[发明专利]一种NELL1基因甲基化检测试剂及其应用

权利要求书

1.一种NELL1基因甲基化检测试剂，其特征在于，所述NELL1基因甲基化检测试剂包括：序列如SEQ ID NO：1所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：2所示的反向引物；和/或序列如SEQ ID NO：4所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：5所示的反向引物。

2.根据权利要求1所述的NELL1基因甲基化检测试剂，其特征在于，所述NELL1基因甲基化检测试剂还包括核苷酸序列如SEQ ID NO：3和/或SEQ ID NO：6所示的荧光探针序列。

3.根据权利要求1所述的NELL1基因甲基化检测试剂，其特征在于，所述NELL1基因甲基化检测试剂还包括内参基因的检测试剂；优选地，所述的内参基因为ACTB或GAPDH；更优选地，所述的内参基因的检测试剂含有针对内参基因的引物和探针。

4.根据权利要求1所述的NELL1基因甲基化检测试剂，其特征在于，所述NELL1基因甲基化检测试剂的检测样本选自宫颈癌组织、宫颈癌脱落细胞、血液、血清或血浆。

5.一种试剂盒，其特征在于，含有如权利要求1-4任一项所述的NELL1基因甲基化检测试剂。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性对照和阴性对照，所述阳性对照选自SiHa细胞株、Caski细胞株和ME-180细胞株的gDNA中的一种，所述阴性对照为C-33A细胞株的gDNA。

7.权利要求1-4任一项所述的NELL1基因甲基化检测试剂或权利要求5-6任一项所述的试剂盒在制备宫颈癌诊断试剂或试剂盒中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述宫颈癌诊断试剂或试剂盒用于检测NELL1基因经转化试剂修饰后的序列；优选地，所述转化试剂选自肼盐、重亚硫酸氢盐和亚硫酸氢盐中的一种或几种；优选地，转化试剂为重亚硫酸氢盐。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述宫颈癌诊断试剂或试剂盒所针对NELL1基因的检测区域为NELL1基因或者其启动子区域；优选地，所述NELL1基因甲基化检测试剂所针对NELL1基因的检测区域为如SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：11所示的序列。

10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述宫颈癌诊断试剂或试剂盒的使用方法包括以下步骤：

S1、将待测样品进行亚硫酸氢盐或重亚硫酸氢盐或肼盐处理，获得经修饰的待测样品；

S2、利用权利要求1-4任一项所述的NELL1基因甲基化检测试剂或权利要求5-6任一项所述的试剂盒对步骤S1经修饰的待测样品进行NELL1基因甲基化情况检测。