用细菌内毒素氨基修饰基底表面自组装传感器基底偶联简易

[发明专利]一种环二肽类化合物的制备方法-CN201510804386.6有效
发明人：梅建凤;金航;李靓;王鸿;应国清;易喻;陈建澍;张彦璐 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2015-11-19 - 公布日： 2018-10-23 - 主分类号： C12P17/12 文献下载
摘要：本发明提供了一种环二肽类化合物的制备方法，所述方法是将桔青霉(Penicillium citrinum)MNP12010101接种在含钴离子的发酵培养基中，在25～30℃、200～250r/min恒温振荡条件下培养5～7d后，再在25～30℃下静置4～5d，将培养液分离纯化，获得环(甘‑脯)二肽、环(丙‑脯)二肽、环(异亮‑脯)二肽和环(丙‑缬)二肽化合物；本发明所述培养方法使桔青霉MNP12010101细胞合成了常规培养条件下不能合成的环二肽；培养基组成简单，工艺简单，发酵成本低；桔青霉MNP12010101细胞合成的4种环二肽具有抗肿瘤活性。
一种二肽化合物制备方法

[发明专利]一株不产灵菌红素的粘质沙雷氏菌及其制备舍雷肽酶的应用-CN201810073429.1在审
发明人：梅建凤;蔡少芬;应国清;易喻;陈建澍;张彦璐 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2018-01-25 - 公布日： 2018-06-12 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株不产灵菌红素的粘质沙雷氏菌突变株及其制备舍雷肽酶的应用，粘质沙雷氏菌MW‑9菌株不产灵菌红素，有效地改善了成品舍雷肽酶的品质；粘质沙雷氏菌MW‑9菌株产舍雷肽酶活性稳定，摇瓶发酵产酶活力稳定在1000U/mL左右。
粘质沙雷氏菌舍雷肽酶灵菌红素菌株制备活性稳定摇瓶发酵突变株有效地产酶应用

[发明专利]一种细菌内毒素核酸适体及其应用-CN201510128114.9有效
发明人：应国清;朱芳芳;易喻;梅建凤;陈建澍;张彦璐 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2015-03-23 - 公布日： 2018-02-13 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明公开了一种细菌内毒素核酸适体及在去除内毒素中的应用，核酸适体的核苷酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示；将细菌内毒素核酸适体与磁珠结合，然后再与待测样本中的内毒素特异性结合，从而去除待测样本中的内毒素；本发明通过多粘菌素B，把细菌内毒素固定到琼脂糖凝胶颗粒上，避免了传统方法中通过共价反应偶联到基质上对靶标构象的影响；PMB‑Elisa法使得检测简便且灵敏度高，而且筛选获得的核酸适体本身无毒性，分子量小，渗透性好，易于合成与标记；通过SELEX方法筛选获得的核酸适体只特异性识别细菌内毒素，对其它多糖不具有识别功能。
一种细菌内毒素核酸及其应用

[发明专利]一种含N‑糖基化壳聚糖的快速成膜流体敷料及其制备与应用-CN201710412620.X在审
发明人：易喻;应国清;徐云霞;梅建凤;陈建澍;张彦璐 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2017-06-05 - 公布日： 2017-11-07 - 主分类号： A61L26/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种含N‑糖基化壳聚糖的快速成膜流体敷料及其制备与应用，所述敷料由如下原料制成N‑糖基化壳聚糖、5mg/mL生理盐水、乳酸、聚乙烯醇、去离子水、橄榄油、薄荷脑、质量浓度30％双氧水和体积浓度95％乙醇水溶液；本发明敷料具有止血、抑菌、镇痛、促进伤口愈合等功效；具有良好的透气性和防水性；不受伤口大小、形状、所在部位的限制，成膜有一定弹性，从而涂覆部位活动自如；良好的生物相容性及生物安全性，无刺激性，不产生过敏等症状；制备工艺简单、成本低廉，且携带和使用均方便。
一种糖基化壳聚糖速成流体敷料及其制备应用

