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[发明专利]一种托法替布关键中间体的酶法制备方法-CN202210509632.5有效
发明人： 姚培圆;詹壮壮;徐泽菲;于珊珊;陈曦;冯进辉;吴洽庆;朱敦明 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2022-05-11 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N9/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种托法替布关键中间体的酶法制备方法。本发明公开的托法替布关键中间体的酶法制备方法采用蛋白质IR89催化完成，蛋白质IR89为序列表中序列1所示的蛋白质。实验证明，本发明可以利用蛋白质IR89催化1‑苄基‑4‑甲基哌啶‑3‑酮或其盐酸盐以及甲胺或其盐酸盐生成(3R，4R)‑1‑苄基‑N，4‑二甲基哌啶‑3‑胺二盐酸盐，产量为0.605g，收率83％，ee值97％。表明，本发明的IR89可以作为亚胺还原酶用于生产(3R，4R)‑1‑苄基‑N，4‑二甲基哌啶‑3‑胺二盐酸盐。
一种托法替布关键中间体法制方法

[发明专利]酶催化合成手性氨基醇化合物-CN202111382414.1有效
发明人： 姚培圆;胡娜;徐泽菲;冯进辉;吴洽庆;朱敦明;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2020-04-17 - 公布日： 2023-09-08 - 主分类号： C12N9/06 文献下载
摘要：本发明公布了生物催化剂催化α‑羟基酮与小分子胺反应生成光学纯手性氨基醇化合物的方法。更具体地，本发明提供了一种亚胺还原酶催化不同种类的α‑羟基酮与小分子胺还原胺化反应生成手性氨基醇的方法。本方法具有反应条件温和、立体选择性好、无污染等显著特点。
催化合成手性氨基醇化

[发明专利]苯甲醛裂解酶突变体及在制备1，4-二羟基-2-丁酮中的应用-CN202210766355.6有效
发明人：马延和;姚培圆;李宇;陈曦;冯进辉;吴洽庆;朱敦明 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2022-06-30 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明提供了一种苯甲醛裂解酶突变体及其在1，4‑二羟基‑2‑丁酮合成中的应用，具体地，所述苯甲醛裂解酶的野生型来源于Herbiconiux sp.SALV‑R1，经定点突变获得与酶催化活性相关的核心氨基酸发生突变的突变蛋白，其具有显著提高催化3‑羟基丙醛和甲醛的活性，转化底物的浓度可以到达700 mM。
甲醛裂解突变体制备羟基丁酮中的应用

[发明专利]亚胺还原酶突变体及其在合成手性四氢异喹啉中的应用-CN202310276871.5在审
发明人： 姚培圆;刘婷婷;徐泽菲;陈曦;冯进辉;于珊珊;吴洽庆;朱敦明 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2023-03-21 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： C12N9/06 文献下载
摘要：本公开涉及亚胺还原酶突变体及其在合成手性四氢异喹啉中的应用，属于分子生物学和酶工程领域。本公开涉及的亚胺还原酶突变体、编码前述突变体的多核苷酸、重组表达载体，能够表达亚胺还原酶突变体，用于构建表达亚胺还原酶突变体的重组细胞或重组菌株。本公开所提供的亚胺还原酶突变体可催化1‑杂环取代‑3，4‑二氢异喹啉类化合物生成(R)‑1‑杂环取代‑1,2,3,4‑四氢异喹啉化合物，尤其是提升了(R)‑1‑杂环取代‑1,2,3,4‑四氢异喹啉化合物的合成能力，解决了目前的合成方法存在的条件严苛、反应复杂、成本高的问题，具有广阔的应用前景。
亚胺还原酶突变体及其合成手性四氢异喹啉中的应用

[发明专利]转氨酶及其突变体在手性胺合成中的应用-CN202111269128.4在审
发明人：于珊珊;李键煚;姚培圆;冯进辉;吴洽庆;朱敦明 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2021-10-29 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明提供了转氨酶突变体及其在催化外消旋有机胺类及潜手性酮酸类化合物获得(S)‑有机胺及D‑氨基酸的应用，具体地，本发明提供了一种高效、高立体选择性合成(S)‑有机胺及D‑氨基酸的转氨酶突变体，所述的突变蛋白为非天然蛋白，且所述的突变蛋白具有催化外消旋有机胺类及潜手性酮酸类化合物合成(S)‑有机胺及D‑氨基酸的活性，并且所述突变蛋白在野生型的转氨酶的1个或1个以上的与酶催化活性相关的核心氨基酸发生突变。本发明的转氨酶突变体可以显著将转氨酶催化合成产物的活性及立体选择性提高。
转氨酶及其突变体手性合成中的应用

