[发明专利]一种含涂蜡丝素织物层和再生丝素蛋白载银药物层的双层伤口敷料的制备方法

权利要求书

1.一种含涂蜡丝素织物层和再生丝素蛋白载银药物层的双层伤口敷料的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤1：涂蜡丝素织物的制备：将巴西棕榈蜡溶解在吗啉溶液中，将丝素织物室温拉伸并浸泡在所得蜡溶液中10-30min，晾干过夜，得到涂蜡丝素织物；

步骤2：丝素蛋白水溶液的制备：取蚕茧，将蚕茧剪为片状后放入容器中，加入水，超声震荡洗涤，完毕后取出蚕茧并冲洗，重复上述操作数次；随后将蚕茧干燥；配制碳酸钠溶液，加热至沸腾，加入干燥的蚕茧在搅拌条件下进行脱胶；脱胶完成后，取出丝素蛋白用水冲洗以去除附着丝胶，清洗完成后彻底干燥彻底；配制溴化锂溶液，与干燥后的丝素蛋白混合，加热溶解；将所得丝素蛋白溶液倒入透析袋中透析40-50h以除去溴化锂，期间持续搅拌，并更换透析液；透析后将所得粗制丝素蛋白水溶液冷冻离心，去沉淀取上清，得到精制丝素蛋白水溶液，冷藏备用；

步骤3：丝素蛋白-纳米银混合溶液的制备：配制硝酸银母液，将其与精制丝素蛋白水溶液混合，搅拌混匀，加水稀释，将所得混合溶液置于紫外光下照射，生成纳米银颗粒，得到丝素蛋白-纳米银混合溶液；

步骤4：双层伤口敷料的制备：在模具上将步骤3所得丝素蛋白-纳米银混合溶液浇铸在拉伸的涂蜡丝素织物上，再将模具放入-25~-15℃中预冻，0.5-1.5h后放入-85~-75℃中冷冻过夜，冷冻制模成型后立即进行冷冻干燥，得到双层伤口敷料，将其置于甲醇溶液中处理，用水将多余甲醇冲洗完毕后，55-65℃下干燥保存。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤1中，吗啉溶液的浓度为0.025~0.1%w/v。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2中，取蚕茧13-17个，每个蚕茧剪成4-8片，加水200ml；超声震荡功率为80-120Hz，震荡洗涤3-7min。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2中，蚕茧干燥温度为55-65℃；碳酸钠溶液浓度为0.01-0.03M；脱胶时间15-60min；溴化锂溶液的浓度为9.0-9.5M，加热溶解温度为55-65℃，溶解时间为4-6h。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2中，透析袋长度为13-17cm；冷冻离心条件为8000-10000rpm，1-5℃，15-25min，重复两次。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：透析袋使用前进行预处理：配制浓度为1mM 的 EDTA-二钠溶液，用0.1 M氢氧化钠溶液调节 pH=7.8-8.2；配制2% w/v 碳酸氢钠溶液；按体积比1:1将上述两种溶液混合均匀，加热至沸腾，再将透析袋放入溶液中煮沸5-15min，取出后使用超纯水清洗彻底；清洗完毕后，再放入的EDTA-二钠溶液中煮沸 5-15min，取出放入超纯水中浸泡备用。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤3中，加水稀释后丝素蛋白的浓度为3-6%g/ml；硝酸银浓度为0.02-0.08%g/ml；紫外光波长为365nm，照射时间4-6h。

8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤4中，甲醇溶液浓度为85-95%v/v，处理时间20-40min。