本发明公开了一种膜蛋白SohB的表达载体及其表达纯化方法。所述的表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,包含:噬菌体T7启动子;大肠杆菌核糖体结合位点,其中包含NcoI序列CCATGG、SEQ ID NO.1所示的大肠杆菌膜蛋白SohB序列以及BamHI位点GGATCC;烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC;NdeI酶切位点CATATG;超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列;XhoI酶切位点CTCGAG;6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。本发明利用分子刚性的荧光蛋白作为筛选标记以及表达进程指示剂,该荧光蛋白由于具有分子水平刚性结构可以迅速折叠,能够帮助氮端膜蛋白SohB稳定其构象。本发明构建的表达载体能够实现膜蛋白SohB的大量表达,可用于后续新型抗生素的高通量筛选。
本发明公开了一种膜蛋白AmpG的表达载体及其表达纯化方法。所述的表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,包含:噬菌体T7启动子;大肠杆菌核糖体结合位点,其中包含NcoI序列CCATGG、SEQ ID NO.1所示的大肠杆菌膜蛋白AmpG序列以及BamHI位点GGATCC;烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC;NdeI酶切位点CATATG;超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列;XhoI酶切位点CTCGAG;6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。本发明利用分子刚性的荧光蛋白作为筛选标记以及表达进程指示剂,该荧光蛋白由于具有分子水平刚性结构可以迅速折叠,能够帮助氮端膜蛋白AmpG稳定其构象。本发明构建的表达载体能够实现膜蛋白AmpG的大量表达,可用于后续新型抗生素的高通量筛选。
本发明公开了一种膜蛋白CcmB的表达载体及其表达纯化方法。所述的表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,包含:噬菌体T7启动子;大肠杆菌核糖体结合位点,其中包含了NcoI序列CCATGG、SEQ ID NO.1所示的大肠杆菌膜蛋白CcmB序列以及BamHI位点GGATCC;烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC;NdeI酶切位点CATATG;超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列;XhoI酶切位点CTCGAG;6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。本发明利用分子刚性的荧光蛋白作为筛选标记以及表达进程指示剂,该荧光蛋白由于具有分子水平刚性结构可以迅速折叠,能够帮助氮端膜蛋白CcmB稳定其构象。本发明构建的表达载体能够实现膜蛋白CcmB的大量表达,可用于后续新型抗生素的高通量筛选。
本发明公开了一种膜蛋白YcbM的表达载体及其表达纯化方法。所述的表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,包含:噬菌体T7启动子;大肠杆菌核糖体结合位点,其中包含了NcoI序列CCATGG、SEQ ID NO.1所示的大肠杆菌膜蛋白YcbM序列以及BamHI位点GGATCC;烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC;NdeI酶切位点CATATG;超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列;XhoI酶切位点CTCGAG;6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。本发明利用分子刚性的荧光蛋白作为筛选标记以及表达进程指示剂,该荧光蛋白由于具有分子水平刚性结构可以迅速折叠,能够帮助氮端膜蛋白YcbM稳定其构象。本发明构建的表达载体能够实现膜蛋白YcbM的大量表达,可用于后续新型抗生素的高通量筛选。
本发明公开了一种膜蛋白AmtB的表达载体及其表达纯化方法。所述的表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,包含:噬菌体T7启动子;大肠杆菌核糖体结合位点,其中包含NcoI序列CCATGG、SEQ ID NO.1所示的大肠杆菌膜蛋白AmtB序列以及BamHI位点GGATCC;烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC;NdeI酶切位点CATATG;超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列;XhoI酶切位点CTCGAG;6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。本发明利用分子刚性的荧光蛋白作为筛选标记以及表达进程指示剂,该荧光蛋白由于具有分子水平刚性结构可以迅速折叠,能够帮助氮端膜蛋白AmtB稳定其构象。本发明构建的表达载体能够实现膜蛋白AmtB的大量表达,可用于后续新型抗生素的高通量筛选。
本发明公开了一种膜蛋白SecF的表达载体及其表达纯化方法。所述的表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,包含:噬菌体T7启动子;大肠杆菌核糖体结合位点,其中包含了NcoI序列CCATGG、SEQ ID NO.1所示的大肠杆菌膜蛋白SecF序列以及BamHI位点GGATCC;烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC;NdeI酶切位点CATATG;超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列;XhoI酶切位点CTCGAG;6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。本发明利用分子刚性的荧光蛋白作为筛选标记以及表达进程指示剂,该荧光蛋白由于具有分子水平刚性结构可以迅速折叠,能够帮助氮端膜蛋白SecF稳定其构象。本发明构建的表达载体能够实现膜蛋白SecF的大量表达,可用于后续新型抗生素的高通量筛选。
本发明公开了一种膜蛋白FieF的表达载体及其表达纯化方法。所述的表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,包含:噬菌体T7启动子;大肠杆菌核糖体结合位点,其中包含NcoI序列CCATGG、SEQ ID NO.1所示的大肠杆菌膜蛋白FieF序列以及BamHI位点GGATCC;烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC;NdeI酶切位点CATATG;超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列;XhoI酶切位点CTCGAG;6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。本发明利用分子刚性的荧光蛋白作为筛选标记以及表达进程指示剂,该荧光蛋白由于具有分子水平刚性结构可以迅速折叠,能够帮助氮端膜蛋白FieF稳定其构象。本发明构建的表达载体能够实现膜蛋白FieF的大量表达,可用于后续新型抗生素的高通量筛选。
本发明公开了一种膜蛋白YddG的表达载体及其表达纯化方法。所述的表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,包含:噬菌体T7启动子;大肠杆菌核糖体结合位点,其中包含NcoI序列CCATGG、SEQ ID NO.1所示的大肠杆菌膜蛋白YddG序列以及BamHI位点GGATCC;烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC;NdeI酶切位点CATATG;超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列;XhoI酶切位点CTCGAG;6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。本发明利用分子刚性的荧光蛋白作为筛选标记以及表达进程指示剂,该荧光蛋白由于具有分子水平刚性结构可以迅速折叠,能够帮助氮端膜蛋白YddG稳定其构象。本发明构建的表达载体能够实现膜蛋白YddG的大量表达,可用于后续新型抗生素的高通量筛选。