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[发明专利]一组EST-SSR引物信息及其在白及品系鉴别中的应用-CN201910364964.7有效
发明人：徐德林;陈红波;李林;邓宽平;上官艳妮;陈荣辉;陈江霞;张迪 -专利权人：遵义医科大学
申请日： 2019-04-30 - 公布日： 2023-03-31 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本方案公开了分子标记技术领域，一组EST‑SSR引物信息，共包括25对EST‑SSR引物及其序列信息，通过该组标记的应用，不仅能够将不同白及品系进行准确鉴别，同时还能对其遗传多样性信息进行解读，解释地域差异导致的遗传多样性。基于本发明的EST‑SSR引物信息和技术流程，可以实现其在白及品系鉴别、遗传多样性分析及分子标记育种辅助选择中的应用，且更具可靠性。
一组 est ssr 引物信息及其白及品系鉴别中的应用

[发明专利]一种悬浮培养白及细胞的方法-CN201811481695.4有效
发明人：徐德林;张社波;潘胤池;李林;冷昌尉;沈访;上官艳妮;刘厚伯 -专利权人：遵义医科大学
申请日： 2018-12-05 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本方案公开了中药材药物研究技术领域的一种悬浮培养白及细胞的方法，该方法中将白及种子诱导并继代后得到的愈伤组织作为外植体，接种到悬浮培养基中进行悬浮培养，悬浮培养基为MS+6‑苄氨基嘌呤1.5±0.45mg/L+2,4‑二氯苯氧乙酸2.5±0.5mg/L+30±20g/L蔗糖；悬浮培养基pH为5.9±0.1；外植体接种量与培养基的体积比例为1/80～1/20g/mL；接种后在转速为110±10r/min、温度为25±2℃的黑暗条件下进行40～50天振荡悬浮培养。本方案采用细胞组织悬浮培养的方法，将白及种子诱导并继代后的愈伤组织作为外植体进行悬浮培养，该方法不仅可以为细胞水平规模化培养白及，进一步为白及工业化生产和化学成分高效生物合成提供实验依据和理论基础。
一种悬浮培养白及细胞方法

[发明专利]一种促进白及悬浮培养细胞中次生代谢产物合成的方法-CN201910631140.1有效
发明人：徐德林;潘胤池;肖世基;李林;闻伟锷;上官艳妮;刘厚伯;黄恻隐;李梦竹 -专利权人：遵义医科大学
申请日： 2019-07-12 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本方案公开了植物细胞培养技术领域一种促进白及悬浮培养细胞中次生代谢产物合成的方法，精确称取白及愈伤组织，将其加入到MS+1.0mg/L 6‑BA+3.0mg/L 2,4‑D的液体培养基中，再向培养基中加入蔗糖进行悬浮培养；所述液体培养基的pH值为5.85～6.05，液体培养基的体积为21.74～40.13mL，白及愈伤组织的添加量为0.82～1.40g，液体培养基中蔗糖的浓度为28.77～38.32g/L，培养温度为20℃～25℃，培养环境为暗培养，悬浮培养的时间为30～40d。在本发明的培养条件下培养得到的白及悬浮培养细胞中，对羟基苯甲醇、dactylorhin A、militarine和coelonin的累积量均能够明显的增加。
一种促进白及悬浮培养细胞次生代谢产物合成方法

