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[发明专利]高通量CRISPR基因编辑工具载体构建方法-CN202111126765.6在审
发明人：杨延辉;林源;田静;何龙;杨林;王大军;杨丽;唐静;李晓雨;马凯;杨玉玛;刘河涛 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2021-09-19 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种高通量CRISPR基因编辑工具载体构建方法，包括如下步骤：S1、引物设计及合成；S2、引物退火；S3、sgRNA重组质粒构建；S4、转化得到24份2μl的混合物；S5、筛选单克隆；S6、质粒提取及测序。该方法优化了重组质粒的构建步骤和转化实验的孵育步骤，同时缩短了质粒构建和转化实验的时间提高了转化效率和阳性率，减少了实验成本，在筛选单克隆过程中替换了传统的涂布棒法，为最终实现自动化、高通量sgRNA载体构建奠定了基础；解决了酶切和连接的矛盾，将不可能统一的体系实现了统一，该方法不仅能够应用于基因编辑sgRNA的构建，还可以应用于载体构建的无缝克隆技术。
通量 crispr 基因编辑工具载体构建方法

[发明专利]一种生物合成Hispidin的方法-CN201810618147.5有效
发明人：吴秀丽;刘成;过金晶;张彩芳;陈靖;张新慧;刘河涛;王洒 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2018-06-15 - 公布日： 2021-08-27 - 主分类号： C12P17/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种生物合成Hispidin的方法。本发明提供了一种生物合成Hispidin的方法，包括如下步骤：以火木层孔菌培养液的上清液作为生物合成体系，在所述生物合成体系中加入4‑羟基‑6‑甲基‑2‑吡喃酮或4‑羟基‑6‑甲基‑2‑吡喃酮和3,4‑二羟基苯甲醛进行反应，即得到Hispidin。本发明提供的hispidin的生物合成方法，污染少，得率高，得到最大产量的hispidin，浓度为25.86mg/L。
一种生物合成 hispidin 方法

[发明专利]一株链格孢菌及其在拮抗马铃薯环腐病致病菌中的应用-CN201811273977.5有效
发明人：吴秀丽;刘成;钟翙依;刘河涛;王洒 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2018-10-30 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一株链格孢菌及其在拮抗马铃薯环腐病致病菌中的应用。本发明提供了链格孢SHM‑1，保藏登记号为CGMCC No.15984。本发明还保护一种提取物的制备方法，包括如下步骤：(1)培养链格孢SHM‑1；(2)收集滤液，进行浓缩，得到浓缩液；(3)有机相萃取，收集有机相；(4)减压蒸馏，得到提取物。所述方法制备得到的提取物也属于本发明的保护范围。本发明还保护链格孢SHM‑1在制备细菌性植物病害的病原菌的拮抗剂中的应用。本发明还保护所述提取物的应用，为如下(a)或(b)：(a)制备细菌性植物病害的病原菌的拮抗剂；(b)作为细菌性植物病害的病原菌的拮抗剂。本发明为防治马铃薯环腐病菌引起的病害提供了新的途径。
一株链格孢菌及其拮抗马铃薯环腐病致病菌中的应用

[发明专利]一株拟茎点霉菌株及其在对雷公藤红素进行生物转化中的应用-CN201910145490.7有效
发明人：刘成;吴秀丽;钟翙依;张彩芳;刘河涛;杨延辉;王洒 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2019-02-27 - 公布日： 2021-03-05 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一株拟茎点霉菌株及其在对雷公藤红素进行生物转化中的应用。本发明提供的拟茎点霉菌株，为拟茎点霉(Phomopsis sp.)LGT‑5，保藏登记号为CGMCC No.16088。本发明还保护拟茎点霉LGT‑5在制备式(Ⅲ)所示化合物中的应用。拟茎点霉LGT‑5可以将雷公藤红素转化成新化合物16‑OH‑Celastrol。与雷公藤红素相比，16‑OH‑Celastrol的抗菌活性无显著差异，但细胞毒性大幅度降低，可以作为新型抑菌药物。
一株拟茎点霉菌及其雷公藤进行生物转化中的应用

