本发明提供了一种快速检测3型人腺病毒的含内参双重等温核酸扩增方法,属于等温核酸扩增技术领域。本发明首先通过对3型人腺病毒(HAdV‑3)基因测序和比对,设计了用于检测HAdV‑3的特异性引物对和探针,并设计了内参探针,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑4所示,在此基础上建立了含内参的双重等温核酸扩增体系,进一步构建了用于检测3型腺病毒的试剂盒。本发明方法在等温条件下进行,5‑20min内可实现同时对3型腺病毒和内参DNA的扩增,灵敏度高、特异性好、内参的加入排除了假阴性和无效结果,更适合应用于有大量样品的检测,便于临床上的应用,该方法适用于对3型腺病毒的快速检测。
本发明提供了一种快速检测7型腺病毒的含内参双重等温核酸扩增方法,属于等温核酸扩增技术领域。本发明首先通过对7型人腺病毒(HAdV‑7)基因测序和比对,设计了用于检测HAdV‑7的特异性引物对和探针,并设计了内参探针,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑4所示,在此基础上建立了含内参的双重等温核酸扩增体系,进一步构建了用于检测7型腺病毒的试剂盒。本发明方法在等温条件下进行,5‑20min内可实现同时对7型腺病毒和内参DNA的扩增,灵敏度高、特异性好、内参的加入排除了假阴性和无效结果,更适合应用于有大量样品的检测,便于临床上的应用,该方法适用于对7型腺病毒的快速检测。
本发明提供了一种快速检测呼吸道合胞病毒的含内参双重等温核酸扩增方法,属于等温核酸扩增技术领域。本发明首先通过对呼吸道合胞病毒(RSV)基因测序和比对,设计了用于检测RSV的特异性引物对和探针,并设计了内参探针,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑4所示,在此基础上建立了含内参的双重等温核酸扩增体系,进一步构建了用于检测呼吸道合胞病毒的试剂盒。本发明方法在等温条件下进行,5‑30min内可实现同时对呼吸道合胞病毒和内参DNA的扩增,灵敏度高、特异性好、内参的加入排除了假阴性和无效结果,更适合应用于有大量样品的检测,便于临床上的应用,该方法适用于对呼吸道合胞病毒的快速检测。
一种快速检测两种利什曼原虫的核酸检测试剂盒及其应用,其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明灵敏度与荧光定量PCR相当,均远远高于病原学检测方法和血清学检测,整个反应时间在15‑20 min内完成,结果判定仅需通过荧光曲线的改变来判定;本发明特异性强,用多种寄生于相同部位的其他病原体阳性核酸进行检测,结果均为阴性,无交叉反应;该试剂盒中的反应单元为已加入引物探针的冻干粉,只需加入反应缓冲液重融后加入样本即可,操作简便,不需要额外加入引物探针;整个核酸扩增过程只需15min,与传统PCR方法相比,大大节约了时间。