[发明专利]亚胺还原酶突变体及其应用-CN202111270046.1在审
发明人：李键煚;刘祥涛;徐泽菲;姚培圆;陈曦;冯进辉;吴洽庆;朱敦明;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2021-10-29 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N9/06 文献下载
摘要：本发明提供了一种亚胺还原酶突变体及其在(S)‑去甲烟碱合成中的应用，具体的，本发明对来源于Myxococcus fulvus的亚胺还原酶MfIR(WP_074958336.1)进行定向进化，获得酶活力及底物耐受提高的亚胺还原酶突变体，利用得到的突变体还原麦斯明从而制备高手性纯度的(S)‑去甲烟碱的方法，所述的Myxococcusfulvus来源的亚胺还原酶突变体活性高，反应底物浓度、反应产率以及产物的光学纯度高，反应过程中操作简单，能耗低，符合绿色化学要求，可应用于工业生产(S)‑去甲烟碱化合物的生物转化制备。
亚胺还原酶突变体及其应用

[发明专利]手性稠环四氢异喹啉类生物碱及其类似物的合成方法-CN202110408471.6有效
发明人： 姚培圆;杨林松;李键煚;徐泽菲;陈曦;冯进辉;吴洽庆;朱敦明 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2021-04-15 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12P41/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种亚胺还原酶及其在不对称还原制备光学纯手性稠环四氢异喹啉类化合物的应用，具体地，所述亚胺还原酶是来源于Myxococcus fulvus的氧化还原酶。所述的亚胺还原酶在温和的反应条件下实现10‑500mM稠环二氢异喹啉类底物的手性还原。本发明提供的亚胺还原酶底物谱宽，且对稠环二氢异喹啉具有较高的活性。
手性稠环四氢异喹啉生物碱及其类似物合成方法

[发明专利]一种1，4-二羟基-2-丁酮化合物的生物合成方法-CN202210766223.3在审
发明人：马延和;姚培圆;李宇;陈曦;冯进辉;吴洽庆;朱敦明 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2022-06-30 - 公布日： 2023-01-06 - 主分类号： C12P7/26 文献下载
摘要：本发明属于生物催化技术领域，公开1，4‑二羟基‑2‑丁酮化合物的生物合成方法，其是以苯甲醛裂解酶为催化剂，催化3‑羟基丙醛和甲醛羟甲基化反应生成1，4‑二羟基‑2‑丁酮。本发明的反应利用廉价、易得的醛为底物合成1，4‑二羟基‑2‑丁酮，提供了一条绿色、可持续的方法，具有重要的应用价值。
一种羟基丁酮化合物生物合成方法

[发明专利]3β-羟基甾体脱氢酶制备脱氢表雄酮（DHEA）-CN201711060017.6有效
发明人：崔云凤;姚培圆;陈曦;冯进辉;吴洽庆;朱敦明;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2017-11-01 - 公布日： 2022-07-05 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明涉及一种脱氢表雄酮新的制备方法，属于甾族化合物制备方法，其特征在于5‑AD为底物，利用3β‑羟基甾体脱氢酶对3‑位羰基进行还原，得到脱氢表雄酮(DHEA)。该方法利用羰基还原酶即3β‑羟基甾体脱氢酶作为催化剂，能够实现3位羰基高度的区域选择性和立体选择性还原。
羟基脱氢酶制备脱氢表雄酮 dhea

[发明专利]腈水解酶突变蛋白及其在催化合成(R)-3-取代-4-氰基丁酸类化合物中的应用-CN201910613354.6有效
发明人：于珊珊;姚培圆;冯进辉;吴洽庆;朱敦明;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2019-07-09 - 公布日： 2022-06-10 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明提供了一种腈水解酶突变体及其在催化3‑取代‑戊二腈类化合物合成(R)‑3‑取代‑4‑氰基丁酸中的应用，具体地，本发明提供了一种区域、立体选择性合成(R)‑3‑取代‑4‑氰基丁酸的腈水解酶突变体，所述的突变蛋白为非天然蛋白，且所述突变蛋白具有催化3‑取代‑戊二腈类化合物生成(R)‑3‑取代‑4‑氰基丁酸的活性，并且所述突变蛋白在野生型的腈水解酶的与酶催化活性相关的核心氨基酸发生突变。本发明的腈水解酶突变体可以显著将腈水解酶催化合成产物的构型翻转。
水解突变蛋白及其催化合成取代丁酸化合物中的应用