[发明专利]IMB-NY类化合物在制备抗结核分枝杆菌药物中的应用-CN201610343082.9有效
发明人：杨延辉;肖春玲;刘河涛;刘忆霜;蒙建州;鲁众阳;田静;杨志伟;杨玉荣;王浩;王大军;摆茹;梁锦屏 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2016-05-23 - 公布日： 2020-06-26 - 主分类号： A61K31/437 文献下载
摘要：本发明公开了一种IMB‑NY类化合物在制备抗结核分枝杆菌药物中的应用，所述IMB‑NY类化合物包括IMB‑NY1和IMB‑NY2，本发明还公开了一种含有MTB IspD抑制剂的先导化合物的筛选方法以及一种用于MTB IspD抑制剂表达的ZYM‑5052液体培养基；本发明联合应用高通量表型筛选模型和结核分枝杆菌Rv3582c酶抑制剂筛选模型，从70000多个不同来源的化合物中筛选得到酶抑制剂IMB‑NY1和IMB‑NY2；通过对IMB‑NY1和IMB‑NY2的抗结核活性评价，确认该化合物具有明确的抗结核杆分枝菌活性。
imb ny 化合物制备结核分枝杆菌药物中的应用

[发明专利]一种新化合物及其在制备细菌抑制剂中的应用-CN201910145752.X有效
发明人：吴秀丽;刘成;张彩芳;周丽;刘河涛;王洒 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2019-02-27 - 公布日： 2020-05-19 - 主分类号： C07J63/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种新化合物及其在制备细菌抑制剂中的应用。本发明提供的化合物即式(Ⅲ)所示的化合物。式(Ⅲ)所示的化合物在制备细菌抑制剂中的应用也属于本发明的保护范围。与雷公藤红素相比，16‑OH‑Celastrol的抗菌活性无显著差异，但细胞毒性大幅度降低，可以作为新型抑菌药物。
一种化合物及其制备细菌抑制剂中的应用

[发明专利]苦豆碱在制备治疗缺血性脑卒中的药物的用途-CN201410733517.1有效
发明人：余建强;马宁田;周茹;李玉香;郝银菊;李男;杨文莉;刘河涛 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2014-12-04 - 公布日： 2018-03-06 - 主分类号： A61K31/4748 文献下载
摘要：本发明公开了苦豆碱（aloperine，ALO）作为治疗缺血性脑卒中药物的用途，通过建立氧糖剥夺模型从而探究苦豆碱对氧糖剥夺后的新生大鼠脑缺血的保护作用及可能的机制，本发明的实验结果表明在氧糖剥夺再灌注之后，它降低了细胞内的活性氧，丙二醛含量，增加了过氧化氢酶、过氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶三种抗氧化物酶的含量，提高了总抗氧化能力；除此之外，苦豆碱可以稳定线粒体膜电位，降低海马神经元的凋亡率以及钙离子浓度，说明苦豆碱的保护作用可能与抗氧化有关，这些结果证明苦豆碱对缺血性损伤有保护作用。
苦豆碱作为治疗缺血性脑卒中药物用途

[发明专利]一种桑黄素D的制备方法-CN201510291698.1在审
发明人：吴秀丽;陈靖;汪静;刘成;余建强;付雪艳;张新慧;高晓娟;赵云生;刘河涛 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2015-06-01 - 公布日： 2015-10-21 - 主分类号： C12P17/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种桑黄素D的制备方法，利用火木层孔菌制备菌丝悬液，加入到亚硝酸钠溶液和醋酸缓冲液的混合液中进行诱变，将诱变液在固体培养基上培养，挑取优势菌株种至液体发酵培养基中，收集发酵液，经过滤后水洗、95％乙醇洗脱并收集醇提部分，旋蒸、干燥既得。本发明方法操作简单，副产物少，为桑黄素D的工业化生产奠定了基础。
一种黄素制备方法

