本发明提供一种康乃馨DcU6启动子在CRISPR/Cas9基因编辑系统中的应用以及基因编辑方法。本发明第一方面提供一种康乃馨DcU6启动子在CRISPR/Cas9基因编辑系统中的应用,所述康乃馨DcU6启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑2所示。本发明使用康乃馨DcU6启动子提高CRISPR/Cas9基因编辑系统的编辑效率,可用于康乃馨CRISPR/Cas9基因编辑系统,并驱动sgRNA的高效表达,对实现康乃馨的育种具有重要意义。
本发明提供一种用于提高青蒿中青蒿素含量的植物表达载体、重组转化子、青蒿及其应用。本发明第一方面提供一种植物表达载体,所述植物表达载体包括编码转录因子AabHLH39的基因,编码所述转录因子AabHLH39的基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明通过构建包含编码转录因子AabHLH39的基因的植物表达载体,并将其转化青蒿内,使青蒿过表达转录因子AabHLH39,以提高青蒿中青蒿素的含量。
本发明提供一种转基因青蒿以及提高青蒿中青蒿素含量的方法。本发明第一方面提供一种转基因青蒿,所述转基因青蒿能够表达ADS、CYP71AV1、DBR2、ALDH1、MsGSW2基因,所述ADS、CYP71AV1、DBR2、ALDH1、MsGSW2基因分别具有如SEQ ID NO.1‑4、6所示的核苷酸序列。本发明通过多基因组装技术,获得了转基因青蒿,能够有效提高青蒿腺毛密度以及青蒿素含量,为规模化生产青蒿素提供了一种理想方法。
本发明公开了一种青蒿TCP类转录因子AaTCP15及其应用,涉及基因工程技术领域,所述转录因子AaTCP15的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提供的青蒿TCP类转录因子AaTCP15,能够激活青蒿素生物合成关键酶基因DBR2和ALDH1的启动子,正向调控DBR2和ALDH1基因的表达,从而促进青蒿素的生物合成;并利用转基因技术将青蒿转录因子AaTCP15的过量表达载体或反义干扰载体转化青蒿,实现了对植株中青蒿素含量增高或降低的调控。本发明提供的转录因子AaTCP15及其应用对于青蒿中青蒿素含量的提高及青蒿的品质改良、培育高含量青蒿素新品种、青蒿素的规模化生产具有重要意义。
本申请公开了一种启动子,其特征在于,包括甲基茉莉酸响应顺式作用元件、光响应顺式作用元件、35S启动子和5’UTR区域,所述甲基茉莉酸响应顺式作用元件和光响应顺式作用元件位于所述35S启动子序列的5’端,所述5’UTR区域位于所述35S启动子序列的3’端,所述35S启动子的序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明涉及了一种植物生物技术领域的青蒿MYB类转录因子AaMYB15及其应用。所述转录因子AaMYB15的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明转录因子AaMYB15可用于抑制青蒿素生物合成途径中关键酶基因ADS、CYP71AV1、DBR2和ALDH1启动子的活性,负向调控对应基因的表达,从而抑制青蒿素的生物合成;既可显著降低转基因的青蒿素含量又可以显著提高转基因青蒿的青蒿素含量,且不会对植物生长发育造成危害。本发明中AaMYB15转录因子可通过反义干扰表达的方法应用于青蒿素产量的提高,对于青蒿的基因工程育种和青蒿素的规模化生产具有重要意义。
本发明涉及了一种植物生物技术领域的青蒿MYB类转录因子AaMYB108及其应用。所述转录因子AaMYB108的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明转录因子AaMYB108可用于激活青蒿素生物合成途径中关键酶基因CYP71A V1启动子的活性,正调控青蒿素合成关键酶基因的表达,从而促进青蒿素的生物合成,且不会对植物生长发育造成危害与非转基因野生型青蒿相比,生长状态无差别。本发明中AaMYB108转录因子可通过过量表达的方法应用于青蒿素产量的提高,对于青蒿的基因工程育种和青蒿素的规模化生产具有重要意义。
本发明公开了一种调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子及其应用,涉及基因工程技术领域,所述启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;本发明还提供了该启动子的制备方法,含有该启动子的载体和表达盒。本发明提供的启动子能引导报告基因在植物非分泌型腺毛中特异表达,对利用植物非分泌型腺毛组织表达和生产代谢产物的基因工程育种具有重要意义。