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[发明专利]一种提高细菌外膜囊泡产量的方法及其应用-CN202010258698.2有效
发明人：周明旭;张金秋;邓碧华;马芳;徐悦;卢宇;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2020-04-03 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明提供一种提高细菌外膜囊泡产量的方法及其应用，属于生物技术领域。该方法，包括培养敲除了yjeE基因的革兰氏阴性细菌突变株的步骤。本发明还提供所述方法制备的细菌外膜囊泡在制备疫苗和免疫增强剂中的应用。采用本发明方法，大肠杆菌外膜囊泡的产量达到701mg/L，较原始菌株在LB培养基中培养产量，提高了约100倍，可适用于制药工业大量生产外膜囊泡，显著降低了生产成本。采用本发明方法制备的细菌外膜囊泡，具有良好的免疫增强功能，可以添加到一般疫苗中，能够显著增强免疫效果。
一种提高细菌外膜囊泡产量方法及其应用

[发明专利]一种Toll样受体7激动剂纳米颗粒及其制备方法与应用-CN202211605006.2在审
发明人：秦竹;郑其升;史海健;陈瑾;张元鹏;侯立婷;于晓明;乔续稳;杜露平;李兰;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2022-12-14 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C07D473/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种Toll样受体7激动剂纳米颗粒，它是以硫辛酸与胺杂环化合物为原料先制成硫辛酸纳米颗粒，硫辛酸纳米颗粒再与结构如式Ⅰ所示的TLR7激动剂反应制得TLR7激动剂‑硫辛酸纳米颗粒。本发明TLR7激动剂‑硫辛酸纳米颗粒更易穿过淋巴管末梢，选择性进入引流淋巴结，最大程度的避免TLR7激动剂激活全身性的炎性因子、引发不良反应；纳米颗粒将TLR7激动剂靶向递送至淋巴结，可以调动抗原递呈细胞如DCs及巨噬细胞等，诱导更强烈的体液免疫和细胞免疫，发挥了对疫苗抗原的免疫增强效果。本发明还公开了Toll样受体7激动剂纳米颗粒作为兽用疫苗佐剂的应用。
一种 toll 受体激动剂纳米颗粒及其制备方法应用

[发明专利]一种提高靶向肠道DC的粘膜免疫增强剂、其制备方法及应用-CN202310080276.4在审
发明人：侯立婷;陈瑾;于晓明;郑其升;乔绪稳;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2023-02-08 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： A61K38/17 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高靶向肠道DC的粘膜免疫增强剂，所述提高靶向肠道DC的粘膜免疫增强剂含有0.01~1mg/mL的环二腺苷酸和0.4~2mg/mL的CTA‑CD154。利用环二腺苷酸和CTA‑CD154的协同增效作用，提高靶向肠道DC的能力，同时显著增强机体的粘膜免疫反应，可将肠道SIgA提高5倍以上。本发明还公开了所述的提高靶向肠道DC的粘膜免疫增强剂在灭活疫苗中的应用。其用于猪流行性腹泻灭活疫苗可将动物机体的血清中和抗体提高6倍以上。且制备方法简单，具有大规模推广应用价值。
一种提高靶向肠道 dc 粘膜免疫增强制备方法应用

[发明专利]一种高效的猪流行性腹泻病毒纯化方法-CN202211382194.7在审
发明人：李兰;郑其升;陈瑾;杨利;张浩明;张元鹏;程海卫;乔绪稳;侯立婷;于晓明;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2022-11-07 - 公布日： 2023-04-04 - 主分类号： C12N7/02 文献下载
摘要：本发明提供一种高效的猪流行性腹泻病毒纯化方法，涉及生物领域。该纯化方法，包括如下步骤：（1）在猪流行性腹泻病毒液中加入刀豆蛋白A和沉淀形成促进剂，混合作用；（2）离心，取沉淀；（3）于所述沉淀中加入解离液，解离，得到纯化后的病毒液。采用本发明方法纯化猪流行性腹泻病毒，除杂率超过90%，回收率超过90%，载量大且无需高价值设备。
一种高效流行性腹泻病毒纯化方法

[发明专利]一种兽用疫苗的皮内免疫增强剂及其应用-CN202211593479.5在审
发明人：于晓明;郑其升;陈瑾;侯立婷;乔绪稳;张元鹏;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2022-12-13 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： A61K39/39 文献下载
摘要：本发明提供一种兽用疫苗的皮内免疫增强剂及其应用，涉及生物制药领域。所述兽用疫苗的皮内免疫增强剂，是含有硫酸软骨素、壳寡糖、全反式维甲酸脂质体和环二鸟苷酸的水溶液。所述皮内免疫增强剂的制备方法如下：将硫酸软骨素、壳寡糖、全反式维甲酸脂质体和环二鸟苷酸溶于pH为7‑8的缓冲液，得到所述皮内免疫增强剂。本发明免疫增强剂制备方法简单，方便，成本低。采用本发明皮内免疫增强剂制备的猪流行性腹泻灭活疫苗，两次经皮内免疫怀孕母猪，皮肤注射部位无副反应，安全性高，极显著地提高了母猪乳汁中抗PEDV IgA抗体水平，能够更好地保护仔猪。
一种疫苗免疫增强及其应用