[发明专利]龙胆苦苷作为治疗神经病理性疼痛药物的用途-CN201510191858.5在审
发明人：余建强;刘宁;李玉香;姚晚霞;汪静;马琳;杜娟;刘河涛 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2015-04-22 - 公布日： 2015-08-26 - 主分类号： A61K31/7048 文献下载
摘要：本发明公开了龙胆苦苷（Gentiopicroside，Gent）作为治疗神经病理性疼痛药物的用途。实验结果表明龙胆苦苷在安全剂量范围内使用时，剂量为100mg/kg时呈一定的剂量-药效相关性，可以显著改善小鼠慢性缩窄性损伤模型的疼痛行为、电生理活动的改变，并恢复小鼠损伤后运动及协调能力的下降，说明龙胆苦苷具有治疗神经病理性疼痛、改善其电生理活动及修复受损神经的作用。
龙胆作为治疗神经病理性疼痛药物用途

[发明专利]苦参碱治疗缺血性脑卒中药物的用途-CN201510181990.8在审
发明人：余建强;赵鹏;周茹;李玉香;郝银菊;李南;杨文莉;刘河涛 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2015-04-17 - 公布日： 2015-07-29 - 主分类号： A61K31/4375 文献下载
摘要：本发明公开了苦参碱（Matrine，Mat）作为治疗缺血性脑卒中药物的用途。实验结果表明苦参碱在安全剂量范围内使用时，剂量为30mg/kg体重时呈一定的剂量-药效相关性，可以降低缺血区域脑梗死体积以及海马神经元凋亡率，显著改善小鼠局灶性脑缺血模型自主神经功能障碍，减轻脑组织病理损伤，提高脑组织中抗氧化酶活性，降低丙二醛含量。说明苦参碱具有预防缺血性脑卒中发生、降低脑卒中致残致死和促进神经功能恢复的作用。
苦参治疗缺血性脑卒中药物用途

[发明专利]氧化苦参碱治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物的用途-CN201510128920.6在审
发明人：余建强;赵鹏;周茹;郑婕;李玉香;吴璟;乔海琦;刘河涛 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2015-03-24 - 公布日： 2015-07-01 - 主分类号： A61K31/4375 文献下载
摘要：本发明公开了氧化苦参碱作为治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤药物的用途。实验结果表明氧化苦参碱在安全剂量范围内使用时呈一定的剂量-药效相关性，当剂量为120mg/kg体重时可以降低缺血区域脑梗死体积以及神经元凋亡率，减轻脑组织病理损伤，提高脑组织中抗氧化酶活性，降低丙二醛含量。说明氧化苦参碱具有预防新生儿缺氧缺血性脑损伤后致伤亡和促进神经功能恢复的作用。
氧化苦参治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物用途

[发明专利]甘草甜素在制备治疗炎性痛药物中的应用-CN201510129100.9在审
发明人：余建强;王红玲;李玉香;马琳;杜娟;刘河涛;汪静;姚晚霞 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2015-03-24 - 公布日： 2015-06-10 - 主分类号： A61K31/704 文献下载
摘要：本发明公开了甘草甜素在制备治疗炎性痛药物中的应用。发明人通过实验发现甘草甜素对角叉菜胶模型炎症足中COX-2蛋白含量和TNF-α、IL-6及iNOS mRNA含量有影响，进而确认了甘草甜素在抗炎性痛方面的药理作用：其能显著地降低角叉菜胶诱导的足水肿，并减少肿胀足中COX-2蛋白含量、TNF-α、IL-6和iNOS mRNA的含量。甘草甜素是通过外周产生镇痛作用的，而非通过中枢产生镇痛，具有显著的抗炎性疼痛的药理作用。实验进一步证明甘草甜素可显著降低醋酸引起的小鼠扭体反应，具有很好的镇痛作用，此外不影响小鼠的自主活动和运动协调性，甘草甜素作为活性成份用于制备炎性痛的治疗药物必然具有很好的疗效。
甘草制备治疗炎性痛药物中的应用

