[发明专利]可视化引导建立小鼠或大鼠子宫灌注的方法

说明书

本发明提供可视化引导建立小鼠子宫灌注的方法，在将小鼠四肢固定后，将阴道扩张器放入小鼠阴道，到达子宫宫颈口，然后利用耳窥镜照明与摄像，当看到子宫宫颈口时，使用标定5mm界限的一次性侧开口牙科冲洗针进行插管探查，插管深度3‑5mm，利用针管侧开口插入方向，选择向左侧或右侧子宫进行子宫灌注。本发明通过具有照明与针孔摄像的仪器辅助可视化引导子宫插管，建立可视化小鼠或大鼠子宫灌注方法。本发明方法即使在插管较难的发情间期也可以成功完成子宫灌注，解剖验证表明可视化引导可以保证灌注的准确性。故本发明的可视化引导建立小鼠或大鼠子宫灌注的方法是一种可靠易行的子宫灌注方法，能够辅助各种疾病的小鼠模型建立。

技术领域

本发明涉及可视化引导建立小鼠或大鼠子宫灌注的方法。

背景技术

雌性小鼠子宫灌注(注射)常用于生殖系统及相关疾病的研究，如建立子宫内膜炎、子宫肿瘤及胚胎移植等模型。相较于经开腹手术的子宫体内注射方法，经阴道宫颈的子宫内插管与灌注方法避免了子宫注射时造成的子宫穿刺损伤、腹腔感染及开腹手术本身对试验的干扰，得到研究者的青睐。然而，小鼠子宫宫颈口小，子宫内膜薄弱，利用自制灌注器(针)等通过调整小鼠体位及操作人员手感进行盲插，在子宫插管与灌注过程中经常会出现针管插入受阻、插管深度不明确和不能确定灌注是否成功等情况。若反复盲插及强行灌注易出现阴道与子宫颈部损伤，甚至刺穿子宫壁，使灌注液进入腹腔，极大影响后续实验结果。因此建立可靠的小鼠子宫插管与灌注方法是成功开展相关试验研究的重要前提。

发明内容

为了减少因盲插而造成的机械损伤和子宫穿孔，提高小鼠子宫灌注的准确率与成功率，本发明提供了可视化引导建立小鼠或大鼠子宫灌注的方法。本实验通过可视化仪器辅助，建立了小鼠子宫灌注方法，验证未交配过的小鼠子宫颈紧张程度与情期相关，并通过灌注染液和解剖验证此方法的准确性。

本发明提供可视化引导建立小鼠子宫灌注的方法，在将小鼠四肢固定后，将阴道扩张器放入小鼠阴道，到达子宫宫颈口，然后利用耳窥镜照明与摄像，当看到子宫宫颈口时，使用标定5mm界限的一次性侧开口牙科冲洗针进行插管探查，插管深度3-5mm，利用针管侧开口插入方向，选择向左侧或右侧子宫进行子宫灌注。

作为优选，所述阴道扩张器的制备方法为：喇叭状的管材，尖端口径1.9-2.1mm，钝端口径5.9-6.1mm，管长1.5-2cm。

作为优选，所述灌注的体积为0.01-0.02mL/每侧子宫。

作为优选，所述一次性侧开口牙科冲洗针的规格为：23G×(50-70)MM。

作为优选，所述耳窥镜的镜头内径为3.0mm，焦距1.5～2cm。

本发明还提供可视化引导建立大鼠子宫灌注的方法，在将大鼠四肢固定后，将阴道扩张器放入大鼠阴道，到达子宫宫颈口，然后利用耳窥镜照明与摄像，当看到子宫宫颈口时，使用标定1、2、3cm界限的一次性侧开口牙科冲洗针进行插管探查，插管深度1～3cm，利用针管插入方向，选择插入左侧或右侧子宫角进行子宫灌注。

作为优选，所述阴道扩张器为：3mm径口的耳镜喇叭套。

作为优选，所述灌注的体积为0.1mL/每侧子宫。

作为优选，所述一次性侧开口牙科冲洗针的规格为：21G×70MM。

作为优选，所述耳窥镜的镜头内径为3.0mm，焦距1.5～2cm。

本发明通过具有照明与针孔摄像的仪器辅助可视化引导子宫插管，建立可视化小鼠或大鼠子宫灌注方法。经实验验证，小鼠子宫颈紧张程度与发情周期相关，插管通过难易程度存在差异。而通过可视化引导，即使在插管较难的发情间期也可以成功完成子宫灌注，解剖验证表明可视化引导可以保证灌注的准确性。故本发明的可视化引导建立小鼠或大鼠子宫灌注的方法是一种可靠易行的子宫灌注方法，能够辅助各种子宫损伤疾病的小鼠模型建立。

附图说明