本发明提供了一种根据碱性磷酸酶热点结构域制备碱性磷酸酶的激活剂的方法，所述热点区域包括热点区域1和热点区域2；所述热点区域1由（R213，D214，F259，K260，P261，R262，Y263，K264，D284，Y285）组成，所述热点区域2由（K322，N323，P324，K325）组成。结合这两个热点区域的抗体能够激活碱性磷酸酶的活性，抗体包含抗体的重链区（VH）和/或轻链可变区（VL），所述VH包含：如SEQ ID NO:1所示的VH CDR1；如SEQ ID NO:2所示的VH CDR2；和/或，如SEQ ID NO:3所示的VH CDR3；所述VL包含：如SEQ ID NO:4所示的VL CDR1；如SEQ ID NO：5所示的VL CDR2；和/或，如SEQ ID NO:6所示的VL CDR3。本发明的蛋白质对碱性磷酸酶有强力的结合，能够增强碱性磷酸酶及其突变蛋白的催化活性。
本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种特异性结合GPC3蛋白的纳米抗体GN1；所述纳米抗体GN1由重链抗体的可变区组成；所述重链抗体的可变区包括抗原决定簇互补区和骨架区；所述骨架区选自由FR1、FR2、FR3和FR4及其同源序列组成的组，所述抗原决定簇互补区选自由CDR1、CDR2和CDR3及其同源序列组成的组；所述CDR1至CDR3的氨基酸序列具有如SEQ ID NO.1‑3所示的序列；所述FR1‑4的氨基酸序列具有如SEQ ID NO.4‑7所述的序列。该抗体氨基酸序列为SEQ ID NO.8，编码该氨基酸的核苷酸序列为SEQ ID NO.9。本发明的纳米抗体GN1能特异性结合高表达GPC3蛋白的肝癌细胞，抑制肝癌细胞增殖。纳米抗体GN1的氨基酸序列或纳米抗体GN1的核苷酸序列或包含其核苷酸序列的重组质粒或包含其核苷酸序列重组质粒的重组细胞均可应用于制备诊断试剂的研发和治疗肝癌的药物。
