[发明专利]一种Circ-COL6A3-6401抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

本发明属于基因工程抗体药物研制领域，涉及一种Circ‑COL6A3‑6401抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用，具体涉及了一种环状RNA Circ‑COL6A3‑6401核酸分子及其表达的蛋白Circ‑COL6A3‑20KD的抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。尤其是针对Circ‑COL6A3‑20KD设计了多克隆抗体Anti‑Circ‑COL6A3，其能够特异性的检测细胞内源性环状RNA Circ‑COL6A3编码的蛋白质的含量，同时可以显著抑制大肠癌细胞的侵袭迁移，该多克隆抗体在肿瘤的临床检测及侵袭迁移治疗中具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于基因工程抗体药物研制领域，涉及一种Circ-COL6A3-6401抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

近年来随着基因检测技术的完善及创新，非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)作为一种新型基因表达调控方式受到国内外广泛关注。环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类大量存在于真核细胞中，由特殊的可变剪切机制形成环形结构的非编码RNA分子(non-coding RNA，ncRNA)。与传统线性RNA不同，circRNA不受RNA外切酶影响，在各物种间具有高度保守性。虽然circRNA通常在低水平表达，但是其在机体多种病理生理过程中发挥着重要的作用。近期研究发现，circRNA表达异常与肿瘤的发生发展密切相关，例如，circRNA_102171通过与CTNNBIP1相互作用激活Wnt/β-catenin通路从而促进甲状腺癌的进展；在非肿瘤细胞中表达较高的circ-Foxo3，通过CDK2促细胞分裂的作用，阻碍细胞周期的进展；circRNA cSMARCA5通过充当miR-17-3p和miR-181b-5p的“海绵”促进肿瘤抑制因子TIMP3的表达，进而抑制肝癌细胞的增值和迁移。由于不含有大部分mRNA翻译所必需的5’帽结构，长期以来circRNA被认为是一种非编码RNA。而近年来研究发现，circRNA在应激等某些特殊情况下，可作为蛋白合成模版编码并翻译蛋白。越来越多的研究也证实circRNA来源的蛋白在细胞应激、肌形成以及肿瘤增殖过程中发挥重要的生物学功能。COL6A3(Collagen type VIalpha 3chain)是位于染色体16q22.1一种肿瘤抑制基因，是VI型胶原蛋白三条α链的编码基因之一。已有研究表明COL6A3与肌张力障碍、结直肠癌、胰腺癌等疾病有关。

发明内容

本发明为了克服现有技术的不足，从而制造出一种可以抑制肿瘤药物，一种Circ-COL6A3-6401抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于所述Circ-COL6A3-6401抑制剂为Circ-COL6A3-6401核酸片段抑制剂或者Circ-COL6A3-20KD肽段抑制剂，其中Circ-COL6A3-6401核酸片段的序列如SEQ ID NO:1所示；所述的Circ-COL6A3-20KD肽段的序列如SEQ ID NO:2所示。

作为优选：所述Circ-COL6A3-6401核酸片段抑制剂为核酸效应分子；所述核酸效应分子为DNA、RNA、PNA或DNA-RNA-杂合体；所述核酸效应分子抑制Circ-COL6A3-6401整体或局部的表达；所述的核酸效应分子选自siRNA，dsRNA，miRNA，核酶，以及shRNA中一种；所述的Circ-COL6A3-6401核酸片段抑制剂针对核酸序列SEQ ID NO:9而设计获得；所述Circ-COL6A3-6401核酸片段抑制剂为siRNA；所述的抑制剂系针对于Circ-COL6A3-6401环状接口而设计；更优选地，针对Circ-COL6A3-6401第713位至第20位中的任意跨越接口的序列片段而设计；所述序列片段优选18个碱基以上的长度，至少与Circ-COL6A3-6401第744位至17位的序列互补；所述的抑制剂系针对于Circ-COL6A3-6401的以下关键片段中的一个而设计，所述的siRNA选自SEQ ID NO:6-8中的任意一条；所述的Circ-COL6A3-20KD肽段抑制剂为抗体及其功能性片段、或小分子化合物。