[发明专利]用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂及其应用-CN202010919910.5有效
发明人：于晓明;陈瑾;侯立婷;张元鹏;郑其升;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2020-09-04 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： A61K39/39 文献下载
摘要：本发明提供用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂及其应用，涉及到疫苗制造领域。该复合免疫增强剂，含有羧甲基茯苓多糖、透明质酸和α‑GC。本发明还提供所述复合免疫增强剂在猪伪狂犬灭活疫苗中的应用。本发明复合免疫增强剂，能够提高伪狂犬灭活疫苗免疫后的抗体水平，显著提高对近年流行的伪狂犬变异毒株的保护力。
用于狂犬疫苗复合免疫增强及其应用

[发明专利]非强启动式的外源基因表达法及其在具有毒性的目标蛋白表达中的应用-CN201810620594.4有效
发明人：冯磊;陈丽;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2018-06-15 - 公布日： 2022-11-29 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开一种非强启动式的外源基因表达法及其在CHO细胞中的应用该方法，通过定点整合的方式，将外源蛋白编码序列定点整合插入至宿主细胞自身基因的启动子下游，并利用宿主自身基因的启动子以及相关转录起始或翻译起始调控序列实现外源基因的转录、表达。利用宿主细胞自身的启动子以及调控机制，实现外源基因非强启动式的表达，从而避免由于外源毒性蛋白在宿主细胞强启动式表达造成的细胞死亡，和加速死亡，实现先增殖后表达，从而在宿主细胞生长后期获得大量毒性目标蛋白。填补了目前现有技术中的空白，为有关毒性蛋白基因工程技术的研究发展开拓了新的方向。
启动基因表达及其具有毒性目标蛋白中的应用

[发明专利]基于DC细胞的双功能纳米抗体及其构建方法和应用-CN202210477668.X在审
发明人：程海卫;侯立婷;杜露平;于晓明;乔绪稳;张元鹏;李兰;王义伟;张浩明;秦竹;杨利;陈瑾;郑其升;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2022-04-29 - 公布日： 2022-11-08 - 主分类号： C07K16/46 文献下载
摘要：本发明公开基于DC细胞的双功能纳米抗体及其构建方法和应用，所述双功能纳米抗体是以接头元件将基于DC细胞的目的蛋白特异性纳米抗体和编码粒径为150nm以下的病毒抗原特异性纳米抗体的基因连接后获得目的基因片段并重组表达获得的目的蛋白。本发明所采用的技术手段具备通用性，可以针对不同的病原筛选其特异性的纳米抗体，构建相应的猪DC靶向型双功能纳米抗体，即可扩展应用于其他猪用疫苗抗原，操作简单、高效、耗时短，且双功能纳米抗体在设计以及结构上较为明确，易于利用微生物基因工程系统高效生产，制造成本低，具有较好的稳定性。双功能纳米抗体与抗原经孵育后即可使用，简单易行，更加贴近兽医临床实际，便于推广普及。
基于 dc 细胞功能纳米抗体及其构建方法应用

[发明专利]一株补强胆固醇内源性合成的重构ST细胞及其构建方法和用途-CN201811482941.8有效
发明人：冯磊;宋伟;陈丽;恽君雯;曹兴林;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2018-12-05 - 公布日： 2022-08-23 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，特别是涉及细胞株的改造、构建领域，更为具体的说是涉及一株补强胆固醇内源性合成的重构ST细胞及其构建方法和用途。该细胞株于2018年11月7日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏编号为CGMCC NO.16694。本发明公开的补强胆固醇内源性合成的重构ST细胞株能够在无血清培养基培养条件下正常代谢生长。经实验，其与含有10％血清条件下正常培养的ST细胞胞内总胆固醇含量无显著性差异，这为无血清培养条件下相关病毒增殖奠定了基础。同时，以猪瘟病毒为例，该重构ST细胞的病毒增殖效价远高于非重构的原始ST细胞。
一株补强胆固醇内源合成 st 细胞及其构建方法用途

[发明专利]Ⅰ群4型禽腺病毒SD-F株、灭活疫苗及制备方法-CN202010772052.6有效
发明人：揭鸿英;于漾;毕志香;赵阳;朱亚露;何家惠;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2020-08-04 - 公布日： 2022-08-09 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明提供Ⅰ群4型禽腺病毒SD‑F株、灭活疫苗及制备方法，属于生物工程领域。Ⅰ群4型禽腺病毒SD‑F株，保藏编号：CCTCC NO：V201964。该禽腺病毒灭活疫苗的制备方法如下：将Ⅰ群4型禽腺病毒SD‑F株病毒液灭活，然后与吐温‑80混合，搅拌混匀，得到水相；将白油与司本‑80混合，搅拌均匀，灭菌后得到油相；将水相与油相按体积比为1:2‑4混合，乳化，即得灭活疫苗。本发明SD‑F株能够适应无致瘤性的DF‑1细胞，制备工艺简单，成本低，无致瘤风险，安全性较高；其灭活疫苗免疫保护率高，免疫后9天抗体阳性率达90%以上，免疫持续期达到6个月，且子代攻毒保护率为90%以上，攻毒保护率为100%。
型禽腺病毒 sd 疫苗制备方法

