本发明公开基于反向遗传学构建的RSV反基因组质粒，所述RSV反基因组质粒为如序列表SEQ ID No.1所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cp、如序列表SEQ ID No.2所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cpts或如序列表SEQ ID No.3所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cptsΔSH。本发明构建的重组质粒经拯救获得的重组RSV病毒具有明显的减毒效果，可用于制备RSV减毒活疫苗。
本发明公开一种重组RSV反基因组质粒rRSV‑EGFP，其序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了由上述质粒经拯救获得的重组RSV以及其在筛选抗RSV药物中的应用。本发明筛选抗RSV药物的高通量筛选方法，包括：接种宿主细胞，加入重组RSV和待筛选药物；检测GFP荧光强度；评价待筛选药物的抗RSV效果。本发明利用表达绿色荧光蛋白的重组RSV与宿主细胞和待筛选化合物相互作用，由于绿色荧光蛋白的表达水平与病毒复制水平密切相关可以通过检查荧光强度分析化合物的抗病毒作用，进而建立针对RSV的高通量药物筛选模型，进行大规模的药物筛选，为抗RSV药物的研发奠定基础。
本发明公开一种重组腺病毒表达自组装呼吸道合胞病毒样颗粒，所述病毒样颗粒包含呼吸道合胞病毒F和M蛋白，所述F和M蛋白是密码子优化的F和M基因进行编码，F和M基因由2A序列连接，所述连接后的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。本发明还公开了上述呼吸道合胞病毒样颗粒的制备方法及在制备用于预防或治疗呼吸道合胞病毒感染疫苗或药物、呼吸道合胞病毒抗体和呼吸道合胞病毒的诊断试剂中的应用。本发明采用单一重组腺病毒为载体，建立了一种体内自组装表达呼吸道合胞病毒样颗粒的方法，重组腺病毒制备相对简单、显著降低成本，获得较好的免疫效果及免疫保护，并且提供了安全性。