[发明专利]一种白及悬浮培养细胞中2;7-二羟基-4-甲氧基-9;10-二氢菲的定量检测方法-CN201910208640.4在审
发明人：徐德林;潘胤池;肖世基;李林;上官艳妮;刘厚伯;姚文柯 -专利权人：遵义医科大学
申请日： 2019-03-19 - 公布日： 2019-06-21 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本方案公开了本方案公开了中药材药物研究技术领域的一种白及悬浮培养细胞中2,7‑二羟基‑4‑甲氧基‑9,10‑二氢菲的定量测定方法，其中包括如下步骤：制备供试品溶液；制备对照品溶液；采用高效液相色谱法，分别对所述供试品溶液和对照品溶液进行检测，分别获得色谱图；依据对照品色谱图与供试品色谱图中各自的2,7‑二羟基‑4‑甲氧基‑9,10‑二氢菲峰面积，采用外标法计算所述待测白及悬浮培养细胞提取液中2,7‑二羟基‑4‑甲氧基‑9,10‑二氢菲的含量。本发明检测方法专属性强，准确稳定，重复性良好，采用该方法可以在细胞水平定量检测白及悬浮培养细胞中特定的9,10‑二氢菲类化学成分，为白及的进一步工业化高效生物合成该成分提供技术基础。
二氢菲白及悬浮培养细胞二羟基甲氧基对照品溶液定量检测高效液相色谱法制备供试品溶液对照品色谱图供试品色谱图供试品溶液定量测定高效生物技术基础细胞水平药物研究色谱图提取液外标法专属性检测制备中药材合成

[发明专利]一种白及愈伤组织的诱导培养方法-CN201910314198.3在审
发明人：徐德林;上官艳妮;李树刚;何毅怀;李林;潘胤池;刘厚伯;李杰 -专利权人：遵义医科大学
申请日： 2019-04-18 - 公布日： 2019-06-14 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及中药材药物研究技术领域，涉及一种愈伤组织培养方法，具体涉及一种白及愈伤组织的诱导培养方法，包括对白及种子的愈伤组织诱导培养和对愈伤组织的继代培养，所述愈伤组织诱导培养和所述继代培养均采用悬浮培养的方式，且均使用含有植物生长调节剂的MS液体培养基。植物生长调节剂为6‑苄氨基嘌呤、2,4‑二氯苯氧乙酸和萘乙酸。本发明可以易化对白及愈伤组织生长分化最佳条件进行研究的过程，减小毒性次生代谢产物对白及愈伤组织的影响，提供一个相对一致的白及愈伤组织细胞群体等。本发明可以应用到白及愈伤组织悬浮培养生产次生代谢产物的工业化生产中。
愈伤组织白及植物生长调节剂次生代谢产物愈伤组织诱导继代培养悬浮培养诱导培养二氯苯氧乙酸愈伤组织细胞苄氨基嘌呤药物研究最佳条件萘乙酸减小中药材分化生长群体应用生产研究

[发明专利]一种从白及中提取2;7-二羟基-4-甲氧基-9;10-二氢菲的方法-CN201910095717.1在审
发明人：徐德林;潘胤池;肖世基;李林;上官艳妮;刘厚伯;赵梓岐 -专利权人：遵义医学院
申请日： 2019-01-31 - 公布日： 2019-04-26 - 主分类号： C07C41/34 文献下载
摘要：本方案公开了中药材药物研究技术领域的一种从白及中提取2,7‑二羟基‑4‑甲氧基‑9,10‑二氢菲的方法。包括以下步骤：1)将白及粉末用甲醇回流提取2～4次，合并提取液减压浓缩得到甲醇浸膏；2)甲醇浸膏分散于水，用石油醚脱脂后再用乙酸乙酯萃取2～4次，减压浓缩后得到乙酸乙酯部位浸膏；3)乙酸乙酯部位浸膏上硅胶柱色谱，用石油醚‑乙酸乙酯以不同体积比进行梯度洗脱，结合TLC检测方法，分为若干个组分；4)将某个组分经中压硅胶柱色谱，用石油醚‑乙酸乙酯以不同体积比进行梯度洗脱，分为若干个亚组分；5)将某个亚组分过制备HPLC，用甲醇‑水45％～65％等度洗脱，得到2,7‑二羟基‑4‑甲氧基‑9,10‑二氢菲。
二氢菲二羟基白及乙酸乙酯部位甲醇浸膏梯度洗脱乙酸乙酯甲氧基石油醚体积比乙酸乙酯萃取硅胶柱色谱石油醚脱脂中压硅胶柱等度洗脱合并提取甲醇回流药物研究甲醇色谱制备中药材

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