[发明专利]一种用于分离捕获尤文肉瘤循环肿瘤细胞的芯片

权利要求书

1.一种用于分离捕获尤文肉瘤循环肿瘤细胞的芯片，其特征在于，所述的芯片包括有血液入口、用于去除大部分血细胞的第一级富集区、位于所述的第一级富集区下游并与之相连通的用于捕获尤文肉瘤CTC的第二级捕获区和废血出口；所述的废血出口包括有设于第一级富集区微柱阵列结构末端的第一级废血出口和第二级捕获区末端的第二级废血出口，且所述的第一级废血出口设有两个，分别对称的设置在微柱阵列结构的两侧；所述的第一级富集区和第二级捕获区由玻璃基底和设于玻璃基底上方的聚合物层组成，所述的第一级富集区内设有三组或三组以上的串联的富集微柱阵列结构，且富集微柱阵列结构的临界尺寸和偏移角度依次递增，所述的第二级捕获区的玻璃基底上修饰有特异性捕获尤文肉瘤CTC的CD99抗体，第二级捕获区的聚合物层上设有V字形鱼骨凹槽结构；所述的V字形鱼骨凹槽结构和玻璃基底之间形成有流体通道；

所述的第一级富集区的微柱阵列结构中设有用于富集肿瘤细胞的富集通道，富集通道位于所述的每组微柱阵列结构的中心位置，微柱阵列的分布以所述的富集通道为中心轴对称排列；位于上一组的微柱阵列结构的富集通道的出口直接连接到下一组微柱阵列结构的入口，所述的第一级富集区的微柱阵列结构中的微柱为圆柱形或三角形，所述的微柱的直径或边长在10-30微米之间，两相邻微柱之间的行间距为20-30微米，列间距为30-50微米，微柱高度为30-40微米，微柱阵列向中间富集通道的偏移角度为1-30度；

所述的V字形鱼骨凹槽宽度为30微米，高度为20微米，两鱼骨槽的间距为50微米，通道的深度为40微米，鱼骨之间的夹角为90度，鱼骨与芯片的夹角为45度。

2.如权利要求1所述的用于分离捕获尤文肉瘤循环肿瘤细胞的芯片，其特征在于，所述的聚合物层为聚二甲基硅氧烷、聚甲基丙烯酸甲酯、聚碳酸酯、聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、聚苯乙烯和/或聚氨酯。

3.如权利要求1所述的用于分离捕获尤文肉瘤循环肿瘤细胞的芯片，其特征在于，所述的V字形鱼骨凹槽结构呈周期性交错排列，每组凹槽结构包括有8条及以上的平行微通道。

4.如权利要求1所述的用于分离捕获尤文肉瘤循环肿瘤细胞的芯片，其特征在于，所述的玻璃基底表面先用3-巯基丙基三甲氧基硅烷和N-马来酰亚胺基丁酰氧基琥珀酰亚胺酯处理；然后将表面掺入抗生蛋白链菌素；最后嫁接CD99抗体得到。

5.如权利要求1所述的用于分离捕获尤文肉瘤循环肿瘤细胞的芯片，其特征在于，经抗体捕获的CTC在经过固定、通透、封闭、抗体染色操作后即可在荧光显微镜下观察鉴定。