本发明涉及酶催化技术领域,尤其是一种耐热性增强的谷胱甘肽合成酶及应用,所述谷胱甘肽合成酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。使用时,反应体系pH7.0,含有硫酸镁、六偏磷酸钠、甘氨酸及谷氨酸钠、L‑半胱氨酸盐酸盐、AMP钠盐,加入谷胱甘肽合成酶的粗酶液及耐热型多聚磷酸激酶,30~45℃反应。该谷胱甘肽合成酶与野生型谷胱甘肽合成酶相比,可应用于高温催化NADH,表现出更强的热稳定性。
本发明涉及酶催化技术领域,尤其是一种谷胱甘肽的制备工艺,其工艺为:反应体系pH7.0~9.5,含有硫酸镁、六偏磷酸钠、甘氨酸及谷氨酸钠、L‑半胱氨酸盐酸盐、AMP钠盐,加入谷胱甘肽合成酶的粗酶液及耐热型多聚磷酸激酶,30~45℃反应;所述谷胱甘肽合成酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明工艺不使用价格昂贵的乙酰磷酸、ATP等,本发明采用的谷胱甘肽合成酶与野生型谷胱甘肽合成酶相比,酶活高,保证了更高的L‑半胱氨酸转化率。
本发明涉及酶催化技术领域,尤其是一种烟酰胺核糖激酶突变体的应用,所述烟酰胺核糖激酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,在该烟酰胺核糖激酶突变体存在下,可在45℃‑50℃高温条件下将烟酰胺核糖生成烟酰胺单核苷酸。本发明的烟酰胺核糖激酶突变体高温催化烟酰胺核糖生成烟酰胺单核苷酸,反应温度更高,可有效缩短反应时间,并有效灭活杂酶,减少产物的降解。
本发明涉及酶催化技术领域,尤其是一种烟酰胺核糖激酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,与野生型烟酰胺核糖激酶相比具有更高的催化活力及热稳定性。本发明的烟酰胺核糖激酶突变体在45℃‑50℃的活性更持久,能有效缩短反应周期;该突变体对反应的冷却系统要求不高,因而降低了能耗并降低了成本。而且可在室温下运输保存,有效延长保质期。另外,在高温催化反应的条件下,避免了杂菌的生长机会,从而减少了细菌的代谢产物对产品的污染,有助于增加底物的溶解度,提高单位体积的生产效率。