[发明专利]一种生物膜材料及其制备方法与在修复神经中的应用

权利要求书

1.神经组织脱细胞支架，其由层粘连蛋白、聚多巴胺和脱细胞神经组织制得，其厚度为100μm～300μm，所述层粘连蛋白、聚多巴胺与脱细胞神经组织共价连接；

其制备方法，包括：

步骤1：脱除神经组织中的细胞，获得支架；

步骤2：将所述支架以含有N-羟基琥珀酰亚胺、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐和2-氨基苯磺酸的溶液活化后，获得活化的支架；

步骤3：将所述活化的支架与0.5～4mg/mL层粘连蛋白溶液混合、孵育，制得层粘连蛋白修饰的支架；

步骤4：所述层粘连蛋白修饰的支架与含有2～6mg/mL多巴胺的Tris溶液混合，经浸泡、超声震荡获得神经组织脱细胞支架。

2.根据权利要求1所述的神经组织脱细胞支架，其特征在于，所述脱细胞神经组织、聚多巴胺与层粘连蛋白的质量比为(70～90)：(2～6)：(5～20)。

3.权利要求1或2所述的神经组织脱细胞支架的制备方法，包括：

步骤1：脱除神经组织中的细胞，获得支架；

步骤2：将所述支架以含有N-羟基琥珀酰亚胺、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐和2-氨基苯磺酸的溶液活化后，获得活化的支架；

步骤3：将所述活化的支架与0.5～4mg/mL层粘连蛋白溶液混合、孵育，制得层粘连蛋白修饰的支架；

步骤4：所述层粘连蛋白修饰的支架与含有2～6mg/mL多巴胺的Tris溶液混合，经浸泡、超声震荡获得神经组织脱细胞支架。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤1中所述脱除神经组织中的细胞包括：将经反复冻融的神经组织依次用2wt％曲拉通X-100溶液漂洗2h、0.05wt％过氧乙酸溶液漂洗1h、10×PBS溶液漂洗至pH值中性，然后投入含有5wt％氯化钙的0.01mol/L盐酸溶液，经高速均质处理获得神经基质溶液，常温干燥获得支架。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述N-羟基琥珀酰亚胺的浓度为0.075～0.6mg/mL；N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐的浓度为0.25～2mg/mL；2-氨基苯磺酸的浓度为0.0125～0.05mol/L，所述活化的条件为37℃，15min。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述孵育的温度为37℃，6h。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述浸泡的条件为负压浸泡2～6h，所述超声振荡的条件为，37℃，频率1000～1500Hz，超声震荡30～60min。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述超声震荡后，还包括冷冻干燥、环氧乙烷灭菌的步骤。

9.根据权利要求3～8任一项所述的制备方法，其特征在于，所述神经组织为猪坐骨神经组织。

10.权利要求1或2所述神经组织脱细胞支架，或权利要求3～9任一项所述的制备方法制得的神经组织脱细胞支架，在制备促进神经修复的材料中的应用。