[发明专利]酶催化合成手性氨基醇化合物-CN202010303019.9有效
发明人： 姚培圆;胡娜;徐泽菲;冯进辉;吴洽庆;朱敦明;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2020-04-17 - 公布日： 2022-04-08 - 主分类号： C12N9/06 文献下载
摘要：本发明公布了生物催化剂催化α‑羟基酮与小分子胺反应生成光学纯手性氨基醇化合物的方法。更具体地，本发明提供了一种亚胺还原酶催化不同种类的α‑羟基酮与小分子胺还原胺化反应生成手性氨基醇的方法。本方法具有反应条件温和、立体选择性好、无污染等显著特点。
催化合成手性氨基醇化

[发明专利]腈水解酶突变体及其应用-CN201911189557.3有效
发明人：于珊珊;姚培圆;冯进辉;吴洽庆;朱敦明;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2019-11-28 - 公布日： 2022-04-05 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明提供了一种腈水解酶突变体及其在(R)‑3‑取代‑4‑氰基丁酸合成中的应用，具体地，本发明提供了一种提高催化合成(R)‑3‑取代‑4‑氰基丁酸活性的腈水解酶突变体，所述的突变蛋白为非天然蛋白，且所述突变蛋白具有显著提高催化3‑取代‑戊二腈类化合物生成(R)‑3‑取代‑4‑氰基丁酸的活性，并且所述突变蛋白在野生型的腈水解酶的两个或两个以上的与酶催化活性相关的核心氨基酸发生突变。本发明的腈水解酶突变体可以显著提高腈水解酶催化合成产物的产量。
水解突变体及其应用

[发明专利]微生物发酵生产谷内酯的方法、工程菌及应用-CN201711051707.5有效
发明人：冯进辉;陈曦;姚培圆;刘娜;张瑞;李雪梅;吴洽庆;朱敦明;马延和;张峥斌 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2017-10-31 - 公布日： 2022-03-11 - 主分类号： C12P7/26 文献下载
摘要：本发明提供了通过微生物发酵生产谷内酯的方法、谷内酯生产工程菌及应用。所述通过微生物发酵生产谷内酯的方法包括利用谷内酯生产菌由甾醇发酵生产谷内酯，其特征在于，所述谷内酯生产菌具有至少一种脂肪酸辅酶A/羧酸还原酶，该酶能够催化以下化合物I至II的反应i，并且所述方法包括抑制所述谷内酯生产菌中的至少一种所述脂肪酸辅酶A/羧酸还原酶的活性和/或表达量，所述反应为：其中，“—X”为羟基或羰基；“—Y”为羟基或“—SCoA”。本发明可提高谷内酯发酵生产时的底物转化率，减少或阻断副产物的生成，使产物易于分离纯化，降低生产成本。
微生物发酵生产内酯方法工程应用

[发明专利]一种3-甾酮-Δ1-CN202111095415.8有效
发明人：张瑞;王玉;冯进辉;陈曦;姚培圆;吴洽庆;朱敦明;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2021-09-17 - 公布日： 2021-12-10 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明提供一种3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶及其编码基因和应用，提供了含有其基因的表达载体和含有该表达载体的基因工程重组菌株。本发明提供的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶为一种新的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶，该酶具有宽广的底物谱，对大多数3‑酮基甾体化合物具有高的活性。本发明提供的重组菌株可用于转化3‑酮基甾体化合物，以高底物投料浓度，获得高收率的目标产物，无副产物，转化率不低于94％，而且转化时间短，所用生物催化剂用量少，制备方法简单方便、条件温和、环境友好，具有很好的产业化前景。
一种甾酮 base sup

[发明专利]一种苏沃雷生关键中间体的酶法制备方法-CN201810217737.7有效
发明人： 姚培圆;徐泽菲;于珊珊;吴洽庆;朱敦明 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2018-03-16 - 公布日： 2021-11-23 - 主分类号： C12P17/16 文献下载
摘要：本发明公开了来源于Streptomyces thermolilacinus的亚胺还原酶StIR(WP_023587323.1)或Kribbella catacumbae的亚胺还原酶KcIR(WP_020388085.1)或Streptomyces iranensis的亚胺还原酶SiIR(WP_044567941.1)或Leishmania major strain Friedlin的亚胺还原酶LmIR(CAJ03998.1)或Methylocaldum szegediense的亚胺还原酶MsIR(WP_026609689.1)或Microbulbifer的亚胺还原酶MbIR(WP_067084177.1)，并利用该亚胺还原酶作为生物催化剂制备抗失眠药苏沃雷生中间体5‑氯‑2‑((R)‑5‑甲基‑[1,4]二氮杂环庚‑1‑基)苯并恶唑。以相应亚胺还原酶可催化5‑100g/L的底物，转化率大于99％，本方法具有反应条件温和、无污染和工艺路线简单等显著特点，有较大的工业应用前景。
一种苏沃雷生关键中间体法制方法

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