[发明专利]一种多头一体化核酸提取试管及方法

权利要求书

1.一种多头一体化核酸提取试管，该试管包括主管（1）；主管（1）内部腔体从上到下依次设置有裂解区（2）、洗涤区（4）和洗脱区（6）；裂解区（2）与洗涤区（4）以及洗涤区（4）与洗脱区（6）之间分别设置有疏水密封层分隔开，并在洗涤区（4）和洗脱区（6）内分别设置有磁珠洗涤液和核酸洗脱液；其特征在于，所述的主管（1）内部腔体还设置有由裂解区（2）延伸至洗脱区（6）的磁道（7），所述的磁道（7）一端封闭，另一端设置有供磁棒伸入的开口；洗脱区（6）内部腔体设置有多个隔板（61），多个隔板（61）在径向两端分别与洗脱区（6）腔体内壁和磁道（7）外壁相连接，从而将洗脱区（6）分隔为多个相互独立的支管（62）；两个相邻的隔板（61）相对分布，洗脱区（6）腔体内壁和磁道（7）外壁相对分布从而组成支管（62）四壁，洗脱区（6）底面与支管（62）四壁底端相连接形成支管（62）底面。

2.一种一体化核酸快提和检测装置，其特征在于，包括所述的一体化核酸提取试管和磁棒，磁棒外壁与磁道（7）内孔相配合。

3.根据权利要求1所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，主管（1）内部腔体设置有第一分隔塞（3）和第二分隔塞（5）；磁道（7）外壁与第一分隔塞（3）和第二分隔塞（5）之间都存在环形缝隙；疏水密封层分别位于第一分隔塞（3）和第二分隔塞（5）内并且将所在位置的主管（1）内部腔体填充密封。

4.根据权利要求3所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，疏水密封层为石蜡或者液相疏水层；第一分隔塞（3）和第二分隔塞（5）都为弹性材料。

5.根据权利要求1所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，支管（62）底端为相互独立的圆柱形状。

6.根据权利要求1所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，多个支管（62）沿着主管（1）中心呈圆周形状分布；磁道（7）轴向中心轴线与主管（1）轴向中心轴向重合。

7.根据权利要求3所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，第一分隔塞（3）包括第一塞体（31）、第一圆弧面（32）、第一棱柱面（33）和第一中心孔（34）；主管（1）内壁上端为圆弧形状，主管（1）内壁下端为六棱柱形状；第一圆弧面（32）为圆弧形状并且与主管（1）上端的圆弧内壁过盈配合，第一棱柱面（33）为六棱柱形状并且与主管（1）下端的六棱柱内壁过盈配合；第一中心孔（34）被磁道（7）贯穿并且与磁道（7）外壁之间的缝隙被疏水密封层填充密封。

8.根据权利要求3所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，第二分隔塞（5）包括第二塞体（51）、第二棱柱面（52）和第二中心孔（53）；主管（1）内壁还设置有第二台阶面（11）；水平方向的第二塞体（51）底面与水平方向的第二台阶面（11）相接触；第二棱柱面（52）与主管（1）下端的六棱柱内壁过盈配合，第二中心孔（53）被磁道（7）贯穿并且与磁道（7）外壁之间的缝隙被疏水密封层填充密封。

9.根据权利要求1所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，主管（1）顶端设置有管盖（18），管盖（18）通过内螺纹与主管（1）外壁的外螺纹相旋合；管盖（18）设置有竖直贯穿的定位孔（181），定位孔（181）与磁道（7）外壁相配合。

10.一种核酸提取方法，其特征在于，该方法采用权利要求1所述的一种多头一体化核酸提取试管，该方法包括以下的步骤：

（S1）先在裂解区（2）内预置裂解液和磁珠，将管盖（18）拧开后把待检测样本细胞添加至裂解区（2），样本细胞被裂解液裂解并释放出完整核酸并且与磁珠相互结合；或者直接将裂解后含有待检测样本细胞和磁珠的溶液添加至裂解区（2）；

（S2）将磁棒从磁道（7）开口插入裂解区（2）并且下移至洗涤区（4），磁棒吸引磁珠贴合磁道（7）外壁并且跟随磁棒穿过第一分隔塞（3）内的疏水密封层下移至洗涤区（4）；当疏水密封层为石蜡时，先对主管（1）加热使得石蜡热熔；

（S3）磁珠洗涤液除去与磁珠相结合的核酸中的蛋白质和无机盐等一些杂质后，磁棒带动磁珠继续下移穿过第二分隔塞（5）内热熔的疏水密封层至洗脱区（6）并且分别进入多个不同支管（62）内；

（S4）核酸洗脱液与洗涤后的磁珠相接触将磁珠上结合的核酸洗脱至不同支管（62）的核酸洗脱液中；

（S5）核酸在核酸洗脱液中进行PCR或等温扩增反应，并且核酸洗脱液中引入分子信标，使得外部设备通过荧光定量检测即可实时观察到PCR或等温扩增反应，并通过分析荧光值得到样品核酸的数量从而实现对样品核酸的检测；而后将不同支管（62）中洗脱磁珠后的核酸洗脱液的检测结果分别对比完成一体化核酸提取和检测过程。