本发明公开了一种可用于检测与甲基苯丙胺成瘾相关的GABRB1基因甲基化水平的试剂盒及其应用,该试剂盒包括一对GABRB1基因甲基化特异性扩增引物及甲基化特异性测序引物,其中所述的甲基化特异性扩增引物的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,甲基化特异性测序引物如SEQ ID NO.3所示;该试剂盒检测到的GABRB1基因中的CG1位点和CG2位点的甲基化水平用来联合诊断甲基苯丙胺成瘾,检测灵敏度高,特异性强;同时以GABRB1基因甲基化为靶点的药物有望成为甲基苯丙胺成瘾辅助诊断、检测和筛选的一种新手段。