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- [发明专利]一种甲状腺癌类器官、培养基及培养方法-CN202310469106.5在审
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廖传荣;朱宇;徐丛;黄敏
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创芯国际生物科技（广州）有限公司
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2023-04-26
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2023-08-15
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C12N5/09
- 本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种甲状腺癌类器官、培养基及培养方法。甲状腺癌类器官培养基包括基础培养和特异性添加因子，特异性添加因子包括如下终浓度的组分：B27，1‑5×；L‑谷氨酰胺，0.5‑5mM；EGF，10‑100ng/ml；FGF10，1‑50ng/ml；R‑spondin 1，50‑500ng/ml；Forskolin，1‑50μM；促甲状腺激素，10‑100ng/ml；SB 505124，1‑10μM；SB 203580，1‑10μM。本发明提供的甲状腺癌类器官培养基适合甲状腺癌类器官的培养，含有的forskolin可以显著促进甲状腺癌类器官的形成和生长；本发明的类器官培养基的各个组分产生协同作用，使培养得到的甲状腺癌类器官维持了原发组织的形态结构和基因特征。
- 一种甲状腺癌器官培养基培养方法
- [发明专利]一种胰腺癌类器官、培养基及培养方法-CN202310468573.6在审
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廖传荣;朱宇;兰坚强;黄敏
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创芯国际生物科技（广州）有限公司
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2023-04-26
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2023-08-08
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C12N5/09
- 本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种胰腺癌类器官、培养基及培养方法。胰腺癌类器官培养基，其特征在于，包括基础培养和特异性添加因子，特异性添加因子包括如下终浓度的组分：B27，1‑5×；EGF，10‑100ng/ml；Noggin，20‑500ng/ml；R‑spondin 1，100‑1000ng/ml；Wnt3a，50‑500ng/ml；Igf 2，10‑100ng/ml；SB 505124，1‑10μM；SB 203580，1‑10μM；Y‑33075，1‑100nM。本发明提供的胰腺癌类器官培养基含有胰腺癌类器官培养所需的最少组分，组分不需要细胞培养中最常见的组分牛血清白蛋白，节约成本的同时降低了FBS中带来的细胞毒性和抑制物；本发明提供的胰腺癌类器官培养基适合胰腺癌类器官的培养，类器官培养基的各个组分产生协同作用，使培养得到的胰腺癌类器官维持了原发组织的形态结构和基因特征。
- 一种胰腺癌器官培养基培养方法
- [发明专利]一种基质胶及其制备方法和应用-CN202210861333.8有效
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廖传荣;朱宇;邱培;黄敏
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创芯国际生物科技（广州）有限公司
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2022-07-20
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2023-06-06
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C12N5/071
- 本发明涉及一种基质胶及其制备方法和应用，包括以下步骤：⑴配制培养基：在含10％胎牛血清的1640培养基中加入胶原蛋白；⑵重悬肉瘤细胞，然后接种；⑶将细胞培养瓶置于摇床中，将摇床整体置于细胞培养箱中37℃培养；⑷培养过程中，每3‑5天进行换液，换液时，1000rpm离心5‑10分钟，移去上清，然后使用步骤⑴所述培养基重悬；⑸培养14‑28天后，收集细胞；1000rpm离心5分钟，移去上清；⑹加入脱细胞液重悬沉淀，2‑8℃处理过夜；⑺高速离心30min，收集上清；⑻加入脱细胞液重悬洗涤后，高速离心30min，收集上清，重复本步骤洗涤3次；⑼将收集的上清液体合并，弃去沉淀；⑽合并后的液体使用透析液反复透析3‑5次；⑾收集透析后液体，将液体浓缩至蛋白总浓度为10‑15mg/ml即可得到基质胶。本发明方法保留了细胞外基质主要成分，有利于类器官培养。
- 一种基质及其制备方法应用
- [发明专利]一种冻存液组合物、冻存液及类器官冻存方法-CN202110483628.1有效
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廖传荣;朱宇;陈泽新;黄敏
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创芯国际生物科技（广州）有限公司
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2021-04-30
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2022-04-19
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A01N1/02
- 本发明提供一种冻存液组合物、冻存液及类器官冻存方法。所述冻存液组合物包括：低级脂肪醇、低聚异麦芽糖、白蛋白、ROCK抑制剂、原代细胞抗生素。冻存液按照终浓度的组成包括：低级脂肪醇，10‑50％(v/v)；低聚异麦芽糖，0.01‑0.5g/ml；白蛋白，0.01‑0.2g/ml；ROCK抑制剂，0.1‑10μM；原代细胞抗生素，0.2‑20mg/ml；溶剂为Advanced DMEM/F12培养基。类器官冻存方法包括：将培养得到的类器官去掉原培养基后加入细胞回收液反应5‑10min；在体系中进一步加入无菌Hank’s平衡盐溶液混匀，离心后保留沉淀；在沉淀中加入上述类器官冻存液后程序性降温。采用本发明的冻存液及方法对类器官进行冻存，在冻存复苏条件下能维持类器官原始细胞干性，有效保留类器官的冻存前的分化特征。
- 一种冻存液组合器官方法
- [发明专利]一种复合酶消化液及其制备方法和应用-CN202011320604.6有效
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谢素瑶;朱宇;廖传荣;黄敏
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创芯国际生物科技（广州）有限公司
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2020-11-23
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2022-04-12
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C12N5/00
- 本发明提供一种复合酶消化液及其制备方法和应用。该消化液包括以下终浓度的组分：四型胶原酶100‑200U/mL，二型分散酶1‑10U/ml，脱氧核糖核酸酶Ⅰ 50‑200U/ml，PMSF 0.1‑0.5mM，乙二醇10wt％‑20wt％，聚蔗糖5wt％‑10wt％，溶剂为无菌水；所述消化液的pH为7.4‑8.0。其制备方法包括：按照消化液各组分的终浓度配料；先将四型胶原酶、二型分散酶、脱氧核糖核酸酶Ⅰ、PMSF、聚蔗糖溶于无菌水中，然后加入乙二醇混合均匀；调节pH至7.4‑8.0，过滤除菌后即得。该复合酶消化液及其制备方法应用在类器官技术中。本发明的消化液既能得到完整的类器官又能得到分散均一大小的细胞团，并且消化时间短、操作方便、效果稳定。
- 一种复合消化液及其制备方法应用
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