[发明专利]先天性免疫系统重构的BHK21细胞群及其细胞克隆增毒应用-CN201810613327.4有效
发明人：冯磊;陈丽;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2018-08-13 - 公布日： 2022-04-19 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种增强病毒增殖的方法，并构建了先天性免疫系统重构的BHK21细胞群，用于增殖病毒。本发明公开的方法为病毒增殖打开了新思路，扩大了BHK21细胞的应用范围，为能够防治病毒的疫苗的研制打下了坚实的基础。
先天性免疫系统 bhk21 细胞及其克隆应用

[发明专利]一种免疫增强剂、口蹄疫灭活疫苗及其制备方法-CN201710441094.X有效
发明人：陈瑾;于晓明;郑其升;侯立婷;王义伟;张元鹏;乔绪稳;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2017-06-13 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： A61K39/39 文献下载
摘要：本发明公开一种复方免疫增强剂及其应用。本发明涉及复方免疫增强剂的配制及其在猪口蹄疫疫苗中的应用。本发明以猪口蹄疫疫苗为研究主体，在此基础上，选择几种有明显免疫增强作用的免疫增强剂用于复方免疫增强剂，将抗原/疫苗和免疫增强剂混合后，制备疫苗免疫猪只，动物实验结果表明，本发明具有明显的免疫增强作用，含复方免疫增强剂的疫苗免疫一针后，可明显缩短抗体产生的窗口期，至7天；液相阻断ELISA抗体滴度有明显提高，抗体合格率明显提高；免疫保护期也有明显延长，至少可达7个月；且安全，未见明显的免疫副反应。
一种免疫增强口蹄疫疫苗及其制备方法

[发明专利]伪狂犬病病毒基因工程弱毒疫苗株及其应用-CN201811330929.5有效
发明人：王继春;刘娅梅;张传健;陈赛赛;乔永峰;呙明鹏;王志胜;许梦微;郑亚婷;郭容利;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2018-11-09 - 公布日： 2021-11-19 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明提供伪狂犬病病毒基因工程弱毒疫苗株及其应用，属于动物医学疫苗领域。所述疫苗株，是将伪狂犬病病毒Bartha K61株基因组中的gC基因替换为伪狂犬病病毒AH02LA株的gC基因、gD基因替换为伪狂犬病病毒AH02LA株的gD基因后获得的，所述伪狂犬病病毒AH02LA株的gC基因序列如SEQ ID No:1所示，所述伪狂犬病病毒AH02LA株的gD基因序列如SEQ ID No:2所示。本发明疫苗株能够很好的适应ST细胞，滴度高，安全性较高；以该疫苗株为有效成分的疫苗免疫后能够对免疫猪只提供100%保护，该疫苗不但能阻止发病，还能显著降低排毒率、大幅减少排毒量，排毒时间大大缩短。
狂犬病病毒基因工程疫苗及其应用

[实用新型]可进行真空梯度干燥的多用途真空干燥机-CN202120705552.8有效
发明人：吕芳;卢宇;侯继波;赵艳红;左晓昕;王军宁 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2021-04-08 - 公布日： 2021-11-12 - 主分类号： F26B5/06 文献下载
摘要：本实用新型公开了可进行真空梯度干燥的多用途真空干燥机，所述支架上固定设有多层制冷板，所述制冷板中空设置，且内部设有冷媒管，所述冷媒管呈S形排布，提高制冷均匀性，所述冷媒管两端贯穿制冷板两端且通过管道与制冷器相连接，所述真空计具体为皮拉尼真空计，两组所述真空计的测量范围分别为0Pa‑999Pa和1KPa‑100KPa，提高精准度，方便控制真空泵实现多段调节。本实用新型涉及干燥设备技术领域。使用皮拉尼真空计，测量范围广、精度高，与真空泵配合能实现多段真空调节，真空干燥舱内的真空量程可调节范围更广，通过控制系统，不仅可以实现传统的1000Pa‑0Pa冷冻真空干燥，还可以实现从100000Pa‑0Pa真空梯度干燥。
进行真空梯度干燥多用途干燥机

[发明专利]一种通用型H5亚型禽流感亚单位疫苗及其制备方法-CN201811509280.3有效
发明人：梅梅;陆吉虎;张雪花;冯磊;华涛;卢宇;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2018-12-11 - 公布日： 2021-09-24 - 主分类号： A61K39/145 文献下载
摘要：本发明提供一种通用型H5亚型禽流感亚单位疫苗及其制备方法，属于基因工程领域。该通用型H5亚型禽流感亚单位疫苗中抗原为氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的蛋白。本发明通用型H5亚型禽流感亚单位疫苗具有广谱性，能与H5亚型禽流感不同分支病毒阳性血清发生特异性反应，免疫效力试验表明该抗原安全、无不良反应，可诱导机体产生与商品苗相似的抗体水平，具有较好的免疫效果。
一种通用型 h5 禽流感单位疫苗及其制备方法

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