本发明属于生物技术领域。本发明提供了一种PaDP蛋白，其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明提供的经过氨基酸位点的组合突变获得了一个活力和热稳定性提高的突变体，同时经过大肠杆菌杂酸途径的敲除进一步提高了蛋白的表达量。经过高密度发酵后的全细胞催化可以实现24h内酶解150g/L底物3‑异丁基戊二酰亚胺，且保持较高的光学纯度，可以很好的满足现在的工业化生产。
本申请提供一种咖啡酸‑O‑甲基转移酶突变体，该突变体是将野生型咖啡酸‑O‑甲基转移酶的氨基酸序列自N端起进行如下突变中的一种或多种：第314位缬氨酸突变为精氨酸；第160位丙氨酸突变为丝氨酸；第164位组氨酸突变为天冬酰胺；第22位苯丙氨酸突变为酪氨酸。其中的一种咖啡酸‑O‑甲基转移酶突变体在上述4个位点均有突变，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，其核酸序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。本申请还提供了包含有突变体基因的重组载体、重组菌、突变体的制备方法及突变体在生产阿魏酸中的应用。本申请提供的咖啡酸‑O‑甲基转移酶突变体可用于阿魏酸的生产，最好的一种突变体的酶活力是野生型咖啡酸‑O‑甲基转移酶的4.76倍，能够极大地提升阿魏酸的生产效率，降低生产成本。
本发明公开了nKCBP蛋白在调控豆科植物固氮能力中的应用。nKCBP蛋白的氨基酸序列是SEQ ID No.2所示。本发明的发明人利用CRISPR/Cas9技术定点编辑nKCBP基因，敲除了蒺藜苜蓿nKCBP基因，降低了株高和固氮能力。本发明对研究豆科植物高效固氮机制十分重要，为提高生物固氮效率提供了新思路。本发明对植物育种具有重大的应用价值。
本发明涉及一种人源化抗SARS‑CoV‑2单克隆抗体HUR33及其应用。HUR33人源化抗体包含如SEQ ID NO:1所示重链可变区包含的HCDR1，HCDR2和HCDR3，以及如SEQ ID NO:2所示轻链可变区包含的LCDR1，LCDR2和LCR3，优选还包含SEQ ID NO:17所示的重链FR1，SEQ ID NO:18所示的重链FR2，SEQ ID NO:19所示的重链FR3，SEQ ID NO:20所示的重链FR4，SEQ ID NO:21所示的轻链FR1，SEQ ID NO:22所示的轻链FR2，SEQ ID NO:23所示的轻链FR3和SEQ ID NO:24所示的轻链FR4，对SARS‑CoV‑2活病毒具有高中和活性。