[发明专利]一种液体壳聚糖创伤敷料及其制备与应用-CN201710412637.5在审
发明人：应国清;易喻;徐云霞;梅建凤;陈建澍;张彦璐 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2017-06-05 - 公布日： 2017-10-10 - 主分类号： A61L26/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种液体壳聚糖创伤敷料及其制备与应用，该液体壳聚糖创伤敷料由如下原料制成N‑糖基化壳聚糖、芦荟提取物、质量浓度10％聚乙烯醇水溶液、聚乙二醇、甘油、橄榄油、聚维酮碘、质量浓度30％双氧水、乳酸、薄荷脑、体积浓度95％乙醇水溶液、5mg/mL生理盐水；本发明的涂抹型的流体创伤敷料适用于皮肤擦伤割伤、皮肤皲裂、轻微烧烫伤、外科手术后缝合部位的保护等。
一种液体聚糖创伤敷料及其制备应用

[发明专利]一种金枪鱼眼透明质酸的提取方法-CN201510510730.0有效
发明人：应国清;王婧茜;陈建澍;易喻;梅建凤;张彦璐;龚海平 -专利权人：浙江工业大学;浙江海博食品有限公司
申请日： 2015-08-19 - 公布日： 2017-08-22 - 主分类号： C08B37/08 文献下载
摘要：本发明提供了一种从金枪鱼眼中分离提取透明质酸的方法，包括如下步骤从金枪鱼切片后的废弃部分中剥出金枪鱼眼玻璃体，经丙酮脱脂后干燥粉碎；在鱼眼干粉中加入蒸馏水提取，离心得上清液；再采用酶膜反应器处理；然后经乙醇沉淀；再将沉淀物溶解，经络合剂进行络合沉淀，沉淀物用盐解离，离心，解离液再经乙醇沉淀，最后沉淀物经脱水、干燥得到透明质酸产品；该方法提取透明质酸的优点在于操作工艺简单，原料廉价易得，起到了废物利用、综合开发的效果，为开发高附加值产品开辟了一条道路。
一种金枪鱼透明提取方法

[发明专利]黑曲霉JH-2及在生物转化合成积雪草酸中应用-CN201410552706.9有效
发明人：梅建凤;金航;李靓;陈虹;应国清;王鸿;易喻 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2014-10-17 - 公布日： 2015-02-18 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明提供了一株糖苷酶产生菌——黑曲霉(Aspergillus niger)JH-2，及其在生物转化提高积雪草中积雪草酸含量应用；所述黑曲霉是发酵工业中常用菌种，无毒无害，使用安全，转化培养基成分简单，仅需5种盐类成分，生产成本低；黑曲霉JH-2生长迅速、抗杂菌能力强、容易培养，批次稳定；本发明以积雪草干粉为原料，投入到培养基中转化，既免去积雪草苷分离提取操作，也免去了酶的分离纯化步骤，工艺简单，易于工业化应用；积雪草粉经生物转化处理后，积雪草酸的含量最高可以提高3倍以上。
曲霉 jh 生物转化合成积雪草酸应用

[发明专利]一种人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体片段的分离方法-CN201410505048.8在审
发明人：易喻;应国清;高虹;王鸿;梅建凤;陈建澍 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2014-09-27 - 公布日： 2015-01-28 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体片段的制备方法：将温敏载体NHS-PNIPAM固定化木瓜蛋白酶于pH7.0，0.05mol/LPBS缓冲液中，加入人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体，20～60℃水浴反应2～24h，反应液于40℃，10000r/min离心15min，沉淀为NHS-PNIPAM固定化木瓜蛋白酶，回收利用，滤液为含抗体Fab片段的水解液，采用蛋白L亲和层析对含抗体片段的水解液进行分离纯化，获得抗体Fab片段；本发明方法操作简便、纯化步骤少、所得抗体片段纯度高；本发明中制备的抗体Fab片段只需经过一步纯化就可达到96.0％以上的纯度。
一种绒毛促性腺激素单克隆抗体片段分离方法