[发明专利]一种布瓦西坦异构体及其中间体异构体的HPLC方法

说明书

本发明公开了一种布瓦西坦异构体及其中间体异构体的HPLC方法：称取布瓦西坦异构体，采用高效液相色谱仪，在容器中加入流动相，所述流动相包括体积百分比计91％：9％的A相和B相，其中，A相由水、乙腈、三氟乙酸以90:10:0.02体积比组成，B相为乙腈，样品和流动相的比例为10mg：10mL；先出峰的化合物为布瓦西坦SR构型，后出峰的为布瓦西坦SS构型。本发明能够利用反相色谱柱实现布瓦西坦异构体及其中间体异构体的分离，比起分离异构体常用的正相系统，此方法更低价、简便、分离效果良好；且能运用同一种方法同时监测BC01和BC02，完成对布瓦西坦的质量控制。

技术领域

本发明涉及一种布瓦西坦异构体及其中间体异构体的高效液相色谱分离方法，属于药物分析检测领域。

背景技术

布瓦西坦是由比利时优时比制药公司开发的第三代抗癫痫药物，商品名为化学名为(2S,4R)-2-(4-丙基吡咯烷-2-酮)-丁酰胺，化学分子式为C₁₁H₂₀N₂O₂。布瓦西坦是用于辅助治疗16岁患者及以上的部分性癫痫发作的突触小泡蛋白2A配体(SV2A)，通过调节突触囊泡胞外分泌功能来影响突触功能调节神经递质释放来发挥抗癫痫作用。

据原研公司的临床研究数据表明，布瓦西坦的抗惊厥能力比癫痫药物领域的第一品牌药物左乙拉西坦还强10倍，作为左乙拉西坦专利到期后的替代产品，有望成为抗癫痫药物市场上的领军者。

2-(4-丙基吡咯烷-2-酮)-丁酰胺有两个手性中心，有两组非对映异构体，其中一组是(2S,4R)-2-(4-丙基吡咯烷-2-酮)-丁酰胺(即布瓦西坦)和(2S,4S)-2-(4-丙基吡咯烷-2-酮)-丁酰胺(杂质C)；另外一组是(2R,4S)-2-(4-丙基吡咯烷-2-酮)-丁酰胺(杂质D)和(2R,4R)-2-(4-丙基吡咯烷-2-酮)-丁酰胺(杂质A)，但只有SR构型(即布瓦西坦)具有药理活性，结构式见表1。

表1

在合成布瓦西坦的初始阶段，引入的起始原料中有两个手性中心，其中一个手性中心(RR构型和RS构型所在的手性中心)是固定的，其构型不会发生改变，所以整个过程中这两个构型对合成布瓦西坦不会产生影响，所以只需分析最终成品(BC01)和中间体(BC02)中SS构型与SR构型的分离效果。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：现有技术中布瓦西坦产品中存在的非SR构型杂质，影响药品品质的技术问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种布瓦西坦异构体及其中间体异构体的HPLC方法：称取布瓦西坦异构体，采用高效液相色谱仪，在容器中加入流动相，所述流动相包括体积百分比计91％：9％的A相和B相，其中，A相由水、乙腈、三氟乙酸以体积比90:10:0.02组成，B相为乙腈，样品和流动相的比例为10mg：10mL，色谱分离条件为：

流动相流速为0.4-0.6mL/min；

色谱柱温度为35-45℃；

检测波长为205nm；

先出峰的化合物为布瓦西坦SR构型，后出峰的为布瓦西坦SS构型。

优选地，所述的色谱柱为Poroshell 120EC-C18 2.7μm×3mm×150mm即1000bar柱、Poroshell 120EC-C18 4μm×4.6mm×150mm柱或Kromasil 100-5-C185μm×4.6mm×150mm柱。

更优选地，所述的色谱柱为Poroshell 120EC-C18 2.7μm×3mm×150mm即1000bar柱。