[发明专利]可调控通用型CAR、CAR-T细胞及融合引导多肽

说明书

本发明提供一种用于治疗自身免疫性肾病的可调控通用型CAR、CAR‑T细胞及可变融合引导多肽。该可调控通用型CAR‑T细胞具有能特异性识别结合特定引导序列的嵌合抗原受体(CAR)，能够通过可变融合引导多肽来激活、引导和调控，从而精准靶向识别杀伤不同的自身反应性B细胞，实现治疗不同自身免疫性肾病的目的。

技术领域

本发明涉及免疫治疗技术领域，具体涉及一种用于治疗自身免疫性肾病的可调控通用型CAR、CAR-T细胞及融合引导多肽。

背景技术

自身免疫性肾病是自身免疫介导的肾脏损伤，是全球慢性肾病的主要原因。自身免疫性肾病实际上属于一类自身免疫性疾病，主要包括系统性自身免疫反应疾病在肾脏的表现和肾脏特异性的自身免疫性疾病；前者如狼疮性肾炎(LN)，后者如特发性膜性肾病(IMN)、IgA肾病(IgAN)、Goodpasture综合征等。自身抗体是许多自身免疫性肾病的标志，其中血液或肾脏中自身抗体的检测是诊断的关键。目前多种肾脏疾病中关键的自身抗体及其抗原已得到鉴定，如抗PLA2R、抗Gd-IgA1、抗dsDNA、抗ANCA和抗GBM抗体等。这些自身抗体会攻击肾脏组织，形成抗原抗体复合物在肾脏沉积并引起抗体介导的免疫反应，导致肾脏损伤。每一种自身抗体均由其对应的自身反应性B细胞克隆分泌。因此，可以说自身免疫性肾病与B细胞恶性肿瘤一样，本质上也属于一种B细胞疾病。

目前，针对自身免疫性肾病的治疗方案主要包括免疫抑制剂和激素类药物。不过，这些药物会带来全身性的免疫抑制效果，从而增加感染和癌症等严重并发症的风险。靶向B细胞的抗体类药物或细胞治疗方案是正在探索的方向之一。例如，抗CD20单抗(利妥昔单抗)可以与B细胞表面CD20分子结合后介导杀伤B细胞，其在治疗系统性红斑狼疮尤其是重症狼疮性肾炎中的临床效果十分明显。利妥昔单抗在治疗膜性肾病的同时，也可以明显减少患者体内抗PLA2R抗体的水平。利妥昔单抗还可用于ANCA相关性血管炎的治疗。不过，与B细胞恶性肿瘤不同，致病性的自身反应性B细胞克隆只占人体B细胞的极少一部分，对B细胞进行广泛的清除并不是最好的选择。

CAR-T细胞技术是近年来肿瘤治疗领域的突破性创新技术。该技术通过将识别肿瘤相关抗原的单链抗体(scFv)和胞内结构域(包括共刺激域及信号转导域)偶联形成嵌合抗原受体(CAR)，在体外通过基因转导的方法转染天然T细胞，形成表达CAR的T细胞(简称为CAR-T细胞)。CAR-T细胞能够以抗原依赖、非MHC限制的方式结合肿瘤抗原，启动并活化特异性杀伤携带肿瘤相关抗原的肿瘤细胞。

目前，用于自身反应B细胞的靶向识别和杀伤的CAR-T细胞已有研究。例如，专利文献CN108795876公开一种采用通用型CAR-T细胞联合融合多肽引导子治疗自身免疫性肾病的新方案，可以很方便的应对自身免疫性肾病患者自身反应性B细胞的异质性。但是，该专利中公开的通用型CAR-T细胞的嵌合抗原受体的单链抗体序列序列偏短，经分析发现其重链CDR3区可能存在缺失，这将影响CAR-T细胞识别特异性及结合能力，进而影响其在治疗自身免疫性肾病中的应用。

发明内容

基于此，本发明提供一种用于治疗自身免疫性肾病的可调控通用型CAR、CAR-T细胞及可变融合引导多肽。

本发明采用如下技术方案：

本发明提供一种编码抗引导多肽单链抗体(anti-GP scFv)的基因，其序列如SEQID NO:11或者SEQ ID NO:27所示。抗引导多肽单链抗体的序列如SEQ ID NO:12所示。