[发明专利]一种牡蛎抗氧化活性肽的制备方法

说明书

本发明公开了一种牡蛎抗氧化活性肽的制备方法，所述方法包括以下步骤：取新鲜牡蛎肉，洗净，热水煮熟，然后采用破壁机进行破壁，破壁后加入纯净水，超声10～20min，得均质的混合液，然后加入2000～3000U/g胰蛋白酶，并调节pH值为7～8.5，35～45℃恒温水浴条件下超声酶解，酶解完成后于95℃水浴中灭活10min，然后加入3000～6000u/g木瓜蛋白酶，并调节pH值为6～8，于50℃～60℃恒温水浴中，缓慢搅拌，酶解4～6h，酶解结束后置于沸水浴中灭活10～20min，将灭活后二级酶解液冷却，超滤，得清液，然后通过喷雾干燥，得富含抗氧化肽的牡蛎小分子肽。通过本发明提供的牡蛎抗氧化活性肽的制备方法，能够得到较高的肽得率，并且制备的小分子活性肽具有较强的抗氧化活性。

技术领域

本发明涉及抗氧化肽的制备技术领域，特别涉及一种牡蛎抗氧化活性肽的制备方法。

背景技术

牡蛎(Ostrea gigas thunberg)，别名生蚝、海蛎子，在我国近海分布较为广泛，也是国内四大养殖经济贝类之一，属药食两用经济贝类。牡蛎肉营养丰富，据众多学者的研究，牡蛎肉中的蛋白质可达到45％～57％，在国外享受“海之奶”美誉。由于牡蛎为海洋生物，与陆地生物的温和的生存环境有很大的不同，所以相较于陆源蛋白，牡蛎肉中所含蛋白质的结构更为之丰富，经过酶解就能得到许多氨基酸序列不同的生物活性肽。牡蛎中除了含有人体必需的20种氨基酸外，还含有鸟氨酸、β-氨基丙酸、γ-氨基丁酸、牛磺酸等多种具有重要生理价值的氨基酸，并且，牛磺酸，在牡蛎中游离氨基酸中含量尤其突出，氨基酸占比30.98％，这是其他相同等级的动物不可比拟的。除此之外，牡蛎中还富含多不饱和脂肪酸、糖类化合物、维生素和矿物质。

抗氧化是抗氧化自由基的简称，抗氧化肽(Anti-Oxidant Peptides)是指具有较强抑制生物大分子过氧化和清除体内自由基功能的肽类，一般能从植物和动物的蛋白中提取，也有人工合成。日常生活中，阳光的辐射、空气、饮食、呼吸等都会人体体内产生自由基，适量的自由基有益于身体，但是过多就会容易引发各种疾病，例如：心脏病、帕金森综合征、癌症等。目前研究比较透彻的就有肌肽(L-Carnosine)和谷胱甘肽(Glutathione，GSH)这两种天然的抗氧化肽。现有技术中，Kim EunKyung等人通过酶解鹿肉，并经过一系列的分离提纯得到了活性较强的抗氧化肽；Binsan等从白虾头中提取出具有很好的体外清除自由基及还原能力的抗氧化肽。

而目前对牡蛎的应用，多为煮熟后直接食用或者制成食品调味品，还没有从牡蛎肉质中制备抗氧化肽的报道，对其蛋白质的利用还不够全面用，可见，现有技术还有待改进和提高。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种牡蛎抗氧化活性肽的制备方法，旨在解决现有技术中没有通过牡蛎肉质制备小分子肽及抗氧化活性不够的缺陷。

为了达到上述目的，本发明采取了以下技术方案：

一种牡蛎抗氧化活性肽的制备方法，其中，所述方法包括以下步骤：

步骤S1.预处理：取新鲜牡蛎肉，洗净，热水煮熟，然后采用破壁机进行破壁，破壁后加入纯净水，超声10～20min，得均质的混合液；

步骤S2.一级酶解：取混合液，加入胰蛋白酶，并调节pH值为7～8.5，35～45℃恒温水浴条件下超声酶解，酶解完成后于95℃水浴中灭活10min；

步骤S3.二级酶解：在一级酶解后的混合液中加入木瓜蛋白酶，并调节pH值为6～8，于50℃～60℃恒温水浴中，缓慢搅拌，酶解4～6h，酶解结束后置于沸水浴中灭活10～20min。

步骤S4.分离干燥：将灭活后二级酶解液冷却，超滤，得清液，然后通过喷雾干燥，得富含抗氧化肽的牡蛎小分子肽。

所述牡蛎抗氧化活性肽的制备方法中，所述步骤S1中，所述纯净水的加入量按质液比为1g∶4～6mL进行添加。