本发明公开了一种抗猫IL23R多克隆抗体及其制备方法与应用。所述多克隆抗体在制备过程中所用的抗原多肽序列为SEQ ID NO.1。本发明对猫IL23R蛋白抗原表位分析后进行多肽设计与合成并将合成多肽与载体蛋白交联;制备兔抗猫IL23R多克隆抗体;收集、分离得到含有抗体的血清,纯化抗体,即得到兔抗猫IL23R多克隆的抗体,同时对其进行ELISA与Western blot鉴定。本发明制备的抗猫IL23R多克隆抗体具有特异性,效价高、亲和力强,能够实现猫组织样本中IL23R的定性、定量检测,可用于相关疾病的检测与诊断,为相关疾病的研究与治疗奠定重要的基础。
本发明公开了一种抗猫CK5/6多克隆抗体及其制备方法与应用。所述多克隆抗体在制备过程中所用的抗原多肽序列如SEQ ID No.1所示。所述多克隆抗体的制备方法如下:(1)合成多肽与KLH载体蛋白交联;(2)制备兔抗猫CK5/6多肽抗体;(3)收集、分离得到含有抗体的血清,纯化抗体,即得到兔抗猫CK5/6多肽的抗体;(4)ELISA与Western Blot鉴定。本发明制备的抗猫CK5/6多克隆抗体具有特异性,效价高、亲和力强,能够实现猫组织样本中CK5/6的定性、定量检测,可用于相关疾病的检测与诊断,为相关疾病的研究与治疗奠定重要的基础。
本发明公开了一种猫CK7多肽抗原及其多克隆抗体制备方法与应用。所述猫CK7多肽抗原的氨基酸序列如SEQ ID No .1所示。所述多克隆抗体的制备方法如下:(1)合成多肽与KLH载体蛋白交联;(2)制备兔抗猫CK7多肽抗体;(3)收集、分离得到含有抗体的血清,纯化抗体,即得到兔抗猫CK7多肽的抗体;(4)ELISA与Western Blot鉴定。本发明制备的抗猫CK7多克隆抗体具有特异性,效价高、亲和力强,能够实现猫组织样本中CK7的定性、定量检测,可用于相关疾病的检测与诊断,为相关疾病的研究与治疗奠定重要的基础。
本发明公开了一种基于PLIN1基因的sgRNA,所述sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示。本发明还公开了扩增该sgRNA序列的引物对、基于PLIN1基因的CRISPR/Cas9敲除质粒载体及其应用。本发明的构建了控制猪PLIN1基因表达的载体及验证其相应的敲除效率。本发明还提供三种用于控制猪PLIN1表达的载体并验证其敲除效率并选出一种最优敲除载体,通过所述载体能够控制猪细胞中的PLIN1表达量,进而控制猪的肌肉的纤维组成,调节瘦肉率的变化。本发明还验证了该PLIN1基因敲除后的线粒体活性氧含量有所升高、线粒体膜电位检测升高、ATP含量降低、细胞周期发生阻滞,而细胞凋亡率大大降低。