[发明专利]一种黄曲霉毒素M1单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种黄曲霉毒素M1单克隆抗体，编码抗体的基因序列包括轻链可变区的序列和重链可变区的序列，轻链可变区的序列如SEQ ID NO:1所示，重链可变区的序列如SEQ ID NO:2所示。本发明采用上述的一种黄曲霉毒素M1单克隆抗体，对黄曲霉毒素M1具有较高亲和力、检测灵敏度高，为间接竞争ELISA试剂盒以及胶体金试纸条的研发推广奠定基础。

技术领域

本发明涉及黄曲霉毒素M1检测技术领域，尤其是涉及一种黄曲霉毒素M1单克隆抗体。

背景技术

黄曲霉毒素M1（Aflatoxin M1，AFM1）是黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）的羟基化代谢产物，属于黄曲霉毒素类化合物，AFM1基本结构为一个羟基取代基的二呋喃环与一个氧杂萘邻酮。动物摄入AFB1后，经体内代谢成AFM1，AFM1主要存在于动物的乳汁、肾脏、肝脏、蛋、肉和尿中。人食用含有AFM1的食物后，会引起机体DNA结构和功能的改变，产生癌变。

《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》GB 2761-2017规定食品（乳及乳制品，婴儿配方食品，较大婴儿和幼儿配方食品，特殊医学用途婴儿配方食品，辅食营养补充品，运动营养食品，孕妇及乳母营养补充食品）中AFM1限量要求≤0.5ug/kg。

目前，黄曲霉毒素M1检测多采用高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱与质谱联用法（LCMS）、气质联用法（GC-MS）等。但是，仪器法进行定量分析具有较低的检测限，并且，仪器操作复杂，费用昂贵，无法达到现场规模快速检测的要求。

发明内容

本发明的目的是提供一种黄曲霉毒素M1单克隆抗体，对黄曲霉毒素M1具有较高亲和力、检测灵敏度高，为间接竞争ELISA试剂盒以及胶体金试纸条的研发推广奠定基础。

为实现上述目的，本发明提供了一种黄曲霉毒素M1单克隆抗体，编码抗体的基因序列包括轻链可变区的序列和重链可变区的序列，轻链可变区的序列如SEQ ID NO:1所示，重链可变区的序列如SEQ ID NO:2所示。

优选的，抗体包含抗体轻链CDR区和抗体重链CDR区，其中：

抗体轻链CDR区包括CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列，抗体重链CDR区包括CDR4、CDR5、CDR6的氨基酸序列。

优选的，轻链CDR1具有SEQ ID NO:3所示的序列，轻链CDR2具有SEQ ID NO:4所示的序列，轻链CDR3具有SEQ ID NO:5所示的序列。

优选的，重链CDR4具有SEQ ID NO:6所示的序列，重链CDR5具有SEQ ID NO:7所示的序列，重链CDR6具有SEQ ID NO:8所示的序列。

优选的，黄曲霉毒素M1单克隆抗体用于制备黄曲霉毒素M1胶体金试纸条。

因此，本发明采用上述一种黄曲霉毒素M1单克隆抗体，对黄曲霉毒素M1具有较高亲和力、检测灵敏度高，为间接竞争ELISA试剂盒以及胶体金试纸条的研发推广奠定基础。免疫分析方法具有成本低、效率高、灵敏度高、对技术人员相对要求低等优点，适用于大量样品的快速检测。并且，单克隆抗体特异性强、灵敏度高，可作为酶联免疫检测和胶体金免疫检测的原料。

下面通过附图和实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。

附图说明

图1是单克隆抗体H-8E6轻链基因序列同源性比对；

图2是单克隆抗体H-8E6重链基因序列同源性比对；

图3单克隆抗体H-8E6轻链氨基酸序列同源性比对；

图4是单克隆抗体H-8E6重链氨基酸序列同源性比对；