本发明提供了一种单加氧酶基因phzO、编码蛋白质、基因工程菌株及其构建方法和应用。所述单加氧酶基因phzO的编码序列如SEQ ID NO:1所示，所述单加氧酶基因phzO的上游非编码区的DNA序列如SEQ ID NO:2所示。编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。本发明将绿针假单胞菌LX24单加氧酶基因phzO基因及其上游非编码区替换至绿针假单胞菌GP72AN的內源phzO位点，使2‑羟基吩嗪的产量提高了17％，转化率提高24％。
本发明提供了一种吩嗪‑1‑甲酰胺(PCN)的基因工程菌株及其制备方法和用途。该基因工程菌株可由如下方法制备而得敲除绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)HT66 CCTCC NOM 2013467及其衍生物中的pykA基因，即得。该基因工程菌株的制备方法包括如下步骤引物设计、重组质粒构建和突变菌株筛选。与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果采用全新的调控策略，改变细胞内代谢物质流向，大幅度提高了PCN的产量；该基因工程菌株安全可靠，稳定性好，可显著促进PCN的工农业应用。
本发明公开了一株高产吩嗪‑1‑甲酰胺的基因工程菌株及其构建方法；所述基因工程菌株具体是敲除绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)HT66CCTCC NOM 2013467基因组的lon基因、parS基因中的一个或两个基因而得到基因工程菌株；或者，敲除绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)HT66CCTCC NOM 2013467rpeA、psrA单突变株或者双突变株基因组的lon基因、parS基因中的一个或两个基因而得到基因工程菌株；其中，所述单突变株为HT66ΔrpeA、HT66ΔpsrA，双突变株为HT66ΔrpeAΔpsrA。与现有技术相比，本发明从一株绿针假单胞菌出发，将该菌基因组中lon和parS基因删除后，吩嗪‑1‑甲酰胺的发酵产量高达2425mg/L，可以用于吩嗪‑1‑甲酰胺的工业化生产与农业应用。