[发明专利]苦豆碱作为治疗炎性痛药物的用途-CN201410734552.5在审
发明人：余建强;杨洋;李玉香;姚晚霞;杜娟;刘河涛;汪静;马琳 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2014-12-04 - 公布日： 2015-04-08 - 主分类号： A61K31/4748 文献下载
摘要：本发明公开了苦豆碱（aloperine，ALO）作为治疗炎性痛药物的用途。实验表明苦豆碱无副作用不影响小鼠的自主活动和运动协调性；能显著降低醋酸引起的小鼠扭体反应，具有很好的镇痛作用；热板实验，热甩尾实验以及福尔马林实验Ⅰ相表明其镇痛活性并不是通过中枢作用产生；福尔马林实验Ⅱ相中，苦豆碱也显示了良好的镇痛活性，进一步证实其对炎性疼痛的显著效果；耳肿胀试验证实了其抗炎作用；在角叉菜胶诱导的足肿胀模型中，苦豆碱显著地降低了角叉菜胶诱导的爪水肿，减少了肿胀足中促炎性细胞因子TNF-α，IL-1β和PGE2的含量，增加了抗炎细胞因子IL-10的产生，通过调节细胞因子的平衡从而实现抗炎性疼痛的药理作用。
苦豆碱作为治疗炎性痛药物用途

[发明专利]野靛碱作为治疗缺血性脑卒中药物的用途-CN201410733516.7在审
发明人：余建强;王永胜;周茹;李玉香;郑婕;吴璟;乔海琦;刘河涛 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2014-12-04 - 公布日： 2015-04-01 - 主分类号： A61K31/439 文献下载
摘要：本发明公开了野靛碱（Cytisine，CYT）作为治疗缺血性脑卒中药物的用途。本发明的实验结果表明野靛碱在安全剂量范围内使用时，剂量为1mg/kg时可以显著改善小鼠局灶性脑缺血模型自主神经功能障碍，降低缺血区域脑梗死体积以及缺血核心区与半暗带细胞凋亡率，并且呈一定的剂量-药效相关性，说明野靛碱具有预防局灶性缺血性脑卒中发生、降低脑卒中后致死致残和促进神经功能恢复的作用。
野靛碱作为治疗缺血性脑卒中药物用途

[发明专利]一株诱变得到的高产稳定产凝乳酶的枯草芽孢杆菌及应用-CN200910302236.X有效
发明人：李红玉;李洋;刘河涛 -专利权人：李红玉;兰州大学
申请日： 2009-05-12 - 公布日： 2010-03-10 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一株诱变得到的高产稳定产凝乳酶的枯草芽孢杆菌及应用。发明所用出发菌株是本实验室筛选所得的用于发酵产生干酪等产品的枯草芽孢杆菌，于2008年2月保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，其保藏名为枯草芽孢杆菌QL-2(Bacillus subtilis QL2)，保藏号M208023。其诱变选育步骤包括：以保存于CCTCC、菌种保藏号M208023的枯草芽孢杆菌QL-2作为出发菌株，依次于复壮培养基、发酵培养基上培养，得到出发菌株悬液；将菌悬液用涡旋装置制成单孢子悬液后；再将此单孢子悬液进行多次紫外诱变和培养，最后得到可稳定高产凝乳酶的枯草芽孢杆菌YB-3(Bacillus subtilis YB-3，CCTCC NO：M209075)。该可稳定高产凝乳酶的枯草芽孢杆菌可用于液体发酵制备凝乳酶粗酶液，这些凝乳酶粗酶液可用制备奶酪和干酪素，缩短牛奶凝固时间。
诱变得到高产稳定凝乳枯草芽孢杆菌应用

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